ホンシメジ新菌株
【課題】ホンシメジの新菌株及びそれを用いたホンシメジの生産法を提供する。
【解決手段】
ホンシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｓｈｉｍｅｊｉ）新菌株である新生８５株に関する。この新菌株は、菌さんの色が著しい淡灰色を呈し、また「菌柄の最大径÷菌さん下部の菌柄直径」の値が従来菌株に比べてきわめて大きくホンシメジ本来の極太感をより良く示すなど、消費者に好まれるやすい良好な形態を有する。さらに栽培期間、収量等の栽培特性については、従来の優良菌株と同等の優れた形質を有している。
また、菌床を用いた人工栽培法でホンシメジを生産する方法であって、種菌として上記新菌株を用いるホンシメジの生産法も提供する。
【解決手段】
ホンシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｓｈｉｍｅｊｉ）新菌株である新生８５株に関する。この新菌株は、菌さんの色が著しい淡灰色を呈し、また「菌柄の最大径÷菌さん下部の菌柄直径」の値が従来菌株に比べてきわめて大きくホンシメジ本来の極太感をより良く示すなど、消費者に好まれるやすい良好な形態を有する。さらに栽培期間、収量等の栽培特性については、従来の優良菌株と同等の優れた形質を有している。
また、菌床を用いた人工栽培法でホンシメジを生産する方法であって、種菌として上記新菌株を用いるホンシメジの生産法も提供する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ホンシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｓｈｉｍｅｊｉ）の新菌株及び当該菌株を用いたホンシメジの生産方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来、ホンシメジは菌根菌に属するため、人工栽培は極めて困難と考えられてきた。しかし、滋賀県森林センターの太田氏により、大麦とおが屑を用いたホンジメジの実用的な培養法が開発され、また、人工栽培に用いることのできる優良菌株としてホンシメジＹＧ６Ｌが報告された（特許文献１，２および非特許文献１参照）。
【０００３】
また、発明者らはＹＧ６Ｌを親株として、より人工栽培に適した菌株１０８株（ＦＥＲＭ Ｐ−２０９０７）を作出し、報告している（特許文献３）。
【０００４】
しかしながら公知の優良株とされてきたホンシメジＹＧ６Ｌや１０８株は、人工栽培が可能であるものの、菌さんの色が暗色を帯びる、菌柄が十分に太くならずホンシメジ本来の極太感がないなど、消費者に好まれる形態を呈さないという複数の問題点を有していることから、商品化を念頭に考慮すると必ずしも最適の菌株とは言えなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特公平８−４４２７号公報
【特許文献２】特開２００２−２４７９１７号公報
【特許文献３】特開２００７−３１２７０８号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】日本菌学会会報、３９巻、１３−２０頁（１９９８）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
したがって本発明は、従来優良菌株として知られてきた１０８株等の菌株の問題点を克服した、新規なホンシメジ菌株を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記目的を達成するため鋭意検討を重ねた結果、公知のホンシメジ菌株であるＹＧ６Ｌと広島県産野生株との交配種を親株とし、これと石川県産野生株とを交配させることで、１０８株の長所を維持しつつも欠点を克服した新規なホンシメジ菌株を提供できることを見出し、本発明を完成した。したがって、本発明は以下の通りである。
【０００９】
