新規化合物ステレニン及びその製造方法
【課題】新規メタボリックシンドローム改善薬の提供。
【解決手段】１１β−ＨＳＤ１阻害活性を有する化合物である一般式（Ｉ）［式中、Ｒは−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ（ＣＯ２Ｈ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈ、−Ｈ、または、−ＣＨ２ＣＯＯＨ］で表わされる化合物またはその塩、並びに該化合物の製造方法の提供。
【解決手段】１１β−ＨＳＤ１阻害活性を有する化合物である一般式（Ｉ）［式中、Ｒは−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ（ＣＯ２Ｈ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈ、−Ｈ、または、−ＣＨ２ＣＯＯＨ］で表わされる化合物またはその塩、並びに該化合物の製造方法の提供。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、糖尿病、肥満、高脂血症、高血圧症及びこれらの病態を複合的に発症したメタボリックシンドロームからなる群から選択される少なくとも一つの疾患の、治療及び又は予防薬として有効な１１β−ｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ ｔｙｐｅ１（以下、「１１β-ＨＳＤ１」ともいう。）阻害作用を有し、またそれらの作用を増強せしめる目的で導かれる関連誘導体の合成原料として利用可能な新規化合物、該化合物を有効成分として含有する医薬、該化合物の製造方法、および該化合物を生産する新規微生物に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、食生活、生活習慣および生活環境の変化に伴って、肥満、高血糖、高脂血、高血圧、およびこれらの複数の危険因子が重複したメタボリックシンドローム患者が世界的に増加しており、社会的な問題となっている（非特許文献１）。いずれの治療においてもまず食事療法や運動療法が用いられ、効果が少ないか、または重度の場合に薬物療法が併用される。
【０００３】
糖尿病は、インスリン依存性(Ｉ型、ＩＤＤＭ)とインスリン非依存性(ＩＩ型、ＮＩＤＤＭ)とに分類され、糖尿病患者の９０％以上は後者である。ＩＤＤＭの治療にはインスリン注射が用いられ、ＮＩＤＤＭの治療には、インスリン分泌を促進するスルホニルウレア剤、インスリン抵抗性を改善するチアゾリジンジオン系薬剤、糖の消化吸収を抑制するグリコシダーゼ阻害剤、肝臓での糖新生を抑制するビグアナイド系薬剤などが用いられる（非特許文献２）。しかし、いずれの薬剤も必ずしも十分な効果は得られず、また長期間の使用により有効性が減弱することから、重篤な合併症に至る患者が増えている。
【０００４】
肥満治療では重度の患者において中枢性摂食抑制剤が用いられるが、使用限度期間がありリバウンドがおこることから、十分な効果は得られていない。
【０００５】
高血圧症の治療薬として、血管を拡張させるカルシウム拮抗薬、塩分の排泄を促す利尿薬、交感神経を抑えて心拍数を低下させるβ遮断薬、交感神経を抑えて末梢血管を拡張させるα遮断薬、アンジオテンシンによる血管収縮を抑えるためのアンジオテンシン変換酵素阻害薬およびアンジオテンシン受容体拮抗薬などが挙げられる。しかし、脳卒中の最多発生時間帯である早朝の血圧コントロールが難しく降圧療法の現状はまだ十分とは言えない。
【０００６】
高脂血症の治療薬としては、肝臓でのコレステロール合成を阻害するＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、肝臓での中性脂肪の合成を阻害するフィブラート系薬剤、胆汁酸の排泄を促す陰イオン交換樹脂などが用いられる。高脂血症治療の最終的な目的は冠動脈疾患や脳梗塞をはじめとする動脈硬化性疾患の予防であるが、動脈硬化という病態は高脂血症のみならず、高血圧、糖尿病、肥満、加齢など，さまざまな危険因子が重なり合って発症するため、常にこうしたその他の危険因子にも目を配ることが重要であり、多面的な取り組みが求められる（非特許文献３）。
【０００７】
糖質コルチコイド（ヒトにおけるコルチゾール、げっ歯類におけるコルチコステロン）は種々蛋白質の発現を介して筋肉からのアミノ酸を放出および脂肪組織からの脂肪酸とグリセロールの血中への放出を促進し、これらの基質を用いた肝臓での糖新生を促進させ、ひいては血糖の上昇を促す。また、脂肪組織での未成熟な脂肪細胞を成熟させて肥満へと導き、腎臓では鉱質コルチコイド受容体に作用して、血圧を上昇させる活性を有する。糖質コルチコイドによる活性制御機序としては、視床下部−脳下垂体−副腎皮質経路における産生・分泌による制御の他に、肝臓、脂肪組織、肺などの標的臓器における１１β−ＨＳＤ１によるリサイクリング（不活性型から活性型への変換）機構が存在する（非特許文献４）。１１β−ＨＳＤ１阻害剤はこれらの組織での糖質コルチコイドの作用を抑えることで、高血糖、肥満、高脂血症、及び／又は高血圧を抑制し、メタボリックシンドロームに対して多面的な効果を発揮することが期待される。脂肪組織特異的１１β−ＨＳＤ１高発現マウスにおいて、内臓脂肪型肥満、耐糖能の悪化、インスリン抵抗性および血圧の上昇が報告され、これらの可能性を支持している（非特許文献５または非特許文献６参照。）。このような物質としてアミノチアゾ−ルスルホンアミド誘導体（人居文献７）、トリアゾール誘導体（ＷＯ０３／０６５９８３）が知られているが、実用化には至っていない。
【非特許文献１】「ネイチャー（Nature）」、２００１年、第４１４巻、ｐ７８２−７８７
【非特許文献２】「ザ・アメリカン・ジャーナル・オブ・メディスン（The American Journal of Medicine）」、２０００年、第１０８巻、ｐ２３８−２４５
【非特許文献３】「ザ・ジャーナル・オブ・クリニカル・エンドクライノロジー・アンド・メタボリズム（The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism）」、２００４年、第８９巻、ｐ．２６０１−２６０７
【非特許文献４】「エンドクライノロジー（Endocrinology）」、２００１年、第１４２巻、ｐ．１３７１−１３７６
【非特許文献５】「サイエンス（Science）」、２００１年、第２９４巻、ｐ．２１６６−２１７０
【非特許文献６】「ザ・ジャーナル・ジャーナル・オブ・クリニカル・インベスティゲーション（The Journal of Clinical Investigation）」、２００３年、第１１２巻、ｐ．８３−９０
【非特許文献７】「ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（Journal of medicinal chemistry）」、２００２年、第４５巻、ｐ．３８１３−３８１５
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、糖尿病、肥満、高脂血症、高血圧症及びこれらの病態を複合的に発症したメタボリックシンドロームからなる群から選択される少なくとも一つの疾患の、治療及び／又は予防薬として有効な１１β−ｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ ｔｙｐｅ１（以下、「１１β-ＨＳＤ１」ともいう。）阻害作用を有し、またそれらの作用を増強せしめる目的で導かれる関連誘導体の合成原料として利用可能な新規化合物、該化合物を有効成分として含有する医薬、該化合物の製造方法、および該化合物を生産する新規微生物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は；
【００１０】
（１） 下記、一般式 (Ｉ)：
【化１】
【００１１】
［式中、Ｒは
−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ
−ＣＨ（ＣＯ２Ｈ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈ
−Ｈ、または、
−ＣＨ２ＣＯＯＨ］で表わされる化合物またはその塩、
（２） 下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩。
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２３Ｈ２５ＮＯ７
４）分子量：４２７（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｎａ]＋は次に示す通りである。
実測値：４５０．１５２６
計算値：４５０．１５２９
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１２ｎｍ（ε５８６００）, ２６５ｎｍ（ε２４４００）, ２９７ｎｍ（ε１０９００）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３３５７，３２３１，２９７３，２９３１，１６６２，１６２３，１６０２，１４５６，１３７６，１３１１，１２５５，１１９９，１１６４，１０８４，１０６４，１０３５，９９０ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５０（３Ｈ，ｓ），１．５６（３Ｈ，ｓ），２．６０（３Ｈ，ｓ），３．３７（２Ｈ，ｍ），３．７５（２Ｈ，ｔ，J＝５．１Ｈｚ），３．８３（２Ｈ，ｔ，J＝５．１Ｈｚ），４．５８（２Ｈ，ｓ），５．０３（１Ｈ，ｍ），６．２３（１Ｈ，ｂｒ, s），６．３１（１Ｈ，ｂｒ, s），７．０８（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．７（ｔ），２５．９（ｑ），４６．５（ｔ），５０．９（ｔ），６１．３（ｔ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．１(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．１（ｓ），１２７．２（ｓ），１３２．７（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．３（ｓ），１５２．２（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７０．７（ｓ），１７１．８（ｓ）ｐｐｍ、
（３） 下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩。
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２６Ｈ２７ＮＯ１０
４）分子量：５１３（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｈ]＋は次に示す通りである。
実測値：５１４．１６９７
計算値：５１４．１７１３
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１４ｎｍ（ε５８１００）, ２６５ｎｍ（ε２６５００）, ２９６ｎｍ（ε１１１００）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３３４８，３２６４，２９７３，２９２８，２８５８，１７１８，１６６２，１６２４，１６０３，１４５０，１４１３，１３７７，１３１０，１２５４，１１９８，１１６２，１０８７，１０６３，１０３５，９９１ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５２（３Ｈ，ｓ），１．５７（３Ｈ，ｓ），２．２５（１Ｈ，ｍ），２．４０（２Ｈ，ｍ），２．４９（１Ｈ，ｍ），２．６０（３Ｈ，ｓ），３．３９（２Ｈ，ｍ），４．４６（１Ｈ，ｄ，J＝１６．９Ｈｚ），４．５８（１Ｈ，ｄ，J＝１６．９Ｈｚ），４．９９（１Ｈ，ｍ），５．０４（１Ｈ，ｍ），６．２４（１Ｈ，ｂｒ, s），６．３１（１Ｈ，ｂｒ, s），７．０９（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．８（ｔ），２５．９（ｑ），２６．３（ｔ），３１．９（ｔ），４６．９（ｔ），５５．５（ｄ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．４(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．３（ｓ），１２７．５（ｓ），１３２．０（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．４（ｓ），１５２．４（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７１．３（ｓ），１７１．８（ｓ），１７３．９（ｓ），１７６．３（ｓ）ｐｐｍ、
（４） 下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩。
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２１Ｈ２１ＮＯ６
４）分子量：３８３（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｎａ]＋は次に示す通りである。
実測値：４０６．１２７３
計算値：４０６．１２６７
６）紫外部吸収スペクトル
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１３ｎｍ（ε６６７００）, ２６８ｎｍ（ε２３０００）, ２９７ｎｍ（ε１２０００）
７）赤外吸収スペクトル
