カロテノイド−フェオフルバイド複合体およびそれらを用いる発癌ウイルス活性化抑制剤
【課題】発癌ウイルス活性化抑制作用を持つ新規カロテノイドの提供。
【解決手段】下記化学構造式で示されるフコキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステルなどのカロテノイド−フェオフルバイド複合体。
【解決手段】下記化学構造式で示されるフコキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステルなどのカロテノイド−フェオフルバイド複合体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カロテノイド−フェオフルバイド複合体に関する。より詳細には、カロテノイド−フェオフルバイド複合体およびそれらを用いる発癌ウイルス活性化抑制剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
カロテノイドは赤、橙、黄色を示すテトラテルペン色素で微生物、植物、動物に広く分布する化合物群であり現在までにおよそ７５０種の存在が知られている（G. Britton et al., Carotenoids Handbook, Birkhauser Verlag, Basel2004、宮下和夫、カロテノイドの科学と最新の応用技術、シーエムシー、２００９）。さらに、カロテノイドは抗酸化作用、発癌予防効果、生活習慣病予防などで注目されている化合物である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
このようにカロテノイドは重要な生理活性天然有機化合物である。そこで発明者は、さらなる生理活性を持つ新規天然カロテノイドをスクリーニングした。
【０００４】
本発明の課題は天然物由来の新規カロテノイドを提供することである。さらに詳しく述べれば発癌ウイルス活性化抑制効果を持つ天然新規カロテノイドを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは鋭意検討を重ねた結果、海産の巻貝であるトコブシ (Haliotis diversicolor aquatilis) およびアワビ (Haliotis discus discus)から化学構造式１〜５で示される新規カロテノイドを見出した。さらに、これらの化合物が発癌ウイルス活性化抑制作用を持つことを見出し発明を完成した。
【０００６】
すなわち、本発明は、化学構造式６で示される新規化合物、カロテノイド−フェオフルバイド複合体である。
【化６】
ここでＲは下記化合物ａ〜ｅのいずれかである。
【０００７】
したがって、本発明の化合物は、
上記化合物ａに相当する下記化合物１［化１］、
上記化合物ｂに相当する下記化合物２［化２］、
上記化合物ｃに相当する下記化合物３［化３］、
上記化合物ｄに相当する下記化合物４［化４］、
上記化合物ｅに相当する下記化合物５［化５］、
で示されるカロテノイド−フェオフルバイド複合体である。
【化１】
【化２】
【化３】
【化４】
【化５】
【０００８】
化合物１はフコキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステル、化合物２はハロシンチアキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステル、化合物３はルテイン３−ピロフェオフルバイドＡエステル、化合物４はルテイン３' −ピロフェオフルバイドＡエステル、化合物５はムタトキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステルである。これらの化合物はカロテノイドとフェオフルバイドの一種であるピロフェオフルバイドＡがエステル結合で結合した全く新しい構造を持つ化合物群である。
【発明の効果】
【０００９】
化学式１〜５で示される新規化合物は発癌ウイルスであるエプシュタインバールウイルスのゲノムの発現を顕著に抑制する効果を示す。
【００１０】
化学式１〜５で示される新規化合物は、古来食用に供されてきたアワビ、とこぶしの食用部分から抽出されたものであり、細胞毒性は認められない。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明における新規化合物１〜５は海産巻貝のトコブシまたはアワビの消化管部分（中腸腺）からアセトンやエタノールなどの有機溶媒を用いて抽出することができる。さらにこの抽出物をシリカゲルクロマトグラフィーにより分離、精製することで化合物１〜５を調整することができる。
【実施例１】
【００１２】
新規化合物１〜５の抽出、分離
化合物１〜５は一例として、次のような手順により抽出、分離される。すなわち、トコブシの消化管１００ｇをアセトンで抽出する。抽出エキスをシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより成分分画する。エーテル/ヘキサン（６：４）で溶出する褐色のフラクションをさらにシリカゲルを固定相、アセトン/ヘキサン（３：７）を移動相とするHPLCにより分離することにより化合物１（6.6mg）、２（1.0mg）、３（0.2mg）、４（0.2mg）、５（0.2mg）をそれぞれ単離した。これらの化合物の構造はFABMSおよびNMRにより決定した。それらのスペクトルデータを［表１］１〜３に示した。