（１）ホンシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｓｈｉｍｅｊｉ）新生８５株（ＦＥＲＭ ＡＰ−２２０７０）。
（２）菌床を用いた人工栽培法でホンシメジを生産する方法であって、種菌として（１）記載の菌株、又は菌さんの色が淡灰色を呈し、かつ太い菌柄を有する（１）記載の株の変異株を用いることを特徴とする、ホンシメジの生産法。
【発明の効果】
【００１０】
本発明のホンシメジ新菌株は、従来の優良菌株と同様のすぐれた栽培形質を保持している上に、（１）菌さんの色が淡灰色を呈し、（２）「菌柄の最大径÷菌さん下部の菌柄直径」の値が平均２．０以上であってホンシメジ特有の極太感を有するなど、消費者の嗜好によく合致した、商品化に適した形質を有するものである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
（１）本発明菌株
本発明の新菌株は、ホンシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｓｈｉｍｅｊｉ）新生８５株である。この菌株は、平成２３年２月１８日に（独）産業技術総合研究所・特許生物寄託センターに寄託され、受領番号として「ＦＥＲＭ ＡＰ−２２０７０」が付与されている。
【００１２】
本発明のホンシメジ新生８５株は、以下のような栽培特性、商品特性を有することから、産業的に有用な優良菌株である。
【００１３】
（１）菌さんの色が淡灰色を呈する。
（２）「菌柄の最大径÷菌さん下部の菌柄直径」の値が平均２．０以上である。
（３）栽培期間、１ビン当たりの収量等において、１０８株、ＹＧ６Ｌなどの従来の優良品種と同程度か、またはそれ以上の優れた栽培特性を有する。
【００１４】
なお、「菌床を用いた人工栽培」とは、以下の（Ａ）〜（Ｄ）工程からなるホンシメジの栽培に通常採用されている栽培方法を意味し、詳細な栽培条件等は、以下に説明したとおりである。
（Ａ）おが屑と栄養材を混合後、殺菌し、培養容器に充填する工程
（Ｂ）種菌接種後、１８〜２８℃の温度条件下、暗室にて培養する工程
（Ｃ）菌廻り完了後、覆土を行い、追加培養する工程、及び
（Ｄ）（Ｂ）工程より３℃以上低い１２〜１８℃の温度条件下、明室にて子実体を発生させる工程
【００１５】
本発明の菌株は、一方の親株として、公知の優良菌株であるＹＧ６Ｌ（ＮＢＲＣ１００３２５）と広島県産野生株の交配種を用い、他方の親株として石川県産の野生株を用い、公知の人工交配法にて作出した菌株の中から、上記特徴・形質を有するものを選抜することにより取得できる。
【００１６】
本発明の菌株又はその変異株を種菌として使用する本発明のホンシメジの生産法は、菌床を用いたホンシメジの公知の人工栽培法に準じて実施することができる。
【００１７】
すなわち、培養基としては、栄養材（きのこ栽培に常用されている穀物粉（麦類、トウモロコシ類、米類など）、ふすま、糠、サトウキビの搾り粕、乾燥おから等）とおが屑（広葉樹単独、または針葉樹との混合おが屑）を混合したものを用いることができる。
【００１８】
このような培養基に水を含ませて水湿潤状態とし、これを常圧又は高圧加熱により滅菌したものを培地として使用する。なお、培養基の含水率としては、５０〜７０重量％、好ましくは５５〜６５重量％が適当である。
【００１９】
このような培養基をナメコビンなどのキノコ栽培用の容器に充填後、上記本発明のホンシメジ菌株を接種後、１８〜２８℃の暗所にて第一段の培養を行ったのち、土（鹿沼土など）で培地表面を被覆し、追加培養後、子実体の発生を促すため、第一段の温度より３℃以上低い１２〜１８℃の温度の明所にて第二段の培養を行なうことで、ホンシメジを生産することができる。
【００２０】
なお、変異株とは、本発明のホンシメジ新生８５株の胞子を変異処理あるいは交配処理して得られる株で、上記説明したように、１０８株に比べて菌さんの色が著しい淡灰色を呈し、かつきわめて太い菌柄を有する等の栽培特性や商品特性を実質的に有しているものを意味する。このような変異株は、当業者であれば常法により取得可能である。
【実施例】