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３４０９，３２６７，２９７４，２９３１，１６６９，１６５３，１６２３，１５９９，１５０４，１４４６，１４１３，１３７４，１３４９，１３１３，１２５５，１１９３，１１７３，１１６１，１１００，１０６３，１０３８，９９８，９８９ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５０（３Ｈ，ｓ），１．５７（３Ｈ，ｓ），２．６０（３Ｈ，ｓ），３．３８（２Ｈ，ｍ），４．４０（２Ｈ，ｓ），５．０３（１Ｈ，ｍ），６．２２（１Ｈ，ｂｒ，ｓ），６．３０（１Ｈ，ｂｒ，ｓ），７．０８（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．７（ｔ），２５．９（ｑ），４５．０（ｔ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．２(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．３（ｓ），１２９．３（ｓ），１３２．５（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．４（ｓ），１５２．６（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７１．８（ｓ），１７３．４（ｓ）ｐｐｍ、
（５） 下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２３Ｈ２３ＮＯ８
４）分子量：４４１（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｈ]＋は次に示す通りである。
実測値：４４２．１４９５
計算値：４４２．１５０２
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１３ｎｍ（ε９６２００）, ２６５ｎｍ（ε４１３００）, ２９７ｎｍ（ε１７５００）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３３６６，３２４５，２９７３，２９２９，２７３３，１６６２，１６２４，１６０１，１４５８，１４４８，１４０１，１３７７，１３１１，１２５４，１２０１，１１６５，１１０３，１０８１，１０３５，９９５，９４６ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５０（３Ｈ，ｓ），１．５７（３Ｈ，ｓ），２．６１（３Ｈ，ｓ），３．３９（２Ｈ，ｍ），４．３８（２Ｈ，ｓ），４．５４（２Ｈ，ｓ），５．０４（１Ｈ，ｍ），６．２３（１Ｈ，ｂｒ，ｓ），６．３０（１Ｈ，ｂｒ，ｓ），７．０８（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．８（ｔ），２５．９（ｑ），４５．１（ｔ），５０．３（ｔ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．４(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．３（ｓ），１２７．５（ｓ），１３２．１（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．４（ｓ），１５２．４（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７０．８（ｓ），１７１．８（ｓ），１７２．８ｐｐｍ、
（６） ステレウム（Ｓｔｅｒｅｕｍ）属に属する、（１）乃至（５）のいずれか１項に記載の化合物の生産菌を培養し、その培養物より（１）乃至（５）のいずれか１項に記載の化合物を採取することを特徴とする、（１）乃至（５）のいずれか１項に記載の化合物の製造方法、
（７） ステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１２０５株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６５）または、ステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１１０５株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６４）を培養し、その培養物より（１）乃至（５）のいずれか１項に記載の化合物を採取することを特徴とする、（１）乃至（５）のいずれか１項に記載の化合物の製造方法、
（８） ステレウム（Ｓｔｅｒｅｕｍ）属に属し、（１）乃至（５）のいずれか１項に記載の化合物を生産することを特徴とする微生物、
（９） ステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１２０５株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６５）、
（１０）ステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１１０５株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６４）、
（１１） （１）乃至（５）のいずれか１項に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬組成物、
（１２） 糖尿病、肥満、高脂血症、高血圧及びメタボリックシンドロームからなる群から選択される少なくとも一つの疾患の治療及び／又は予防薬である（１１）に記載の医薬組成物、
（１３） （１）乃至（５）のいずれか１項に記載の化合物もしくはその塩を含有してなる１１β−ｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ ｔｙｐｅ１（１１β−ＨＳＤ１）阻害剤、
に関する。
【００１２】
また、本発明は、以下に記載の化合物に関する。
（ｉ）下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩。
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２３Ｈ２５ＮＯ７
４）分子量：４２７（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｎａ]＋は次に示す通りである。
実測値：４５０．１５２６
計算値：４５０．１５２９
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１２ｎｍ（ε５８６１０）, ２６５ｎｍ（ε２４３８５）, ２９７ｎｍ（ε１０９０９）,
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３３５７，３２３１，２９７３，２９３１，１６６２，１６２３，１６０２，１４５６，１３７６，１３１１，１２５５，１１９９，１１６４，１０８４．１０６４，１０３５，９９０ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５０（３Ｈ，ｓ），１．５６（３Ｈ，ｓ），２．６０（３Ｈ，ｓ），３．３７（２Ｈ，ｍ），３．７５（２Ｈ，ｔ，J＝５．１Ｈｚ），３．８３（２Ｈ，ｔ，J＝５．１Ｈｚ），４．５８（２Ｈ，ｓ），５．０３（１Ｈ，ｍ），６．２３（１Ｈ，ｓ, ｂｒ），６．３１（１Ｈ，ｓ, ｂｒ），７．０８（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．７（ｔ），２５．９（ｑ），４６．５（ｔ），５０．９（ｔ），６１．３（ｔ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．１(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．１（ｓ），１２７．２（ｓ），１３２．７（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．３（ｓ），１５２．２（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７０．７（ｓ），１７１．８（ｓ）ｐｐｍ
（ｉｉ）下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩。
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２６Ｈ２７ＮＯ１０
４）分子量：５１３（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｈ]＋は次に示す通りである。
実測値：５１４．１６９７
計算値：５１４．１７１３
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１４ｎｍ（ε５８１３３）, ２６５ｎｍ（ε２６５０６）, ２９６ｎｍ（ε１１１４５）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３３４８，３２６４，２９７３，２９２８，２８５８，１７１８，１６６２，１６２４，１６０３，１４５０，１４１３，１３７７，１３１０，１２５４，１１９８，１１６２，１０８７，１０６３，１０３５，９９１ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５２（３Ｈ，ｓ），１．５７（３Ｈ，ｓ），２．２５（１Ｈ，ｍ），２．４０（２Ｈ，ｍ），２．４９（１Ｈ，ｍ），２．６０（３Ｈ，ｓ），３．３９（２Ｈ，ｍ），４．４６（１Ｈ，ｄ，J＝１６．９Ｈｚ），４．５８（１Ｈ，ｄ，J＝１６．９Ｈｚ），４．９９（１Ｈ，ｍ），５．０４（１Ｈ，ｍ），６．２４（１Ｈ，ｓ, ｂｒ），６．３１（１Ｈ，ｓ, ｂｒ），７．０９（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．８（ｔ），２５．９（ｑ），２６．３（ｔ），３１．９（ｔ），４６．９（ｔ），５５．５（ｄ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．４(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．３（ｓ），１２７．５（ｓ），１３２．０（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．４（ｓ），１５２．４（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７１．３（ｓ），１７１．８（ｓ），１７３．９（ｓ），１７６．３（ｓ）ｐｐｍ
（ｉｉｉ）下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩；
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２１Ｈ２１ＮＯ６
４）分子量：３８３（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｎａ]＋は次に示す通りである。
実測値：４０６．１２７３
計算値：４０６．１２６７
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１３ｎｍ（ε６６７４６）, ２６８ｎｍ（ε２２９６７）, ２９７ｎｍ（ε１１９６２）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３４０９，３２６７，２９７４，２９３１，１６６９，１６５３，１６２３，１５９９，１５０４，１４４６，１４１３，１３７４，１３４９，１３１３，１２５５，１１９３，１１７３，１１６１，１１００，１０６３，１０３８，９９８，９８９ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５０（３Ｈ，ｓ），１．５７（３Ｈ，ｓ），２．６０（３Ｈ，ｓ），３．３８（２Ｈ，ｍ），４．４０（２Ｈ，ｓ），５．０３（１Ｈ，ｍ），６．２２（１Ｈ，ｓ, ｂｒ），６．３０（１Ｈ，ｓ, ｂｒ），７．０８（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．７（ｔ），２５．９（ｑ），４５．０（ｔ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．２(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．３（ｓ），１２９．３（ｓ），１３２．５（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．４（ｓ），１５２．６（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７１．８（ｓ），１７３．４（ｓ）ｐｐｍ
（ｉｖ） 下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩。
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２３Ｈ２３ＮＯ８
４）分子量：４４１（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｈ]＋は次に示す通りである。
実測値：４４２．１４９５
計算値：４４２．１５０２
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１３ｎｍ（ε９６１６７）, ２６５ｎｍ（ε４１２５０）, ２９７ｎｍ（ε１７５００）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３３６６，３２４５，２９７３，２９２９，２７３３，１６６２，１６２４，１６０１，１４５８，１４４８，１４０１，１３７７，１３１１，１２５４，１２０１，１１６５，１１０３，１０８１，１０３５，９９５，９４６ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５０（３Ｈ，ｓ），１．５７（３Ｈ，ｓ），２．６１（３Ｈ，ｓ），３．３９（２Ｈ，ｍ），４．３８（２Ｈ，ｓ），４．５４（２Ｈ，ｓ），５．０４（１Ｈ，ｍ），６．２３（１Ｈ，ｓ, ｂｒ），６．３０（１Ｈ，ｓ, ｂｒ），７．０８（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．８（ｔ），２５．９（ｑ），４５．１（ｔ），５０．３（ｔ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．４(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．３（ｓ），１２７．５（ｓ），１３２．１（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．４（ｓ），１５２．４（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７０．８（ｓ），１７１．８（ｓ），１７２．８ｐｐｍ。