【表１−１】
【表１−２】
【表１−３】
【実施例２】
【００１３】
新規化合物１〜５の発ガンウイルス活性化抑制作用
エプスタイン−バールウイルス・ゲノムの発現阻害活性の測定を次の条件で行った。エプスタイン−バール ウイルス潜在感染ヒトリンパ芽球細胞株、ラジ細胞の培養液としてＰＲＭＩ１６４０に胎仔血清及び抗生物質を加えたものを使用した。この培養条件下で、エプスタイン−バール ウイルス早期抗原の自然発生率は０．１％以下である。１×１０6細胞／ｍｌの濃度に調整したラジ細胞を、４ｍＭのｎ−酪酸、２０ｎｇ／ｍｌのＴＰＡ、それに１０００mol ratio／TPA(20ng=32pmol/ml)の被検物質を加えた上記培養液中で３７℃、４８時間培養した、上咽頭癌患者血清を用いた間接蛍光抗体法にてエプスタイン−バール ウイルス早期抗原を発現した細胞を検出し、陽性細胞の比率を被検物質を加えなかったコントロールに対して算出し、ウイルス・ゲノムの再現阻害活性とした。それぞれの化合物の活性はIC50値 (mol ratio/TPA)で示した［表2］。これらの化合物はすでに発癌予防効果が知られている天然カロテノイドのカプサンチン（特開平11−139966、特開平10−236968）と同等もしくはα-カロテン（宮下和夫、カロテノイドの科学と最新の応用技術、シーエムシー、２００９）より優れた効果を示した。
【表２】
【産業上の利用可能性】
【００１４】
本発明による発癌ウイルス活性化抑制作用を持つ新規カロテノイド１−５を食品や医薬品に用いることにより癌予防効果が期待される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】特開平11−139966
【特許文献２】特開平10−236968
【非特許文献】
【００１６】
【非特許文献１】G. Britton et al., Carotenoids Handbook, Birkhauser Verlag, Basel 2004
【非特許文献２】宮下和夫、カロテノイドの科学と最新の応用技術、シーエムシー、２００９
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カロテノイド−フェオフルバイド複合体に関する。より詳細には、カロテノイド−フェオフルバイド複合体およびそれらを用いる発癌ウイルス活性化抑制剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
カロテノイドは赤、橙、黄色を示すテトラテルペン色素で微生物、植物、動物に広く分布する化合物群であり現在までにおよそ７５０種の存在が知られている（G. Britton et al., Carotenoids Handbook, Birkhauser Verlag, Basel2004、宮下和夫、カロテノイドの科学と最新の応用技術、シーエムシー、２００９）。さらに、カロテノイドは抗酸化作用、発癌予防効果、生活習慣病予防などで注目されている化合物である。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
このようにカロテノイドは重要な生理活性天然有機化合物である。そこで発明者は、さらなる生理活性を持つ新規天然カロテノイドをスクリーニングした。
【０００４】
本発明の課題は天然物由来の新規カロテノイドを提供することである。さらに詳しく述べれば発癌ウイルス活性化抑制効果を持つ天然新規カロテノイドを提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは鋭意検討を重ねた結果、海産の巻貝であるトコブシ (Haliotis diversicolor aquatilis) およびアワビ (Haliotis discus discus)から化学構造式１〜５で示される新規カロテノイドを見出した。さらに、これらの化合物が発癌ウイルス活性化抑制作用を持つことを見出し発明を完成した。
【０００６】
すなわち、本発明は、化学構造式６で示される新規化合物、カロテノイド−フェオフルバイド複合体である。
【化６】
ここでＲは下記化合物ａ〜ｅのいずれかである。
【０００７】
したがって、本発明の化合物は、
上記化合物ａに相当する下記化合物１［化１］、
上記化合物ｂに相当する下記化合物２［化２］、
上記化合物ｃに相当する下記化合物３［化３］、
上記化合物ｄに相当する下記化合物４［化４］、
上記化合物ｅに相当する下記化合物５［化５］、
で示されるカロテノイド−フェオフルバイド複合体である。
【化１】
【化２】
【化３】
【化４】
【化５】
【０００８】
化合物１はフコキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステル、化合物２はハロシンチアキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステル、化合物３はルテイン３−ピロフェオフルバイドＡエステル、化合物４はルテイン３' −ピロフェオフルバイドＡエステル、化合物５はムタトキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステルである。これらの化合物はカロテノイドとフェオフルバイドの一種であるピロフェオフルバイドＡがエステル結合で結合した全く新しい構造を持つ化合物群である。