【００２１】
以下、実施例に基づき、詳細に説明するが、本発明がこれに限定されないことは明らかである。
【００２２】
（１）本発明菌株の作出・選抜
広島県産のホンシメジ野生株と公知の優良菌株ＹＧ６Ｌ株の交配種、および石川県産のホンシメジ野生株から胞子を分離し、対峙培養により交配株を作出・選抜を行った。その中で栽培的特性及び形態的特性の優れた菌株新生８５株を選抜し、諸性質が安定していることを確認して、育成を完了した。
【００２３】
（２）遺伝的特性
グルコース・イーストエキス（ＧＹ）培地（１０００ｍｌあたりの組成：グルコース２０ｇ、酵母エキス２ｇ、寒天１５ｇ、塩酸でｐＨ５．４に調整）を使用し、２５℃で２１日間培養して、帯線形成及び嫌色反応の有無を観察した。なお、培地の作製には直径９ｃｍのシャーレを使用した。
【００２４】
その結果、下記表に示すように、新生８５株とＹＧ６Ｌ株とを対峙培養した場合、帯線は形成されず、嫌色反応はコロニー間に隙間や隆起した境界を生じた。なお、判断基準は以下に示すとおりである。
【００２５】
【表１】
【００２６】
帯線形成：
コロニー間に、着色した線を形成する。 ＋
コロニー間に、薄く着色した線を形成する。 ±
コロニー間に、着色した線を形成しない。 −
【００２７】
嫌色反応：
コロニー間に、明瞭な隙間や隆起した境界を生じる。 ＋
コロニー間に、隙間や隆起した境界を生じる。 ±
コロニー間に、隙間や隆起した境界を生じない。 −
【００２８】
（３）生理的特性
ＧＹ培地を使用し、１０℃，１５℃，２０℃，２２．５℃，２５℃，３０℃の各温度帯で菌糸成長速度を測定した。なお寒天培地のｐＨは５．６±０．２とした。その結果、新生８５株の最適成長温度は２５℃前後であることが確認された。
【００２９】
次に、ＧＹ培地における新生８５株の菌叢の密度、性状、周縁部の性状、色を観察した。その結果、菌糸密度は普通で、気中菌糸は発達せず、菌叢の色は白色であった。
【００３０】
（４）栽培特性
（試験方法）
栽培特性試験は、広葉樹おがくずまたは針葉樹おがくずとの混合物に、麦、トウモロコシ、米などの穀物粉を容量比２：１程度の割合で混合し、含水率を６０％程度に調整した培地で行った。栽培容器は口径７５ｍｍ、容量８００ｃｃのナメコワイドＰＰビンを用いた。培地充填量は１ビンあたり３５０±２０ｇとし、ビンの肩まで詰めて高圧滅菌した。滅菌放冷後、約２０ｍｌのおがくず種菌を接種し、２２±２℃で培養を行った。
【００３１】
菌廻り完了まで培養し、湿らせた鹿沼土を覆土してさらに同条件で７日間の追培養を行った。追加培養後、子実体の発生・生育は、１５〜１６℃の温度条件下、湿度９０％以上、明るさ３００〜５００ルクス（Ｌｕｘ）下で行った。
【００３２】
発生した子実体が十分に成長し、傘が４〜６分程度開いた状態の時にホンシメジを収穫した。なお、本栽培試験は、最低１区３２本を３回繰り返し行った。
【００３３】
（結果）
栽培試験より得られた新生８５株と、従来優良品種として知られてきたＹＧ６Ｌおよび１０８株の栽培特性とを以下表に示す。
【００３４】
【表２】
【００３５】
なお、ホンシメジ各部位の計測は、各栽培ビンから、（菌さんの直径１５ｍｍ以上、菌柄の長さ２５ｍｍ以上）のものを選抜して行った。
【００３６】
試験の結果、従来優良とされていた１０８株と本発明の新生８５株では、収穫までの栽培日数等の各種栽培特性はほぼ同等であった。また上記表に示したように、本発明にて新たに得られたホンシメジ新生８５株は、従来の優良菌株と比較して、菌さんの色が著しい淡灰色を呈し、かつホンシメジ特有のきわめて太い菌柄を有するなど、消費者の嗜好性が高い性質を有していることが明らかになった。
【００３７】
［公知菌株 ＹＧ６Ｌ（ＮＢＲＣ１００３２５）菌株情報］
【００３８】
［受領書］