【発明の効果】
【００１３】
本発明により、１１β−ＨＳＤ１阻害活性を有する化合物である、ステレニンＡ、ステレニンＢ、ステレニンＣ及びステレニンＤが提供された。さらに、本発明により、該化合物を製造する微生物、及び該微生物を用いた該化合物の製造方法が提供された。本発明の化合物は、糖尿病、肥満、高脂血、高血圧及びこれらの病態を複合的に発症したメタボリックシンドロームからなる群から選択される少なくとも一つの疾患の治療及び／又は予防に有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
１．ステレニンＡ、ステレニンＢ、ステレニンＣ及びステレニンＤ
本明細書中において、ステレニンＡ（Ｓｔｅｒｅｎｉｎ Ａ）とは、以下の一般式(Ｉ)：
【００１５】
【化２】
【００１６】
においてＲが−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨである化合物または上記（ｉ）に記載の物理化学的性状を有する化合物を示す。同様に、ステレニンＢ（Ｓｔｅｒｅｎｉｎ Ｂ）とは、ＲがＣＨ（ＣＯ２Ｈ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈである化合物または上記（ｉｉ）に記載の物理化学的性状を有する化合物を示し、ステレニンＣ（Ｓｔｅｒｅｎｉｎ Ｃ）とは、Ｒが−Ｈである化合物または上記（ｉｉｉ）に記載の物理化学的性状を有する化合物を示し、ステレニンＤ（Ｓｔｅｒｅｎｉｎ Ｄ）とは、Ｒが−ＣＨ２ＣＯＯＨである化合物または上記（ｉｖ）に記載の物理化学的性状を有する化合物を示す。
【００１７】
本発明の化合物は、より優れた血糖値低下作用、肥満改善作用、血中脂質低下作用、血圧低下作用からなる群から選択される少なくとも一つの作用、及び／またはメタボリックシンドローム改善作用を有する誘導体を合成する際の出発原料とすることも可能である。
【００１８】
本発明の化合物は、塩基を用いて当業者に周知の方法により塩にすることができる。本発明はこれらの塩も包含する。本発明の化合物の塩を医薬として使用する場合、医学的に使用され、薬理学的に許容されるものであれば特に限定はなく、また、医薬以外の用途に用いる場合、例えば中間体として用いる場合には、該用途に用いることのできるものであれば特に限定されない。
【００１９】
そのような塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、のようなアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩、のようなアルカリ土類金属塩；アルミニウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、ニッケル塩、コバルト塩等の金属塩；アンモニウム塩のような無機塩；ｔ−オクチルアミン塩、ジベンジルアミン塩、モルホリン塩、グルコサミン塩、フェニルグリシンアルキルエステル塩、エチレンジアミン塩、Ｎ−メチルグルカミン塩、グアニジン塩、ジエチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン塩、クロロプロカイン塩、プロカイン塩、ジエタノールアミン塩、Ｎ−ベンジル−フェネチルアミン塩、ピペラジン塩、テトラメチルアンモニア塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩のような有機アミン塩；グリシン塩、リジン塩、アルギニン塩、オルニチン塩、アスパラギン塩のようなアミノ酸塩、好適には、薬理学的に許容される塩であり、より好適には、ナトリウム塩、カリウム塩、アンモニウム塩である。
【００２０】
また、本発明の化合物およびその塩は、大気中に放置したり、水又は有機溶媒と混和することによって水又は溶媒と結合し、水和物又は溶媒和物を形成する場合があるが、これらの水和物及び溶媒和物も本発明に含まれる。
【００２１】
更に、ステレニンＢは不斉炭素原子を有するため、２つの光学異性体が存在する。一般式（Ｉ）において、これらの異性体は単一の式で示されているが、本発明はラセミ化合物を含むこれらの異性体、およびこれらの異性体の混合物をもすべて含む。これらの異性体は、立体特異的合成法により、若しくは光学活性化合物を原料化合物とした合成により、製造することができる。
【００２２】
２．ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤの製造方法に用いられる微生物
ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤの製造方法において用いられる、ステレウム（キウロコタケ）（Ｓｔｅｒｅｕｍ）属に属する菌株としては、例えばステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１２０５株（以下、「ＳＡＮＫ２１２０５株」とする。）、またはステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１１０５株（以下、「ＳＡＮＫ２１１０５株」とする）を挙げることができる。ＳＡＮＫ２１２０５株は、群馬県で採集した担子菌子実体の担子胞子より分離された。また、ＳＡＮＫ２１１０５株は、静岡県で採集した担子菌子実体の担子胞子より分離された。
【００２３】
本菌の菌学的性状を観察するため、次の各培地上で培養を行った。使用した各培地の組成を以下に記載する。
＜ＰＤＡ培地（ポテトデキストロース寒天（Ｐｏｔａｔｏ Ｄｅｘｔｒｏｓｅ Ａｇａｒ）培地）＞
ポテトデキストロース寒天培地「ニッスイ」（日水製薬（株）製） ３９ｇ
寒天 ５ｇ
蒸留水 １０００ｍｌ
＜ＭＥＡ培地（マルトエキス寒天培地）＞
マルトエキス １２．５ｇ
寒天 ２０ｇ
蒸留水 １０００ｍｌ
色調の表示は「メチューン・ハンドブック・オブ・カラー」 （Ｋｏｒｎｅｒｕｐ Ａ． ＆ Ｗａｎｓｃｈｅｒ Ｊ． Ｈ． （１９７８） Ｍｅｔｈｕｅｎ ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ ｃｏｌｏｕｒ（３ｒｄ． ｅｄｉｔｉｏｎ）． Ｅｒｙｅ Ｍｅｔｈｕｅｎ， Ｌｏｎｄｏｎ）に従った。
ＳＡＮＫ２１２０５株の培養下での菌学的性状は次の通りである。
【００２４】
ＰＤＡ培地上での成長は、２３℃、１週間の培養で４１乃至４９ｍｍである。菌そうは綿毛状、中心部でイエロイッシュホワイト（４A２）を呈する。裏面は中心部でペールイエロー（４A３）を呈する。気菌糸は幅１．５乃至８μｍ、薄壁、平滑である。かすがい連結は隔壁あたり０乃至４個形成される。分生子は形成されない。菌そう中心部で不溶性の細かい油滴を付着した菌糸が観察される。ＭＥＡ培地上での成長は、２３℃、１週間の培養で３４乃至４０ｍｍである。菌そうは薄く、白色である。裏面は変化なし。
【００２５】
ＳＡＮＫ２１１０５株の培養下での菌学的性状は次の通りである。
【００２６】
ＰＤＡ培地上での成長は、２３℃、１週間の培養で５０乃至５６ｍｍである。菌そうは綿毛状、中心部でパステルイエロー（３Ａ４）乃至ライトイエロー（４Ａ４）を呈する。裏面は中心部でペールイエロー（４A３）を呈する。気菌糸は幅１．５乃至８μｍ、薄壁、平滑である。かすがい連結は隔壁あたり０乃至３個形成される。菌そう中心部で不溶性の細かい油滴を付着した菌糸が観察される。ＭＥＡ培地上での成長は、２３℃、１週間の培養で３７乃至４２ｍｍである。菌そうは薄く、白色である。裏面は変化なし。
【００２７】
ＳＡＮＫ２１２０５株及びＳＡＮＫ２１１０５株を同定するため、分離に供試した子実体乾燥標本の菌学的性状を観察した。その乾燥標本の菌学的性状は次の通りである。
【００２８】
子実体は背着生乃至半背着生である。傘は幅５mm以下、厚さ０．４mm以下、貝殻形乃至扇形、横に連なり、堅い。表面は粗長毛状、灰白色を呈する。傘の縁は薄く、鋭角である。子実層面は平滑乃至ややこぶ状、淡橙色である。下皮が毛被と肉の間に存在する。下皮は厚さ２５μｍ以下、褐色を呈する。
【００２９】
担子胞子は８乃至１２×３乃至４μｍ、円筒形でやや湾曲することもあり、薄壁、平滑、アミロイドである。担子器は４０乃至５０×５乃至６μｍ、狭棍棒形、4胞子性。小柄は長さ４μｍ。偽シスチジアは幅４．５乃至６μｍ、円筒形、基部で厚壁（２μｍ以下）、先端で薄壁、先端に小さい突起を有することがある。菌糸は1菌糸型、幅２乃至６μｍ、薄壁乃至厚壁、隔壁にかすがい連結は観察されない。アカントハイフィディアや偽アカントハイフィディアは観察されない。
【００３０】
以上のような菌学的性状は、チャムリス（１９８８年）「ノンスティピテイト ステレオイド ファンジャイ イン ザ ノースイースタン ユナイテッド ステーツ アンド アジャセント カナダ」Ｊ クリマー、ベルリン（Ｃｈａｍｕｒｉｓ Ｇ． Ｐ． （１９８８） Ｔｈｅ ｎｏｎ−ｓｔｉｐｉｔａｔｅ ｓｔｅｒｅｏｉｄ ｆｕｎｇｉ ｉｎ ｔｈｅ ｎｏｒｔｈｅａｓｔｅｒｎ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ａｎｄ ａｄｊａｃｅｎｔ Ｃａｎａｄａ． Ｊ． Ｃｒａｍｅｒ， Ｂｅｒｌｉｎ）のステレウム（キウロコタケ）（Ｓｔｅｒｅｕｍ）属の記載に一致した。ＳＡＮＫ２１２０５株及びＳＡＮＫ２１１０５株は同種であり、ＳＡＮＫ２１２０５株及びＳＡＮＫ２１１０５株を、ステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）と同定した。
なお、ＳＡＮＫ２１２０５株はステレウム エスピー ＳＡＮＫ２１２０５株として、ＳＡＮＫ２１１０５株は、ステレウム エスピー ＳＡＮＫ２１１０５株として、平成１７年１２月６日付けで日本国茨城県つくば市東１−１−１の独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに国際寄託され、それぞれ受託番号ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６５及びＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６４を付与された。
【００３１】
周知の通り、真菌類は自然界において、又は人工的な操作（例えば、紫外線照射、放射線照射、化学薬品処理等）により、変異を起こしやすく、本発明のＳＡＮＫ２１２０５株及びＳＡＮＫ２１１０５株もその点は同じである。本発明にいうＳＡＮＫ２１２０５株及びＳＡＮＫ２１１０５株はその全ての変異株を包含する。
【００３２】
また、これらの変異株の中には、遺伝的方法、たとえば組み換え、形質導入、形質転換等によりえられたものも包含される。即ち、ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤを生産するＳＡＮＫ２１２０５株及びＳＡＮＫ２１１０５株、それらの変異株およびそれらと明確に区別されない菌株は全てＳＡＮＫ２１２０５株及びＳＡＮＫ２１１０５株に包含される。
【００３３】
３．ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤを生産する微生物の培養方法及びステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤの精製方法
（１）培養方法
本発明のステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤを得るための、これらの微生物の培養は一般に他の発酵生成物を生産するために用いられる培地と同様の培地を用いて行なわれる。このような培地は、微生物が資化出来る炭素源、窒素源および無機塩を含有する。
【００３４】
炭素源としては、例えば、グルコース、フラクトース、マルトース、シュークロース、マンニトール、グリセリン、デキストリン、オート麦、ライ麦、大麦、玄米、トウモロコシデンプン、ジャガイモ、トウモロコシ粉、大豆油、綿実油、糖蜜、クエン酸、酒石酸等をあげることができる。これらの炭素源は単独または組み合わせて用いることができる。
培地に加える炭素源の量は、培地中の他の成分により異なるが、通常、培地量の１乃至１０重量％である。
【００３５】
窒素源としては、例えば、大豆粉、フスマ、落花しょう粉、綿実紛、カゼイン加水分解物、ファーマミン、コーンスチープリカー、ペプトン、肉エキス、イースト、イーストエキス、マルトエキス、硝酸ナトリウム、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム、Ｌ−グルタミン酸ナトリウム等をあげることができる。これらの炭素源は単独または組み合わせて用いることができる。
【００３６】
培地に加える窒素源の量は、培地中の他の成分により異なるが、通常、０．２乃至６重量％である。
【００３７】
炭素源および窒素源は、一般に組み合わせて用いるが、純粋な形態である必要はなく、微量の生育因子、ビタミンおよび無機栄養を含むより純度の低いものを用いてもよい。
【００３８】
無機塩としては、例えば、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、アンモニウム、カルシウム、リン酸、硫酸、塩酸、炭酸等のイオンを生じる塩類をあげることができる。
【００３９】
また、菌の資化しうるビタミンＢ１、ビオチンのようなビタミン類、チアミンのような菌体増殖促進物質等も必要に応じて添加してもよい。
【００４０】
更に、マンガン、モリブデン、その他の金属塩を必要に応じて添加してもよい。
【００４１】
栄養培地が泡立つ場合などは必要に応じて、シリコンオイル、ポリアルキレングリコールエーテル、植物油、動物油、界面活性剤のような消泡剤を培地に添加してもよい。特に、液体培養に際しては、これらの消泡剤を添加することが好適である。
【００４２】
培地のｐＨは、培地の成分、生育温度等により異なるが、通常発酵生成物を生産するために用いられるｐＨであればよい。
【００４３】
菌の生育温度は、培地の成分、ｐＨ等により異なるが、通常、１５℃乃至３０℃であり、２０乃至２８℃の範囲が生育に良好である。ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤの生産には、２０乃至２６℃が好適である。
【００４４】
培養方法としては、特に制限はなく、微生物一般に用いられる培養法であればよく、固形培地を用いた培養法、攪拌培養法、振とう培養法、通気培養法等を使用することができ、好適には、固形培地を用いた培養である。
【００４５】