【発明の効果】
【０００９】
化学式１〜５で示される新規化合物は発癌ウイルスであるエプシュタインバールウイルスのゲノムの発現を顕著に抑制する効果を示す。
【００１０】
化学式１〜５で示される新規化合物は、古来食用に供されてきたアワビ、とこぶしの食用部分から抽出されたものであり、細胞毒性は認められない。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明における新規化合物１〜５は海産巻貝のトコブシまたはアワビの消化管部分（中腸腺）からアセトンやエタノールなどの有機溶媒を用いて抽出することができる。さらにこの抽出物をシリカゲルクロマトグラフィーにより分離、精製することで化合物１〜５を調整することができる。
【実施例１】
【００１２】
新規化合物１〜５の抽出、分離
化合物１〜５は一例として、次のような手順により抽出、分離される。すなわち、トコブシの消化管１００ｇをアセトンで抽出する。抽出エキスをシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより成分分画する。エーテル/ヘキサン（６：４）で溶出する褐色のフラクションをさらにシリカゲルを固定相、アセトン/ヘキサン（３：７）を移動相とするHPLCにより分離することにより化合物１（6.6mg）、２（1.0mg）、３（0.2mg）、４（0.2mg）、５（0.2mg）をそれぞれ単離した。これらの化合物の構造はFABMSおよびNMRにより決定した。それらのスペクトルデータを［表１］１〜３に示した。
【表１−１】
【表１−２】
【表１−３】
【実施例２】
【００１３】
新規化合物１〜５の発ガンウイルス活性化抑制作用
エプスタイン−バールウイルス・ゲノムの発現阻害活性の測定を次の条件で行った。エプスタイン−バール ウイルス潜在感染ヒトリンパ芽球細胞株、ラジ細胞の培養液としてＰＲＭＩ１６４０に胎仔血清及び抗生物質を加えたものを使用した。この培養条件下で、エプスタイン−バール ウイルス早期抗原の自然発生率は０．１％以下である。１×１０6細胞／ｍｌの濃度に調整したラジ細胞を、４ｍＭのｎ−酪酸、２０ｎｇ／ｍｌのＴＰＡ、それに１０００mol ratio／TPA(20ng=32pmol/ml)の被検物質を加えた上記培養液中で３７℃、４８時間培養した、上咽頭癌患者血清を用いた間接蛍光抗体法にてエプスタイン−バール ウイルス早期抗原を発現した細胞を検出し、陽性細胞の比率を被検物質を加えなかったコントロールに対して算出し、ウイルス・ゲノムの再現阻害活性とした。それぞれの化合物の活性はIC50値 (mol ratio/TPA)で示した［表2］。これらの化合物はすでに発癌予防効果が知られている天然カロテノイドのカプサンチン（特開平11−139966、特開平10−236968）と同等もしくはα-カロテン（宮下和夫、カロテノイドの科学と最新の応用技術、シーエムシー、２００９）より優れた効果を示した。
【表２】
【産業上の利用可能性】
【００１４】
本発明による発癌ウイルス活性化抑制作用を持つ新規カロテノイド１−５を食品や医薬品に用いることにより癌予防効果が期待される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】特開平11−139966
【特許文献２】特開平10−236968
【非特許文献】
【００１６】
【非特許文献１】G. Britton et al., Carotenoids Handbook, Birkhauser Verlag, Basel 2004
【非特許文献２】宮下和夫、カロテノイドの科学と最新の応用技術、シーエムシー、２００９
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化学構造式６で示されるカロテノイド−フェオフルバイド複合体。
【化６】
ここでＲは下記化合物ａ〜ｅのいずれかである。
【請求項２】
下記化学構造式１で示されるフコキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステルである請求項１記載のカロテノイド−フェオフルバイド複合体。
【化１】
【請求項３】
下記化学構造式２で示されるハロシンチアキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステルである請求項１記載のカロテノイド−フェオフルバイド複合体。
【化２】
【請求項４】
下記化学構造式３で示されるルテイン３−ピロフェオフルバイドＡエステルである請求項１記載のカロテノイド−フェオフルバイド複合体。
【化３】
【請求項５】
下記化学構造式４で示されるルテイン３‘−ピロフェオフルバイドＡエステルである請求項１記載のカロテノイド−フェオフルバイド複合体。
【化４】
【請求項６】
下記化学構造式５で示されるムタトキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステルであるカロテノイド−フェオフルバイド複合体。