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ホンシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｓｈｉｍｅｊｉ）の新菌株及び当該菌株を用いたホンシメジの生産方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来、ホンシメジは菌根菌に属するため、人工栽培は極めて困難と考えられてきた。しかし、滋賀県森林センターの太田氏により、大麦とおが屑を用いたホンジメジの実用的な培養法が開発され、また、人工栽培に用いることのできる優良菌株としてホンシメジＹＧ６Ｌが報告された（特許文献１，２および非特許文献１参照）。
【０００３】
また、発明者らはＹＧ６Ｌを親株として、より人工栽培に適した菌株１０８株（ＦＥＲＭ Ｐ−２０９０７）を作出し、報告している（特許文献３）。
【０００４】
しかしながら公知の優良株とされてきたホンシメジＹＧ６Ｌや１０８株は、人工栽培が可能であるものの、菌さんの色が暗色を帯びる、菌柄が十分に太くならずホンシメジ本来の極太感がないなど、消費者に好まれる形態を呈さないという複数の問題点を有していることから、商品化を念頭に考慮すると必ずしも最適の菌株とは言えなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特公平８−４４２７号公報
【特許文献２】特開２００２−２４７９１７号公報
【特許文献３】特開２００７−３１２７０８号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】日本菌学会会報、３９巻、１３−２０頁（１９９８）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
したがって本発明は、従来優良菌株として知られてきた１０８株等の菌株の問題点を克服した、新規なホンシメジ菌株を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記目的を達成するため鋭意検討を重ねた結果、公知のホンシメジ菌株であるＹＧ６Ｌと広島県産野生株との交配種を親株とし、これと石川県産野生株とを交配させることで、１０８株の長所を維持しつつも欠点を克服した新規なホンシメジ菌株を提供できることを見出し、本発明を完成した。したがって、本発明は以下の通りである。
【０００９】
（１）ホンシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｓｈｉｍｅｊｉ）新生８５株（ＦＥＲＭ ＡＰ−２２０７０）。
（２）菌床を用いた人工栽培法でホンシメジを生産する方法であって、種菌として（１）記載の菌株、又は菌さんの色が淡灰色を呈し、かつ太い菌柄を有する（１）記載の株の変異株を用いることを特徴とする、ホンシメジの生産法。
【発明の効果】
【００１０】
本発明のホンシメジ新菌株は、従来の優良菌株と同様のすぐれた栽培形質を保持している上に、（１）菌さんの色が淡灰色を呈し、（２）「菌柄の最大径÷菌さん下部の菌柄直径」の値が平均２．０以上であってホンシメジ特有の極太感を有するなど、消費者の嗜好によく合致した、商品化に適した形質を有するものである。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
（１）本発明菌株
本発明の新菌株は、ホンシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｓｈｉｍｅｊｉ）新生８５株である。この菌株は、平成２３年２月１８日に（独）産業技術総合研究所・特許生物寄託センターに寄託され、受領番号として「ＦＥＲＭ ＡＰ−２２０７０」が付与されている。
【００１２】
本発明のホンシメジ新生８５株は、以下のような栽培特性、商品特性を有することから、産業的に有用な優良菌株である。
【００１３】
（１）菌さんの色が淡灰色を呈する。
（２）「菌柄の最大径÷菌さん下部の菌柄直径」の値が平均２．０以上である。
（３）栽培期間、１ビン当たりの収量等において、１０８株、ＹＧ６Ｌなどの従来の優良品種と同程度か、またはそれ以上の優れた栽培特性を有する。
【００１４】