培養においては、好適には２０乃至２６℃、更に好適には２３℃で１０日以上固体培養を行なう。培養は三角フラスコ中で、１または２段階の種の発育工程により開始させる。種の発育段階の培地には、炭素源、窒素源、微量の生育因子、無機塩類および微量金属類を併用できる。種培養用三角フラスコはロータリー振とう培養機中で２０乃至２６℃（好適には２３℃）、５乃至１０日間（好適には７日間）振とうするか、又は充分に生育するまで振とうする。生育した種培養液は、第二の種培養培地又は生産培養培地に接種するために用いられる。中間の発育工程を用いる場合には、本質的に第一の種培養と同様の方法で生育させ、その種培養液を三角フラスコなどの固体培地培養容器中の生産培養培地に接種する。接種した固体培地培養容器を一定温度で静置して、生産培養を行なう。
【００４６】
（２）ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤの精製方法
培養終了後、固体培養の場合、固体培養物中に存在するステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤは、５０乃至９０％の含水アセトンまたは含水メタノールにより抽出し、濃縮操作により有機溶剤を除去した後、酸性条件下で、水と混和しない有機溶剤、例えば、酢酸エチル、クロロホルム、塩化エチレン、塩化メチレン、ブタノール等の単独または、それらの組み合わせにより抽出精製することができる。または、吸着剤として、例えば、活性炭または吸着用樹脂であるアンバーライトＸＡＤ−２、ＸＡＤ−４（ローム・アンド・ハース（株）製）等や、ダイアイオンＨＰ−１０、ＨＰ−２０、ＣＨＰ２０Ｐ、ＨＰ−５０、セパビーズＳＰ−２０７（三菱化学（株）製）等を使用して抽出精製することもできる。吸着剤を使用して抽出精製する場合、目的化合物を含む液を、吸着剤の層を通過させ、不純物を吸着剤に吸着させることにより取り除くか、または、目的化合物を吸着させて不純物を洗い流した後、メタノール水、アセトン水、ブタノ−ル水等を用いて目的化合物を溶出させることにより、目的化合物を抽出精製することができる。
【００４７】
液体培養の場合、培養液中の液体部分および菌体内、またはその双方に存在するステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤは、培養終了液の全て、あるいは菌体、その他の固形部分を、珪藻土をろ過助剤とするろ過操作または遠心分離によって分別し、得られたろ液または上清および菌体中から、11β−ＨＳＤ１阻害活性または高速液体クロマトグラフィーを指標にして、その物理化学的性状を利用し抽出精製することができる。
【００４８】
ろ液または上清中に存在するステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤは、水と混和しない有機溶剤、例えば、酢酸エチル、クロロホルム、塩化エチレン、塩化メチレン、ブタノール等の単独または、それらの組み合わせにより抽出することができる。これらの抽出液は、固体培養と同様な抽出精製操作を行うことにより目的の化合物を抽出精製することができる。
【００４９】
菌体内に存在するステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤは、５０乃至９０％の含水アセトンまたは含水メタノールにより抽出し、濃縮操作により有機溶剤を除去した後、上記と同様に抽出精製操作を行うことにより得ることができる。例えば、培養終了後に適当量（好ましくは終濃度５０％）の、アセトンまたはメタノールを添加することにより目的の化合物を抽出することができる。抽出終了後、珪藻土をろ過助剤とするろ過操作を行ない、得られた抽出液を固体培養と同様な抽出精製操作を行うことにより目的の化合物を抽出精製することができる。
【００５０】
上記の方法により抽出精製されたステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤを含む溶液は、シリカゲル、セファデックスＬＨ−２０（アマシャムバイオサイエンス（株）製）、フロリジル、コスモシル（ナカライテスク（株）製）のような担体を用いた分配カラムクロマトグラフィー；ダイヤイオンＨＰ−２０、ＣＨＰ２０Ｐ（三菱化学（株）製）のような担体を用いた吸着カラムクロマトグラフィー；セファデックスＧ−１０（アマシャムバイオサイエンス（株）製）、トヨパールＨＷ４０Ｆ（トーソー（株）製）などを用いたゲルろ過クロマトグラフィー；ダウエックス１（ダウケミカル（株）製）、ダイヤイオンＰＡ３１６（三菱化学（株）製）、ＤＥＡＥセファデックスＡ−２５（アマシャムバイオサイエンス（株）製）などを用いたイオン交換クロマトグラフィー；および順相、逆相カラムを用いた高速液体クロマトグラフィー等により更に精製することができる。
【００５１】
以上の分離、精製の手段を単独または適宜組み合わせ、場合によっては反復して用いることにより、本発明のステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤを分離精製することができる。
【００５２】
以上、ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤの製造法の代表的な方法を説明したが、製造方法はこれらに限定されず、既に当業者に知られているこれら以外の製造方法を用いることもできる。
【００５３】
４．ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤからなる群から選択される少なくとも１つの化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする医薬
本発明のステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤからなる群から選択される少なくとも１つの化合物またはその薬理学的に許容される塩は、種々の形態で投与することができる。その投与形態としては、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、乳剤、丸剤、散剤、シロップ剤（液剤）等による経口投与、または注射剤（静脈内、筋肉内、皮下または腹腔内投与）、点滴剤、坐剤（直腸投与）等による非経口投与を挙げることができる。これらの各種製剤は、常法に従って主薬に賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、矯味矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤等の医薬の製剤技術分野において通常使用し得る補助剤を用いて製剤化することができる。
【００５４】
錠剤として使用する場合、担体として、例えば、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、グルコース、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸等の賦形剤；水、エタノール、プロパノール、単シロップ、グルコース液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、リン酸カリウム、ポリビニルピロリドン等の結合剤；乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、寒天末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプン、乳糖等の崩壊剤；白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油等の崩壊抑制剤；第４級アンモニウム塩類、ラウリル硫酸ナトリウム等の吸収促進剤；グリセリン、デンプン等の保湿剤；デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸等の吸着剤；精製タルク、ステアリン酸塩、硼酸末、ポリエチレングリコール等の潤沢剤等を使用することができる。また、必要に応じ通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠あるいは二重錠、多層錠とすることができる。
【００５５】
丸剤として使用する場合、担体として、例えば、グルコース、乳糖、カカオバター、デンプン、硬化植物油、カオリン、タルク等の賦形剤；アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノール等の結合剤；ラミナラン寒天等の崩壊剤等を使用することができる。
【００５６】
坐剤として使用する場合、担体としてこの分野で従来公知のものを広く使用でき、例えばポリエチレングリコール、カカオバター、高級アルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセリド等を挙げることができる。
【００５７】
注射剤として使用する場合、液剤、乳剤または懸濁剤として使用することができる。これらの液剤、乳剤または懸濁剤は、殺菌され、血液と等張であることが好ましい。これら液剤、乳剤または懸濁剤の製造に用いる溶液は、医療用の希釈剤として使用できるものであれば特に限定はなく、例えば、水、エタノール、プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等を挙げることができる。なお、この場合、等張性の溶液を調製するのに充分な量の食塩、グルコースまたはグリセリンを製剤中に含んでいてもよく、また通常の溶解補助剤、緩衝剤、無痛化剤等を含んでいてもよい。
【００５８】
また、上記の製剤には、必要に応じて、着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤等を含めることもでき、更に、他の医薬品を含めることもできる。
【００５９】
上記製剤に含まれる有効成分化合物の量は、特に限定されず広範囲に適宜選択されるが、通常、全組成物中１乃至７０重量％、好ましくは１乃至３０重量％含む。
【００６０】
使用量としては、症状、年齢、体重、投与方法および剤形等によって異なるが、通常は成人に対して１日あたり、上限として２０００ｍｇ（好ましくは１００ｍｇ）であり、下限として０．１ｍｇ（好ましくは１ｍｇ、さらに好ましくは１０ｍｇ）を症状に応じて、一日１回または数回に分けて投与することができる。
【実施例】
【００６１】
次に、実施例をあげて本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
（実施例１）ＳＡＮＫ２１２０５株の培養
ＳＡＮＫ２１２０５株のスラントより約１ｃｍ角の菌糸片を切り取り、あらかじめ滅菌水約３ｍｌで満たしたガラスポッターに懸濁した。ガラスポッターを用いて菌糸片をホモジナイズし、全量を滅菌（１２１℃、２０分間）した後述の組成からなる種培養培地(表１)３０ｍｌを含む１００ｍｌ容三角フラスコに接種した。同様の操作を行い、１５本の種培養フラスコを用意した。２３℃で２１０ｒｐｍのロータリー振とう培養機中で７日間培養した。このようにして得られた種培養液を、滅菌（１２１℃、４０分間）した後述の生産培養培地(表２)の培地組成を含む５００ｍｌ容固体培地培養容器（アグリフレックス、藤森工業（株）社製）１５本にそれぞれ３０ｍｌ接種し、２３℃で静置して１４日間培養した。
【００６２】
(表１)種培養培地の培地組成
―――――――――――――――――――――――――――――――――――――
グルコース ４ｇ
マルトエキス（Ｄｉｆｃｏ） １０ｇ
イーストエキス（Ｄｉｆｃｏ） ４ｇ
寒天 ３ｇ
消泡剤＊ ０．０５ｍｌ
蒸留水 １０００ｍｌ
―――――――――――――――――――――――――――――――――――――
＊ニッサン・ディスフォームＣＢ−４４２（登録商標、日本油脂（株）社製）
【００６３】
(表２)生産培養培地の培地組成（５００ｍｌ容固体培地培養容器1本あたり）
―――――――――――――――――――――――――――――――――――――
玄米 ９０ｇ
ＮａＮＯ３ ０．０５ｇ
ＫＨ２ＰＯ４ ０．０５ｇ
ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ０．０５ｇ
蒸留水 １００ｍｌ
―――――――――――――――――――――――――――――――――――――
（実施例２）ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤの単離・精製
以下の精製においては、活性画分を以下の条件でＨＰＬＣを用い、モニターした。
【００６４】
カラム：カプセルパック（ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ）Ｃ１８ＵＧ１２０：
４．６φ×１５０ｍｍ (資生堂（株）製)
溶媒：０．０５％ギ酸を含有する３５％アセトニトリル水
流速：１．０ｍｌ／分
検出：紫外部吸収２１０ｎｍ
保持時間：８．４９分（ステレニンＡ）
９．６０分（ステレニンＢ）
９．６５分（ステレニンＣ）
１０．７１分（ステレニンＤ）