【化５】
【請求項７】
下記化学構造式６で示されるカロテノイド−フェオフルバイド複合体を用いる発癌ウイルス活性化抑制剤。
【化６】
ここでＲは下記化合物ａ〜ｅのいずれかである。
【請求項８】
下記化学構造式１で示されるフコキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステルであるカロテノイド−フェオフルバイド複合体を用いる請求項７記載の発癌ウイルス活性化抑制剤。
【化１】
【請求項９】
下記化学構造式２で示されるハロシンチアキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステルであるカロテノイド−フェオフルバイド複合体を用いる請求項７記載の発癌ウイルス活性化抑制剤。
【化２】
【請求項１０】
下記化学構造式３で示されるルテイン３−ピロフェオフルバイドＡエステルであるカロテノイド−フェオフルバイド複合体を用いる請求項７記載の発癌ウイルス活性化抑制剤。
【化３】
【請求項１１】
下記化学構造式４で示されるルテイン３‘−ピロフェオフルバイドＡエステルであるカロテノイド−フェオフルバイド複合体を用いる請求項７記載の発癌ウイルス活性化抑制剤。
【化４】
【請求項１２】
下記化学構造式５で示されるムタトキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステルであるカロテノイド−フェオフルバイド複合体を用いる請求項７記載の発癌ウイルス活性化抑制剤。
【化５】
【請求項１】
下記化学構造式６で示されるカロテノイド−フェオフルバイド複合体。
【化６】
ここでＲは下記化合物ａ〜ｅのいずれかである。
【請求項２】
下記化学構造式１で示されるフコキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステルである請求項１記載のカロテノイド−フェオフルバイド複合体。
【化１】
【請求項３】
下記化学構造式２で示されるハロシンチアキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステルである請求項１記載のカロテノイド−フェオフルバイド複合体。
【化２】
【請求項４】
下記化学構造式３で示されるルテイン３−ピロフェオフルバイドＡエステルである請求項１記載のカロテノイド−フェオフルバイド複合体。
【化３】
【請求項５】
下記化学構造式４で示されるルテイン３‘−ピロフェオフルバイドＡエステルである請求項１記載のカロテノイド−フェオフルバイド複合体。
【化４】
【請求項６】
下記化学構造式５で示されるムタトキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステルであるカロテノイド−フェオフルバイド複合体。
【化５】
【請求項７】
下記化学構造式６で示されるカロテノイド−フェオフルバイド複合体を用いる発癌ウイルス活性化抑制剤。
【化６】
ここでＲは下記化合物ａ〜ｅのいずれかである。
【請求項８】
下記化学構造式１で示されるフコキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステルであるカロテノイド−フェオフルバイド複合体を用いる請求項７記載の発癌ウイルス活性化抑制剤。
【化１】
【請求項９】
下記化学構造式２で示されるハロシンチアキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステルであるカロテノイド−フェオフルバイド複合体を用いる請求項７記載の発癌ウイルス活性化抑制剤。
【化２】
【請求項１０】
下記化学構造式３で示されるルテイン３−ピロフェオフルバイドＡエステルであるカロテノイド−フェオフルバイド複合体を用いる請求項７記載の発癌ウイルス活性化抑制剤。
【化３】
【請求項１１】
下記化学構造式４で示されるルテイン３‘−ピロフェオフルバイドＡエステルであるカロテノイド−フェオフルバイド複合体を用いる請求項７記載の発癌ウイルス活性化抑制剤。
【化４】
【請求項１２】
下記化学構造式５で示されるムタトキサンチン−ピロフェオフルバイドＡエステルであるカロテノイド−フェオフルバイド複合体を用いる請求項７記載の発癌ウイルス活性化抑制剤。
【化５】
【公開番号】特開２０１２−２１９０５１（Ｐ２０１２−２１９０５１Ａ）
【公開日】平成２４年１１月１２日（２０１２．１１．１２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−８５２２０（Ｐ２０１１−８５２２０）
【出願日】平成２３年４月７日（２０１１．４．７）
【出願人】（０００００２３３６）財団法人生産開発科学研究所 (10)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年１１月１２日（２０１２．１１．１２）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年４月７日（２０１１．４．７）
【出願人】（０００００２３３６）財団法人生産開発科学研究所 (10)
【Ｆターム（参考）】
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