なお、「菌床を用いた人工栽培」とは、以下の（Ａ）〜（Ｄ）工程からなるホンシメジの栽培に通常採用されている栽培方法を意味し、詳細な栽培条件等は、以下に説明したとおりである。
（Ａ）おが屑と栄養材を混合後、殺菌し、培養容器に充填する工程
（Ｂ）種菌接種後、１８〜２８℃の温度条件下、暗室にて培養する工程
（Ｃ）菌廻り完了後、覆土を行い、追加培養する工程、及び
（Ｄ）（Ｂ）工程より３℃以上低い１２〜１８℃の温度条件下、明室にて子実体を発生させる工程
【００１５】
本発明の菌株は、一方の親株として、公知の優良菌株であるＹＧ６Ｌ（ＮＢＲＣ１００３２５）と広島県産野生株の交配種を用い、他方の親株として石川県産の野生株を用い、公知の人工交配法にて作出した菌株の中から、上記特徴・形質を有するものを選抜することにより取得できる。
【００１６】
本発明の菌株又はその変異株を種菌として使用する本発明のホンシメジの生産法は、菌床を用いたホンシメジの公知の人工栽培法に準じて実施することができる。
【００１７】
すなわち、培養基としては、栄養材（きのこ栽培に常用されている穀物粉（麦類、トウモロコシ類、米類など）、ふすま、糠、サトウキビの搾り粕、乾燥おから等）とおが屑（広葉樹単独、または針葉樹との混合おが屑）を混合したものを用いることができる。
【００１８】
このような培養基に水を含ませて水湿潤状態とし、これを常圧又は高圧加熱により滅菌したものを培地として使用する。なお、培養基の含水率としては、５０〜７０重量％、好ましくは５５〜６５重量％が適当である。
【００１９】
このような培養基をナメコビンなどのキノコ栽培用の容器に充填後、上記本発明のホンシメジ菌株を接種後、１８〜２８℃の暗所にて第一段の培養を行ったのち、土（鹿沼土など）で培地表面を被覆し、追加培養後、子実体の発生を促すため、第一段の温度より３℃以上低い１２〜１８℃の温度の明所にて第二段の培養を行なうことで、ホンシメジを生産することができる。
【００２０】
なお、変異株とは、本発明のホンシメジ新生８５株の胞子を変異処理あるいは交配処理して得られる株で、上記説明したように、１０８株に比べて菌さんの色が著しい淡灰色を呈し、かつきわめて太い菌柄を有する等の栽培特性や商品特性を実質的に有しているものを意味する。このような変異株は、当業者であれば常法により取得可能である。
【実施例】
【００２１】
以下、実施例に基づき、詳細に説明するが、本発明がこれに限定されないことは明らかである。
【００２２】
（１）本発明菌株の作出・選抜
広島県産のホンシメジ野生株と公知の優良菌株ＹＧ６Ｌ株の交配種、および石川県産のホンシメジ野生株から胞子を分離し、対峙培養により交配株を作出・選抜を行った。その中で栽培的特性及び形態的特性の優れた菌株新生８５株を選抜し、諸性質が安定していることを確認して、育成を完了した。
【００２３】
（２）遺伝的特性
グルコース・イーストエキス（ＧＹ）培地（１０００ｍｌあたりの組成：グルコース２０ｇ、酵母エキス２ｇ、寒天１５ｇ、塩酸でｐＨ５．４に調整）を使用し、２５℃で２１日間培養して、帯線形成及び嫌色反応の有無を観察した。なお、培地の作製には直径９ｃｍのシャーレを使用した。
【００２４】
その結果、下記表に示すように、新生８５株とＹＧ６Ｌ株とを対峙培養した場合、帯線は形成されず、嫌色反応はコロニー間に隙間や隆起した境界を生じた。なお、判断基準は以下に示すとおりである。
【００２５】
【表１】
【００２６】
帯線形成：
コロニー間に、着色した線を形成する。 ＋
コロニー間に、薄く着色した線を形成する。 ±
コロニー間に、着色した線を形成しない。 −
【００２７】
嫌色反応：
コロニー間に、明瞭な隙間や隆起した境界を生じる。 ＋
コロニー間に、隙間や隆起した境界を生じる。 ±
コロニー間に、隙間や隆起した境界を生じない。 −
【００２８】
（３）生理的特性
ＧＹ培地を使用し、１０℃，１５℃，２０℃，２２．５℃，２５℃，３０℃の各温度帯で菌糸成長速度を測定した。なお寒天培地のｐＨは５．６±０．２とした。その結果、新生８５株の最適成長温度は２５℃前後であることが確認された。
【００２９】