実施例１で得られた培養終了物（３Ｌ）にアセトン（３Ｌ）を添加し、攪拌しながら３０分間放置した後、抽出液にセライト５４５（１５０ｇ）を加え、ろ過した。得られたろ液を６Ｎ ＨＣｌでｐＨ３に調整し、酢酸エチル（２Ｌ）を加えて抽出を行った。得られた水層に再度酢酸エチル（１．５Ｌ）を加えて抽出し、２度の抽出操作で得られた有機層を合併した。この有機層（３．５Ｌ）を飽和食塩水（２Ｌ）で洗浄後、無水硫酸ナトリウム（４００ｇ）を加えて１時間脱水した。ろ過により無水硫酸ナトリウムを除去した後、ろ液を減圧濃縮乾固し、油状物質（１３ｇ）が得られた。この油状物質を、メタノール（５０ｍｌ）に溶解した後、コスモシル１４０Ｃ１８（６０ｇ：ナカライテスク（株）製）に攪拌しながら添加し、メタノールを留去した。油状物質がコーティングされたコスモシル１４０Ｃ１８に、０．３％ トリエチルアミン−リン酸を含有する、ｐＨ３に調整した水溶液（４００ｍｌ）を加えて懸濁させた後、０．３％ トリエチルアミン−リン酸を含有する、ｐＨ３に調整した１０％アセトニトリル水で平衡化したコスモシル１４０Ｃ１８カラム（６００ｍｌ）に供与した。カラムを同一溶媒（１Ｌ）で洗浄した後、同様に、０．３％ トリエチルアミン−リン酸を含有する、ｐＨ３に調整した２０％アセトニトリル水（１Ｌ）で展開し、溶出液を１７ｍｌ毎に分画した（Ｆｒ．１乃至６２）。その後、０．３％ トリエチルアミン−リン酸を含有する、ｐＨ３に調整した２５％アセトニトリル水（１．６Ｌ、Ｆｒ．６３乃至１５９）、０．３％ トリエチルアミン−リン酸を含有する、ｐＨ３に調整した３０％アセトニトリル水（３Ｌ、Ｆｒ．１６０乃至３３５）の順で展開し、ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤを主成分とするＦｒ．２６５乃至２９４の画分（５００ｍｌ）が得られた。得られた画分を濃縮してアセトニトリルを留去した後、酢酸エチル（４００ｍｌ）を加えて抽出を行った。水層に再度酢酸エチル（３００ｍｌ）を加えて抽出し、２度の抽出操作で得られた有機層を合併した。この有機層（７００ｍｌ）を飽和食塩水（６００ｍｌ）で洗浄後、無水硫酸ナトリウム（８０ｇ）を加えて１時間脱水した。ろ過により無水硫酸ナトリウムを除去した後、ろ液を減圧濃縮乾固し、粗精製物（３３５ｍｇ）が得られた。この粗精製物の一部（１３０ｍｇ）をメタノール（２ｍｌ）に溶解した後、この溶液を２００μlずつ１０回に分け、０．０５％ギ酸を含有する３７％アセトニトリル水で平衡化したＨＰＬＣカラム（ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ Ｃ１８ ＵＧ１２０，２０φ×２５０ ｍｍ（資生堂（株）製）に供与した。カラムを流速１０．０ｍｌ／分で展開し、２１０ｎｍでの紫外部吸収を検出して、保持時間２５．０分（ステレニンＡ）、２６．５分（ステレニンＢ）、２９．０分（ステレニンＣ）および３０．２分（ステレニンＤ）に溶出される活性画分を各々分取した。得られた同一保持時間の画分をあわせ、別個に減圧濃縮後、凍結乾燥し、ステレニンＡ（２４ｍｇ）、ステレニンＢ(２５ｍｇ)、ステレニンＣ（１１ｍｇ）およびステレニンＤ（１０ｍｇ）が得られた
（試験例）１１β−ＨＳＤ１酵素阻害実験
（１）酵素源
ヒト１１β−ＨＳＤ１（GenBank Accession番号:NM_005525、 VERSION:NM_005525.2に配列が記載されている。）の全長をコードするｃＤＮＡを、哺乳類細胞発現ベクターｐＣＩｎｅｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ社）に組み込んだプラスミドをＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎプラス試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）を用いて添付文書に従ってＨＥＫ２９３細胞に導入し、４８時間後の細胞を回収して−８０℃で凍結した。コントロールとしてｐＣＩｎｅｏベクターを導入した細胞を同様に準備した。細胞を融解し、終濃度２０ｍＭのヘペス、１ｍＭのエチレンジアミン四酢酸、２ｍＭの塩化マグネシウム、およびプロテアーゼインヒビターカクテル（ロシュ社）を含む緩衝液で懸濁し、窒素ガス封入により氷上で４．１ＭＰａの圧力を３０分間かけ、細胞を破砕した。細胞破砕液を４℃で１０分間、１，０００×ｇにて遠心分離し、その上清を回収した。得られた上清を更に４℃で３０分間、１０５，０００×gで超遠心し、得られた沈殿をミクロソーム画分としてアッセイバッファー（５０ｍＭ トリス緩衝液、１０％ グリセロール）に懸濁し、酵素源とした。
【００６５】
（２）酵素阻害実験
反応は９６ウェルＰＣＲプレート（パーキンエルマー社）上、反応用量２０μLで行ない、いずれの試料もアッセイバッファー（５０ｍＭ トリス緩衝液，１０％ グリセロール）に希釈して用いた。終濃度５ｍＭとなるＮＡＤＰＨ、５０ｍＭとなるグルコース６リン酸、１０ユニット／ｍＬとなるグルコース６リン酸デヒドロゲナーゼ（シグマ社）、２０ｍＭとなる塩化マグネシウムおよび１ウェルあたり蛋白量５μｇとなるミクロソーム画分をプレートに添加し、ジメチルスルフォキシドに溶解した被検化合物（ステレニンＡ 、ステレニンＢ 、ステレニンＣ及びステレニンＤ のいずれか１種類）、を含む溶液を終濃度０．１％となるよう加えて、室温で１５分間プレインキュベートした。プレインキュベーション終了後、終濃度５００ｎＭとなるコルチゾンを添加して反応を開始し、室温で６０分間反応を行った。プレートを９９℃で１０分間熱して反応を止め、生成したコルチゾール量をコルチゾールプロトタイプキット（ＣＩＳバイオインターナショナル社）を用い、添付文書に従ってＤｉｓｃｏｖｅｒｙ(パッカード社)にて測定した。同様に処理したコントロール細胞由来のミクロソーム画分では見られない、１１β−ＨＳＤ１発現細胞依存的なコルチゾール生成に対し、ステレニンＡは１０μＭで８６％の阻害を、ステレニンＢは１０μＭで６１％の阻害を、ステレニンＣは１０μＭで９３％の阻害を、ステレニンＤは１０μＭで８３％の阻害を各々示した。
【産業上の利用可能性】
【００６６】
本発明により、１１β−ＨＳＤ１阻害活性を有する化合物、ステレニンＡ、ステレニンＢ、ステレニンＣ及びステレニンＤが提供された。さらに、本発明により、該化合物を製造する微生物、及び該微生物を用いた該化合物の製造方法が提供された。本発明の化合物は、糖尿病、肥満、高脂血症、高血圧症からなる群から選択される少なくとも一つの疾患及び／又はこれらの病態を複合的に発症したメタボリックシンドロームの予防および／又は治療に有用である。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、糖尿病、肥満、高脂血症、高血圧症及びこれらの病態を複合的に発症したメタボリックシンドロームからなる群から選択される少なくとも一つの疾患の、治療及び又は予防薬として有効な１１β−ｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ ｔｙｐｅ１（以下、「１１β-ＨＳＤ１」ともいう。）阻害作用を有し、またそれらの作用を増強せしめる目的で導かれる関連誘導体の合成原料として利用可能な新規化合物、該化合物を有効成分として含有する医薬、該化合物の製造方法、および該化合物を生産する新規微生物に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、食生活、生活習慣および生活環境の変化に伴って、肥満、高血糖、高脂血、高血圧、およびこれらの複数の危険因子が重複したメタボリックシンドローム患者が世界的に増加しており、社会的な問題となっている（非特許文献１）。いずれの治療においてもまず食事療法や運動療法が用いられ、効果が少ないか、または重度の場合に薬物療法が併用される。
【０００３】
糖尿病は、インスリン依存性(Ｉ型、ＩＤＤＭ)とインスリン非依存性(ＩＩ型、ＮＩＤＤＭ)とに分類され、糖尿病患者の９０％以上は後者である。ＩＤＤＭの治療にはインスリン注射が用いられ、ＮＩＤＤＭの治療には、インスリン分泌を促進するスルホニルウレア剤、インスリン抵抗性を改善するチアゾリジンジオン系薬剤、糖の消化吸収を抑制するグリコシダーゼ阻害剤、肝臓での糖新生を抑制するビグアナイド系薬剤などが用いられる（非特許文献２）。しかし、いずれの薬剤も必ずしも十分な効果は得られず、また長期間の使用により有効性が減弱することから、重篤な合併症に至る患者が増えている。
【０００４】
肥満治療では重度の患者において中枢性摂食抑制剤が用いられるが、使用限度期間がありリバウンドがおこることから、十分な効果は得られていない。
【０００５】
高血圧症の治療薬として、血管を拡張させるカルシウム拮抗薬、塩分の排泄を促す利尿薬、交感神経を抑えて心拍数を低下させるβ遮断薬、交感神経を抑えて末梢血管を拡張させるα遮断薬、アンジオテンシンによる血管収縮を抑えるためのアンジオテンシン変換酵素阻害薬およびアンジオテンシン受容体拮抗薬などが挙げられる。しかし、脳卒中の最多発生時間帯である早朝の血圧コントロールが難しく降圧療法の現状はまだ十分とは言えない。
【０００６】
高脂血症の治療薬としては、肝臓でのコレステロール合成を阻害するＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、肝臓での中性脂肪の合成を阻害するフィブラート系薬剤、胆汁酸の排泄を促す陰イオン交換樹脂などが用いられる。高脂血症治療の最終的な目的は冠動脈疾患や脳梗塞をはじめとする動脈硬化性疾患の予防であるが、動脈硬化という病態は高脂血症のみならず、高血圧、糖尿病、肥満、加齢など，さまざまな危険因子が重なり合って発症するため、常にこうしたその他の危険因子にも目を配ることが重要であり、多面的な取り組みが求められる（非特許文献３）。
【０００７】
糖質コルチコイド（ヒトにおけるコルチゾール、げっ歯類におけるコルチコステロン）は種々蛋白質の発現を介して筋肉からのアミノ酸を放出および脂肪組織からの脂肪酸とグリセロールの血中への放出を促進し、これらの基質を用いた肝臓での糖新生を促進させ、ひいては血糖の上昇を促す。また、脂肪組織での未成熟な脂肪細胞を成熟させて肥満へと導き、腎臓では鉱質コルチコイド受容体に作用して、血圧を上昇させる活性を有する。糖質コルチコイドによる活性制御機序としては、視床下部−脳下垂体−副腎皮質経路における産生・分泌による制御の他に、肝臓、脂肪組織、肺などの標的臓器における１１β−ＨＳＤ１によるリサイクリング（不活性型から活性型への変換）機構が存在する（非特許文献４）。１１β−ＨＳＤ１阻害剤はこれらの組織での糖質コルチコイドの作用を抑えることで、高血糖、肥満、高脂血症、及び／又は高血圧を抑制し、メタボリックシンドロームに対して多面的な効果を発揮することが期待される。脂肪組織特異的１１β−ＨＳＤ１高発現マウスにおいて、内臓脂肪型肥満、耐糖能の悪化、インスリン抵抗性および血圧の上昇が報告され、これらの可能性を支持している（非特許文献５または非特許文献６参照。）。このような物質としてアミノチアゾ−ルスルホンアミド誘導体（人居文献７）、トリアゾール誘導体（ＷＯ０３／０６５９８３）が知られているが、実用化には至っていない。
【非特許文献１】「ネイチャー（Nature）」、２００１年、第４１４巻、ｐ７８２−７８７
【非特許文献２】「ザ・アメリカン・ジャーナル・オブ・メディスン（The American Journal of Medicine）」、２０００年、第１０８巻、ｐ２３８−２４５
【非特許文献３】「ザ・ジャーナル・オブ・クリニカル・エンドクライノロジー・アンド・メタボリズム（The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism）」、２００４年、第８９巻、ｐ．２６０１−２６０７
【非特許文献４】「エンドクライノロジー（Endocrinology）」、２００１年、第１４２巻、ｐ．１３７１−１３７６
【非特許文献５】「サイエンス（Science）」、２００１年、第２９４巻、ｐ．２１６６−２１７０
【非特許文献６】「ザ・ジャーナル・ジャーナル・オブ・クリニカル・インベスティゲーション（The Journal of Clinical Investigation）」、２００３年、第１１２巻、ｐ．８３−９０
【非特許文献７】「ジャーナル・オブ・メディシナル・ケミストリー（Journal of medicinal chemistry）」、２００２年、第４５巻、ｐ．３８１３−３８１５
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、糖尿病、肥満、高脂血症、高血圧症及びこれらの病態を複合的に発症したメタボリックシンドロームからなる群から選択される少なくとも一つの疾患の、治療及び／又は予防薬として有効な１１β−ｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ ｔｙｐｅ１（以下、「１１β-ＨＳＤ１」ともいう。）阻害作用を有し、またそれらの作用を増強せしめる目的で導かれる関連誘導体の合成原料として利用可能な新規化合物、該化合物を有効成分として含有する医薬、該化合物の製造方法、および該化合物を生産する新規微生物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は；
【００１０】
（１） 下記、一般式 (Ｉ)：
【化１】
【００１１】
［式中、Ｒは
−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ
−ＣＨ（ＣＯ２Ｈ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈ
−Ｈ、または、
−ＣＨ２ＣＯＯＨ］で表わされる化合物またはその塩、
（２） 下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩。
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２３Ｈ２５ＮＯ７
４）分子量：４２７（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｎａ]＋は次に示す通りである。
実測値：４５０．１５２６
計算値：４５０．１５２９
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１２ｎｍ（ε５８６００）, ２６５ｎｍ（ε２４４００）, ２９７ｎｍ（ε１０９００）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３３５７，３２３１，２９７３，２９３１，１６６２，１６２３，１６０２，１４５６，１３７６，１３１１，１２５５，１１９９，１１６４，１０８４，１０６４，１０３５，９９０ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５０（３Ｈ，ｓ），１．５６（３Ｈ，ｓ），２．６０（３Ｈ，ｓ），３．３７（２Ｈ，ｍ），３．７５（２Ｈ，ｔ，J＝５．１Ｈｚ），３．８３（２Ｈ，ｔ，J＝５．１Ｈｚ），４．５８（２Ｈ，ｓ），５．０３（１Ｈ，ｍ），６．２３（１Ｈ，ｂｒ, s），６．３１（１Ｈ，ｂｒ, s），７．０８（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．７（ｔ），２５．９（ｑ），４６．５（ｔ），５０．９（ｔ），６１．３（ｔ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．１(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．１（ｓ），１２７．２（ｓ），１３２．７（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．３（ｓ），１５２．２（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７０．７（ｓ），１７１．８（ｓ）ｐｐｍ、
（３） 下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩。
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２６Ｈ２７ＮＯ１０
４）分子量：５１３（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｈ]＋は次に示す通りである。
実測値：５１４．１６９７
計算値：５１４．１７１３
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１４ｎｍ（ε５８１００）, ２６５ｎｍ（ε２６５００）, ２９６ｎｍ（ε１１１００）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３３４８，３２６４，２９７３，２９２８，２８５８，１７１８，１６６２，１６２４，１６０３，１４５０，１４１３，１３７７，１３１０，１２５４，１１９８，１１６２，１０８７，１０６３，１０３５，９９１ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５２（３Ｈ，ｓ），１．５７（３Ｈ，ｓ），２．２５（１Ｈ，ｍ），２．４０（２Ｈ，ｍ），２．４９（１Ｈ，ｍ），２．６０（３Ｈ，ｓ），３．３９（２Ｈ，ｍ），４．４６（１Ｈ，ｄ，J＝１６．９Ｈｚ），４．５８（１Ｈ，ｄ，J＝１６．９Ｈｚ），４．９９（１Ｈ，ｍ），５．０４（１Ｈ，ｍ），６．２４（１Ｈ，ｂｒ, s），６．３１（１Ｈ，ｂｒ, s），７．０９（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．８（ｔ），２５．９（ｑ），２６．３（ｔ），３１．９（ｔ），４６．９（ｔ），５５．５（ｄ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．４(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．３（ｓ），１２７．５（ｓ），１３２．０（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．４（ｓ），１５２．４（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７１．３（ｓ），１７１．８（ｓ），１７３．９（ｓ），１７６．３（ｓ）ｐｐｍ、
（４） 下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩。
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２１Ｈ２１ＮＯ６
４）分子量：３８３（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｎａ]＋は次に示す通りである。
実測値：４０６．１２７３
計算値：４０６．１２６７
６）紫外部吸収スペクトル
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１３ｎｍ（ε６６７００）, ２６８ｎｍ（ε２３０００）, ２９７ｎｍ（ε１２０００）
７）赤外吸収スペクトル
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３４０９，３２６７，２９７４，２９３１，１６６９，１６５３，１６２３，１５９９，１５０４，１４４６，１４１３，１３７４，１３４９，１３１３，１２５５，１１９３，１１７３，１１６１，１１００，１０６３，１０３８，９９８，９８９ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５０（３Ｈ，ｓ），１．５７（３Ｈ，ｓ），２．６０（３Ｈ，ｓ），３．３８（２Ｈ，ｍ），４．４０（２Ｈ，ｓ），５．０３（１Ｈ，ｍ），６．２２（１Ｈ，ｂｒ，ｓ），６．３０（１Ｈ，ｂｒ，ｓ），７．０８（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．７（ｔ），２５．９（ｑ），４５．０（ｔ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．２(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．３（ｓ），１２９．３（ｓ），１３２．５（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．４（ｓ），１５２．６（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７１．８（ｓ），１７３．４（ｓ）ｐｐｍ、
（５） 下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２３Ｈ２３ＮＯ８
４）分子量：４４１（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｈ]＋は次に示す通りである。
実測値：４４２．１４９５
計算値：４４２．１５０２
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１３ｎｍ（ε９６２００）, ２６５ｎｍ（ε４１３００）, ２９７ｎｍ（ε１７５００）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３３６６，３２４５，２９７３，２９２９，２７３３，１６６２，１６２４，１６０１，１４５８，１４４８，１４０１，１３７７，１３１１，１２５４，１２０１，１１６５，１１０３，１０８１，１０３５，９９５，９４６ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５０（３Ｈ，ｓ），１．５７（３Ｈ，ｓ），２．６１（３Ｈ，ｓ），３．３９（２Ｈ，ｍ），４．３８（２Ｈ，ｓ），４．５４（２Ｈ，ｓ），５．０４（１Ｈ，ｍ），６．２３（１Ｈ，ｂｒ，ｓ），６．３０（１Ｈ，ｂｒ，ｓ），７．０８（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．８（ｔ），２５．９（ｑ），４５．１（ｔ），５０．３（ｔ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．４(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．３（ｓ），１２７．５（ｓ），１３２．１（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．４（ｓ），１５２．４（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７０．８（ｓ），１７１．８（ｓ），１７２．８ｐｐｍ、
（６） ステレウム（Ｓｔｅｒｅｕｍ）属に属する、（１）乃至（５）のいずれか１項に記載の化合物の生産菌を培養し、その培養物より（１）乃至（５）のいずれか１項に記載の化合物を採取することを特徴とする、（１）乃至（５）のいずれか１項に記載の化合物の製造方法、
（７） ステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１２０５株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６５）または、ステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１１０５株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６４）を培養し、その培養物より（１）乃至（５）のいずれか１項に記載の化合物を採取することを特徴とする、（１）乃至（５）のいずれか１項に記載の化合物の製造方法、
（８） ステレウム（Ｓｔｅｒｅｕｍ）属に属し、（１）乃至（５）のいずれか１項に記載の化合物を生産することを特徴とする微生物、
（９） ステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１２０５株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６５）、
（１０）ステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１１０５株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６４）、
（１１） （１）乃至（５）のいずれか１項に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬組成物、
（１２） 糖尿病、肥満、高脂血症、高血圧及びメタボリックシンドロームからなる群から選択される少なくとも一つの疾患の治療及び／又は予防薬である（１１）に記載の医薬組成物、
（１３） （１）乃至（５）のいずれか１項に記載の化合物もしくはその塩を含有してなる１１β−ｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ ｔｙｐｅ１（１１β−ＨＳＤ１）阻害剤、
に関する。
【００１２】
また、本発明は、以下に記載の化合物に関する。
（ｉ）下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩。
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２３Ｈ２５ＮＯ７
４）分子量：４２７（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｎａ]＋は次に示す通りである。
実測値：４５０．１５２６
計算値：４５０．１５２９
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１２ｎｍ（ε５８６１０）, ２６５ｎｍ（ε２４３８５）, ２９７ｎｍ（ε１０９０９）,
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３３５７，３２３１，２９７３，２９３１，１６６２，１６２３，１６０２，１４５６，１３７６，１３１１，１２５５，１１９９，１１６４，１０８４．１０６４，１０３５，９９０ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５０（３Ｈ，ｓ），１．５６（３Ｈ，ｓ），２．６０（３Ｈ，ｓ），３．３７（２Ｈ，ｍ），３．７５（２Ｈ，ｔ，J＝５．１Ｈｚ），３．８３（２Ｈ，ｔ，J＝５．１Ｈｚ），４．５８（２Ｈ，ｓ），５．０３（１Ｈ，ｍ），６．２３（１Ｈ，ｓ, ｂｒ），６．３１（１Ｈ，ｓ, ｂｒ），７．０８（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．７（ｔ），２５．９（ｑ），４６．５（ｔ），５０．９（ｔ），６１．３（ｔ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．１(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．１（ｓ），１２７．２（ｓ），１３２．７（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．３（ｓ），１５２．２（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７０．７（ｓ），１７１．８（ｓ）ｐｐｍ
（ｉｉ）下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩。
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２６Ｈ２７ＮＯ１０
４）分子量：５１３（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｈ]＋は次に示す通りである。
実測値：５１４．１６９７
計算値：５１４．１７１３
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１４ｎｍ（ε５８１３３）, ２６５ｎｍ（ε２６５０６）, ２９６ｎｍ（ε１１１４５）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３３４８，３２６４，２９７３，２９２８，２８５８，１７１８，１６６２，１６２４，１６０３，１４５０，１４１３，１３７７，１３１０，１２５４，１１９８，１１６２，１０８７，１０６３，１０３５，９９１ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５２（３Ｈ，ｓ），１．５７（３Ｈ，ｓ），２．２５（１Ｈ，ｍ），２．４０（２Ｈ，ｍ），２．４９（１Ｈ，ｍ），２．６０（３Ｈ，ｓ），３．３９（２Ｈ，ｍ），４．４６（１Ｈ，ｄ，J＝１６．９Ｈｚ），４．５８（１Ｈ，ｄ，J＝１６．９Ｈｚ），４．９９（１Ｈ，ｍ），５．０４（１Ｈ，ｍ），６．２４（１Ｈ，ｓ, ｂｒ），６．３１（１Ｈ，ｓ, ｂｒ），７．０９（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．８（ｔ），２５．９（ｑ），２６．３（ｔ），３１．９（ｔ），４６．９（ｔ），５５．５（ｄ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．４(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．３（ｓ），１２７．５（ｓ），１３２．０（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．４（ｓ），１５２．４（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７１．３（ｓ），１７１．８（ｓ），１７３．９（ｓ），１７６．３（ｓ）ｐｐｍ
（ｉｉｉ）下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩；
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２１Ｈ２１ＮＯ６
４）分子量：３８３（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｎａ]＋は次に示す通りである。