次に、ＧＹ培地における新生８５株の菌叢の密度、性状、周縁部の性状、色を観察した。その結果、菌糸密度は普通で、気中菌糸は発達せず、菌叢の色は白色であった。
【００３０】
（４）栽培特性
（試験方法）
栽培特性試験は、広葉樹おがくずまたは針葉樹おがくずとの混合物に、麦、トウモロコシ、米などの穀物粉を容量比２：１程度の割合で混合し、含水率を６０％程度に調整した培地で行った。栽培容器は口径７５ｍｍ、容量８００ｃｃのナメコワイドＰＰビンを用いた。培地充填量は１ビンあたり３５０±２０ｇとし、ビンの肩まで詰めて高圧滅菌した。滅菌放冷後、約２０ｍｌのおがくず種菌を接種し、２２±２℃で培養を行った。
【００３１】
菌廻り完了まで培養し、湿らせた鹿沼土を覆土してさらに同条件で７日間の追培養を行った。追加培養後、子実体の発生・生育は、１５〜１６℃の温度条件下、湿度９０％以上、明るさ３００〜５００ルクス（Ｌｕｘ）下で行った。
【００３２】
発生した子実体が十分に成長し、傘が４〜６分程度開いた状態の時にホンシメジを収穫した。なお、本栽培試験は、最低１区３２本を３回繰り返し行った。
【００３３】
（結果）
栽培試験より得られた新生８５株と、従来優良品種として知られてきたＹＧ６Ｌおよび１０８株の栽培特性とを以下表に示す。
【００３４】
【表２】
【００３５】
なお、ホンシメジ各部位の計測は、各栽培ビンから、（菌さんの直径１５ｍｍ以上、菌柄の長さ２５ｍｍ以上）のものを選抜して行った。
【００３６】
試験の結果、従来優良とされていた１０８株と本発明の新生８５株では、収穫までの栽培日数等の各種栽培特性はほぼ同等であった。また上記表に示したように、本発明にて新たに得られたホンシメジ新生８５株は、従来の優良菌株と比較して、菌さんの色が著しい淡灰色を呈し、かつホンシメジ特有のきわめて太い菌柄を有するなど、消費者の嗜好性が高い性質を有していることが明らかになった。
【００３７】
［公知菌株 ＹＧ６Ｌ（ＮＢＲＣ１００３２５）菌株情報］
【００３８】
［受領書］
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ホンシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｓｈｉｍｅｊｉ）新生８５株（ＦＥＲＭ ＡＰ−２２０７０）。
【請求項２】
菌床を用いた人工栽培法でホンシメジを生産する方法であって、種菌として請求項１記載の菌株、又は菌さんの色が淡灰色を呈し、かつ太い菌柄を有する請求項１記載の株の変異株を用いることを特徴とする、ホンシメジの生産法。
【請求項１】
ホンシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍ ｓｈｉｍｅｊｉ）新生８５株（ＦＥＲＭ ＡＰ−２２０７０）。
【請求項２】
菌床を用いた人工栽培法でホンシメジを生産する方法であって、種菌として請求項１記載の菌株、又は菌さんの色が淡灰色を呈し、かつ太い菌柄を有する請求項１記載の株の変異株を用いることを特徴とする、ホンシメジの生産法。
【公開番号】特開２０１２−１７５９１５（Ｐ２０１２−１７５９１５Ａ）
【公開日】平成２４年９月１３日（２０１２．９．１３）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−４０２１８（Ｐ２０１１−４０２１８）
【出願日】平成２３年２月２５日（２０１１．２．２５）
【出願人】（０００００６７７０）ヤマサ醤油株式会社 (56)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２４年９月１３日（２０１２．９．１３）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年２月２５日（２０１１．２．２５）
【出願人】（０００００６７７０）ヤマサ醤油株式会社 (56)
【Ｆターム（参考）】
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