実測値：４０６．１２７３
計算値：４０６．１２６７
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１３ｎｍ（ε６６７４６）, ２６８ｎｍ（ε２２９６７）, ２９７ｎｍ（ε１１９６２）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３４０９，３２６７，２９７４，２９３１，１６６９，１６５３，１６２３，１５９９，１５０４，１４４６，１４１３，１３７４，１３４９，１３１３，１２５５，１１９３，１１７３，１１６１，１１００，１０６３，１０３８，９９８，９８９ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５０（３Ｈ，ｓ），１．５７（３Ｈ，ｓ），２．６０（３Ｈ，ｓ），３．３８（２Ｈ，ｍ），４．４０（２Ｈ，ｓ），５．０３（１Ｈ，ｍ），６．２２（１Ｈ，ｓ, ｂｒ），６．３０（１Ｈ，ｓ, ｂｒ），７．０８（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．７（ｔ），２５．９（ｑ），４５．０（ｔ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．２(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．３（ｓ），１２９．３（ｓ），１３２．５（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．４（ｓ），１５２．６（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７１．８（ｓ），１７３．４（ｓ）ｐｐｍ
（ｉｖ） 下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩。
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２３Ｈ２３ＮＯ８
４）分子量：４４１（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｈ]＋は次に示す通りである。
実測値：４４２．１４９５
計算値：４４２．１５０２
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１３ｎｍ（ε９６１６７）, ２６５ｎｍ（ε４１２５０）, ２９７ｎｍ（ε１７５００）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３３６６，３２４５，２９７３，２９２９，２７３３，１６６２，１６２４，１６０１，１４５８，１４４８，１４０１，１３７７，１３１１，１２５４，１２０１，１１６５，１１０３，１０８１，１０３５，９９５，９４６ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５０（３Ｈ，ｓ），１．５７（３Ｈ，ｓ），２．６１（３Ｈ，ｓ），３．３９（２Ｈ，ｍ），４．３８（２Ｈ，ｓ），４．５４（２Ｈ，ｓ），５．０４（１Ｈ，ｍ），６．２３（１Ｈ，ｓ, ｂｒ），６．３０（１Ｈ，ｓ, ｂｒ），７．０８（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．８（ｔ），２５．９（ｑ），４５．１（ｔ），５０．３（ｔ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．４(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．３（ｓ），１２７．５（ｓ），１３２．１（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．４（ｓ），１５２．４（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７０．８（ｓ），１７１．８（ｓ），１７２．８ｐｐｍ。
【発明の効果】
【００１３】
本発明により、１１β−ＨＳＤ１阻害活性を有する化合物である、ステレニンＡ、ステレニンＢ、ステレニンＣ及びステレニンＤが提供された。さらに、本発明により、該化合物を製造する微生物、及び該微生物を用いた該化合物の製造方法が提供された。本発明の化合物は、糖尿病、肥満、高脂血、高血圧及びこれらの病態を複合的に発症したメタボリックシンドロームからなる群から選択される少なくとも一つの疾患の治療及び／又は予防に有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
１．ステレニンＡ、ステレニンＢ、ステレニンＣ及びステレニンＤ
本明細書中において、ステレニンＡ（Ｓｔｅｒｅｎｉｎ Ａ）とは、以下の一般式(Ｉ)：
【００１５】
【化２】
【００１６】
においてＲが−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨである化合物または上記（ｉ）に記載の物理化学的性状を有する化合物を示す。同様に、ステレニンＢ（Ｓｔｅｒｅｎｉｎ Ｂ）とは、ＲがＣＨ（ＣＯ２Ｈ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈである化合物または上記（ｉｉ）に記載の物理化学的性状を有する化合物を示し、ステレニンＣ（Ｓｔｅｒｅｎｉｎ Ｃ）とは、Ｒが−Ｈである化合物または上記（ｉｉｉ）に記載の物理化学的性状を有する化合物を示し、ステレニンＤ（Ｓｔｅｒｅｎｉｎ Ｄ）とは、Ｒが−ＣＨ２ＣＯＯＨである化合物または上記（ｉｖ）に記載の物理化学的性状を有する化合物を示す。
【００１７】
本発明の化合物は、より優れた血糖値低下作用、肥満改善作用、血中脂質低下作用、血圧低下作用からなる群から選択される少なくとも一つの作用、及び／またはメタボリックシンドローム改善作用を有する誘導体を合成する際の出発原料とすることも可能である。
【００１８】
本発明の化合物は、塩基を用いて当業者に周知の方法により塩にすることができる。本発明はこれらの塩も包含する。本発明の化合物の塩を医薬として使用する場合、医学的に使用され、薬理学的に許容されるものであれば特に限定はなく、また、医薬以外の用途に用いる場合、例えば中間体として用いる場合には、該用途に用いることのできるものであれば特に限定されない。
【００１９】
そのような塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、のようなアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩、のようなアルカリ土類金属塩；アルミニウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、ニッケル塩、コバルト塩等の金属塩；アンモニウム塩のような無機塩；ｔ−オクチルアミン塩、ジベンジルアミン塩、モルホリン塩、グルコサミン塩、フェニルグリシンアルキルエステル塩、エチレンジアミン塩、Ｎ−メチルグルカミン塩、グアニジン塩、ジエチルアミン塩、トリエチルアミン塩、ジシクロヘキシルアミン塩、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン塩、クロロプロカイン塩、プロカイン塩、ジエタノールアミン塩、Ｎ−ベンジル−フェネチルアミン塩、ピペラジン塩、テトラメチルアンモニア塩、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン塩のような有機アミン塩；グリシン塩、リジン塩、アルギニン塩、オルニチン塩、アスパラギン塩のようなアミノ酸塩、好適には、薬理学的に許容される塩であり、より好適には、ナトリウム塩、カリウム塩、アンモニウム塩である。
【００２０】
また、本発明の化合物およびその塩は、大気中に放置したり、水又は有機溶媒と混和することによって水又は溶媒と結合し、水和物又は溶媒和物を形成する場合があるが、これらの水和物及び溶媒和物も本発明に含まれる。
【００２１】
更に、ステレニンＢは不斉炭素原子を有するため、２つの光学異性体が存在する。一般式（Ｉ）において、これらの異性体は単一の式で示されているが、本発明はラセミ化合物を含むこれらの異性体、およびこれらの異性体の混合物をもすべて含む。これらの異性体は、立体特異的合成法により、若しくは光学活性化合物を原料化合物とした合成により、製造することができる。
【００２２】
２．ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤの製造方法に用いられる微生物
ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤの製造方法において用いられる、ステレウム（キウロコタケ）（Ｓｔｅｒｅｕｍ）属に属する菌株としては、例えばステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１２０５株（以下、「ＳＡＮＫ２１２０５株」とする。）、またはステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１１０５株（以下、「ＳＡＮＫ２１１０５株」とする）を挙げることができる。ＳＡＮＫ２１２０５株は、群馬県で採集した担子菌子実体の担子胞子より分離された。また、ＳＡＮＫ２１１０５株は、静岡県で採集した担子菌子実体の担子胞子より分離された。
【００２３】
本菌の菌学的性状を観察するため、次の各培地上で培養を行った。使用した各培地の組成を以下に記載する。
＜ＰＤＡ培地（ポテトデキストロース寒天（Ｐｏｔａｔｏ Ｄｅｘｔｒｏｓｅ Ａｇａｒ）培地）＞
ポテトデキストロース寒天培地「ニッスイ」（日水製薬（株）製） ３９ｇ
寒天 ５ｇ
蒸留水 １０００ｍｌ
＜ＭＥＡ培地（マルトエキス寒天培地）＞
マルトエキス １２．５ｇ
寒天 ２０ｇ
蒸留水 １０００ｍｌ
色調の表示は「メチューン・ハンドブック・オブ・カラー」 （Ｋｏｒｎｅｒｕｐ Ａ． ＆ Ｗａｎｓｃｈｅｒ Ｊ． Ｈ． （１９７８） Ｍｅｔｈｕｅｎ ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ ｃｏｌｏｕｒ（３ｒｄ． ｅｄｉｔｉｏｎ）． Ｅｒｙｅ Ｍｅｔｈｕｅｎ， Ｌｏｎｄｏｎ）に従った。
ＳＡＮＫ２１２０５株の培養下での菌学的性状は次の通りである。
【００２４】
ＰＤＡ培地上での成長は、２３℃、１週間の培養で４１乃至４９ｍｍである。菌そうは綿毛状、中心部でイエロイッシュホワイト（４A２）を呈する。裏面は中心部でペールイエロー（４A３）を呈する。気菌糸は幅１．５乃至８μｍ、薄壁、平滑である。かすがい連結は隔壁あたり０乃至４個形成される。分生子は形成されない。菌そう中心部で不溶性の細かい油滴を付着した菌糸が観察される。ＭＥＡ培地上での成長は、２３℃、１週間の培養で３４乃至４０ｍｍである。菌そうは薄く、白色である。裏面は変化なし。
【００２５】
ＳＡＮＫ２１１０５株の培養下での菌学的性状は次の通りである。
【００２６】
ＰＤＡ培地上での成長は、２３℃、１週間の培養で５０乃至５６ｍｍである。菌そうは綿毛状、中心部でパステルイエロー（３Ａ４）乃至ライトイエロー（４Ａ４）を呈する。裏面は中心部でペールイエロー（４A３）を呈する。気菌糸は幅１．５乃至８μｍ、薄壁、平滑である。かすがい連結は隔壁あたり０乃至３個形成される。菌そう中心部で不溶性の細かい油滴を付着した菌糸が観察される。ＭＥＡ培地上での成長は、２３℃、１週間の培養で３７乃至４２ｍｍである。菌そうは薄く、白色である。裏面は変化なし。
【００２７】
ＳＡＮＫ２１２０５株及びＳＡＮＫ２１１０５株を同定するため、分離に供試した子実体乾燥標本の菌学的性状を観察した。その乾燥標本の菌学的性状は次の通りである。
【００２８】
子実体は背着生乃至半背着生である。傘は幅５mm以下、厚さ０．４mm以下、貝殻形乃至扇形、横に連なり、堅い。表面は粗長毛状、灰白色を呈する。傘の縁は薄く、鋭角である。子実層面は平滑乃至ややこぶ状、淡橙色である。下皮が毛被と肉の間に存在する。下皮は厚さ２５μｍ以下、褐色を呈する。
【００２９】
担子胞子は８乃至１２×３乃至４μｍ、円筒形でやや湾曲することもあり、薄壁、平滑、アミロイドである。担子器は４０乃至５０×５乃至６μｍ、狭棍棒形、4胞子性。小柄は長さ４μｍ。偽シスチジアは幅４．５乃至６μｍ、円筒形、基部で厚壁（２μｍ以下）、先端で薄壁、先端に小さい突起を有することがある。菌糸は1菌糸型、幅２乃至６μｍ、薄壁乃至厚壁、隔壁にかすがい連結は観察されない。アカントハイフィディアや偽アカントハイフィディアは観察されない。
【００３０】
以上のような菌学的性状は、チャムリス（１９８８年）「ノンスティピテイト ステレオイド ファンジャイ イン ザ ノースイースタン ユナイテッド ステーツ アンド アジャセント カナダ」Ｊ クリマー、ベルリン（Ｃｈａｍｕｒｉｓ Ｇ． Ｐ． （１９８８） Ｔｈｅ ｎｏｎ−ｓｔｉｐｉｔａｔｅ ｓｔｅｒｅｏｉｄ ｆｕｎｇｉ ｉｎ ｔｈｅ ｎｏｒｔｈｅａｓｔｅｒｎ Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ ａｎｄ ａｄｊａｃｅｎｔ Ｃａｎａｄａ． Ｊ． Ｃｒａｍｅｒ， Ｂｅｒｌｉｎ）のステレウム（キウロコタケ）（Ｓｔｅｒｅｕｍ）属の記載に一致した。ＳＡＮＫ２１２０５株及びＳＡＮＫ２１１０５株は同種であり、ＳＡＮＫ２１２０５株及びＳＡＮＫ２１１０５株を、ステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）と同定した。
なお、ＳＡＮＫ２１２０５株はステレウム エスピー ＳＡＮＫ２１２０５株として、ＳＡＮＫ２１１０５株は、ステレウム エスピー ＳＡＮＫ２１１０５株として、平成１７年１２月６日付けで日本国茨城県つくば市東１−１−１の独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センターに国際寄託され、それぞれ受託番号ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６５及びＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６４を付与された。
【００３１】
周知の通り、真菌類は自然界において、又は人工的な操作（例えば、紫外線照射、放射線照射、化学薬品処理等）により、変異を起こしやすく、本発明のＳＡＮＫ２１２０５株及びＳＡＮＫ２１１０５株もその点は同じである。本発明にいうＳＡＮＫ２１２０５株及びＳＡＮＫ２１１０５株はその全ての変異株を包含する。
【００３２】
また、これらの変異株の中には、遺伝的方法、たとえば組み換え、形質導入、形質転換等によりえられたものも包含される。即ち、ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤを生産するＳＡＮＫ２１２０５株及びＳＡＮＫ２１１０５株、それらの変異株およびそれらと明確に区別されない菌株は全てＳＡＮＫ２１２０５株及びＳＡＮＫ２１１０５株に包含される。
【００３３】
３．ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤを生産する微生物の培養方法及びステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤの精製方法
（１）培養方法
本発明のステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤを得るための、これらの微生物の培養は一般に他の発酵生成物を生産するために用いられる培地と同様の培地を用いて行なわれる。このような培地は、微生物が資化出来る炭素源、窒素源および無機塩を含有する。
【００３４】
炭素源としては、例えば、グルコース、フラクトース、マルトース、シュークロース、マンニトール、グリセリン、デキストリン、オート麦、ライ麦、大麦、玄米、トウモロコシデンプン、ジャガイモ、トウモロコシ粉、大豆油、綿実油、糖蜜、クエン酸、酒石酸等をあげることができる。これらの炭素源は単独または組み合わせて用いることができる。
培地に加える炭素源の量は、培地中の他の成分により異なるが、通常、培地量の１乃至１０重量％である。
【００３５】
窒素源としては、例えば、大豆粉、フスマ、落花しょう粉、綿実紛、カゼイン加水分解物、ファーマミン、コーンスチープリカー、ペプトン、肉エキス、イースト、イーストエキス、マルトエキス、硝酸ナトリウム、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウム、Ｌ−グルタミン酸ナトリウム等をあげることができる。これらの炭素源は単独または組み合わせて用いることができる。
【００３６】
培地に加える窒素源の量は、培地中の他の成分により異なるが、通常、０．２乃至６重量％である。
【００３７】
炭素源および窒素源は、一般に組み合わせて用いるが、純粋な形態である必要はなく、微量の生育因子、ビタミンおよび無機栄養を含むより純度の低いものを用いてもよい。
【００３８】
無機塩としては、例えば、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、アンモニウム、カルシウム、リン酸、硫酸、塩酸、炭酸等のイオンを生じる塩類をあげることができる。
【００３９】
また、菌の資化しうるビタミンＢ１、ビオチンのようなビタミン類、チアミンのような菌体増殖促進物質等も必要に応じて添加してもよい。
【００４０】
更に、マンガン、モリブデン、その他の金属塩を必要に応じて添加してもよい。
【００４１】
栄養培地が泡立つ場合などは必要に応じて、シリコンオイル、ポリアルキレングリコールエーテル、植物油、動物油、界面活性剤のような消泡剤を培地に添加してもよい。特に、液体培養に際しては、これらの消泡剤を添加することが好適である。
【００４２】
培地のｐＨは、培地の成分、生育温度等により異なるが、通常発酵生成物を生産するために用いられるｐＨであればよい。
【００４３】
菌の生育温度は、培地の成分、ｐＨ等により異なるが、通常、１５℃乃至３０℃であり、２０乃至２８℃の範囲が生育に良好である。ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤの生産には、２０乃至２６℃が好適である。
【００４４】
培養方法としては、特に制限はなく、微生物一般に用いられる培養法であればよく、固形培地を用いた培養法、攪拌培養法、振とう培養法、通気培養法等を使用することができ、好適には、固形培地を用いた培養である。
【００４５】
培養においては、好適には２０乃至２６℃、更に好適には２３℃で１０日以上固体培養を行なう。培養は三角フラスコ中で、１または２段階の種の発育工程により開始させる。種の発育段階の培地には、炭素源、窒素源、微量の生育因子、無機塩類および微量金属類を併用できる。種培養用三角フラスコはロータリー振とう培養機中で２０乃至２６℃（好適には２３℃）、５乃至１０日間（好適には７日間）振とうするか、又は充分に生育するまで振とうする。生育した種培養液は、第二の種培養培地又は生産培養培地に接種するために用いられる。中間の発育工程を用いる場合には、本質的に第一の種培養と同様の方法で生育させ、その種培養液を三角フラスコなどの固体培地培養容器中の生産培養培地に接種する。接種した固体培地培養容器を一定温度で静置して、生産培養を行なう。
【００４６】
（２）ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤの精製方法
培養終了後、固体培養の場合、固体培養物中に存在するステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤは、５０乃至９０％の含水アセトンまたは含水メタノールにより抽出し、濃縮操作により有機溶剤を除去した後、酸性条件下で、水と混和しない有機溶剤、例えば、酢酸エチル、クロロホルム、塩化エチレン、塩化メチレン、ブタノール等の単独または、それらの組み合わせにより抽出精製することができる。または、吸着剤として、例えば、活性炭または吸着用樹脂であるアンバーライトＸＡＤ−２、ＸＡＤ−４（ローム・アンド・ハース（株）製）等や、ダイアイオンＨＰ−１０、ＨＰ−２０、ＣＨＰ２０Ｐ、ＨＰ−５０、セパビーズＳＰ−２０７（三菱化学（株）製）等を使用して抽出精製することもできる。吸着剤を使用して抽出精製する場合、目的化合物を含む液を、吸着剤の層を通過させ、不純物を吸着剤に吸着させることにより取り除くか、または、目的化合物を吸着させて不純物を洗い流した後、メタノール水、アセトン水、ブタノ−ル水等を用いて目的化合物を溶出させることにより、目的化合物を抽出精製することができる。
【００４７】
液体培養の場合、培養液中の液体部分および菌体内、またはその双方に存在するステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤは、培養終了液の全て、あるいは菌体、その他の固形部分を、珪藻土をろ過助剤とするろ過操作または遠心分離によって分別し、得られたろ液または上清および菌体中から、11β−ＨＳＤ１阻害活性または高速液体クロマトグラフィーを指標にして、その物理化学的性状を利用し抽出精製することができる。
【００４８】
ろ液または上清中に存在するステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤは、水と混和しない有機溶剤、例えば、酢酸エチル、クロロホルム、塩化エチレン、塩化メチレン、ブタノール等の単独または、それらの組み合わせにより抽出することができる。これらの抽出液は、固体培養と同様な抽出精製操作を行うことにより目的の化合物を抽出精製することができる。
【００４９】
菌体内に存在するステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤは、５０乃至９０％の含水アセトンまたは含水メタノールにより抽出し、濃縮操作により有機溶剤を除去した後、上記と同様に抽出精製操作を行うことにより得ることができる。例えば、培養終了後に適当量（好ましくは終濃度５０％）の、アセトンまたはメタノールを添加することにより目的の化合物を抽出することができる。抽出終了後、珪藻土をろ過助剤とするろ過操作を行ない、得られた抽出液を固体培養と同様な抽出精製操作を行うことにより目的の化合物を抽出精製することができる。
【００５０】
上記の方法により抽出精製されたステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤを含む溶液は、シリカゲル、セファデックスＬＨ−２０（アマシャムバイオサイエンス（株）製）、フロリジル、コスモシル（ナカライテスク（株）製）のような担体を用いた分配カラムクロマトグラフィー；ダイヤイオンＨＰ−２０、ＣＨＰ２０Ｐ（三菱化学（株）製）のような担体を用いた吸着カラムクロマトグラフィー；セファデックスＧ−１０（アマシャムバイオサイエンス（株）製）、トヨパールＨＷ４０Ｆ（トーソー（株）製）などを用いたゲルろ過クロマトグラフィー；ダウエックス１（ダウケミカル（株）製）、ダイヤイオンＰＡ３１６（三菱化学（株）製）、ＤＥＡＥセファデックスＡ−２５（アマシャムバイオサイエンス（株）製）などを用いたイオン交換クロマトグラフィー；および順相、逆相カラムを用いた高速液体クロマトグラフィー等により更に精製することができる。
【００５１】
以上の分離、精製の手段を単独または適宜組み合わせ、場合によっては反復して用いることにより、本発明のステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤを分離精製することができる。
【００５２】
以上、ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤの製造法の代表的な方法を説明したが、製造方法はこれらに限定されず、既に当業者に知られているこれら以外の製造方法を用いることもできる。
【００５３】
４．ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤからなる群から選択される少なくとも１つの化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする医薬
本発明のステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤからなる群から選択される少なくとも１つの化合物またはその薬理学的に許容される塩は、種々の形態で投与することができる。その投与形態としては、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、乳剤、丸剤、散剤、シロップ剤（液剤）等による経口投与、または注射剤（静脈内、筋肉内、皮下または腹腔内投与）、点滴剤、坐剤（直腸投与）等による非経口投与を挙げることができる。これらの各種製剤は、常法に従って主薬に賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、矯味矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤等の医薬の製剤技術分野において通常使用し得る補助剤を用いて製剤化することができる。
【００５４】
錠剤として使用する場合、担体として、例えば、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、グルコース、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸等の賦形剤；水、エタノール、プロパノール、単シロップ、グルコース液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、セラック、メチルセルロース、リン酸カリウム、ポリビニルピロリドン等の結合剤；乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、寒天末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、デンプン、乳糖等の崩壊剤；白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油等の崩壊抑制剤；第４級アンモニウム塩類、ラウリル硫酸ナトリウム等の吸収促進剤；グリセリン、デンプン等の保湿剤；デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸等の吸着剤；精製タルク、ステアリン酸塩、硼酸末、ポリエチレングリコール等の潤沢剤等を使用することができる。また、必要に応じ通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、腸溶被錠、フィルムコーティング錠あるいは二重錠、多層錠とすることができる。
【００５５】
丸剤として使用する場合、担体として、例えば、グルコース、乳糖、カカオバター、デンプン、硬化植物油、カオリン、タルク等の賦形剤；アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノール等の結合剤；ラミナラン寒天等の崩壊剤等を使用することができる。
【００５６】
坐剤として使用する場合、担体としてこの分野で従来公知のものを広く使用でき、例えばポリエチレングリコール、カカオバター、高級アルコール、高級アルコールのエステル類、ゼラチン、半合成グリセリド等を挙げることができる。
【００５７】
注射剤として使用する場合、液剤、乳剤または懸濁剤として使用することができる。これらの液剤、乳剤または懸濁剤は、殺菌され、血液と等張であることが好ましい。これら液剤、乳剤または懸濁剤の製造に用いる溶液は、医療用の希釈剤として使用できるものであれば特に限定はなく、例えば、水、エタノール、プロピレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類等を挙げることができる。なお、この場合、等張性の溶液を調製するのに充分な量の食塩、グルコースまたはグリセリンを製剤中に含んでいてもよく、また通常の溶解補助剤、緩衝剤、無痛化剤等を含んでいてもよい。
【００５８】
また、上記の製剤には、必要に応じて、着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤等を含めることもでき、更に、他の医薬品を含めることもできる。
【００５９】
上記製剤に含まれる有効成分化合物の量は、特に限定されず広範囲に適宜選択されるが、通常、全組成物中１乃至７０重量％、好ましくは１乃至３０重量％含む。
【００６０】
使用量としては、症状、年齢、体重、投与方法および剤形等によって異なるが、通常は成人に対して１日あたり、上限として２０００ｍｇ（好ましくは１００ｍｇ）であり、下限として０．１ｍｇ（好ましくは１ｍｇ、さらに好ましくは１０ｍｇ）を症状に応じて、一日１回または数回に分けて投与することができる。
【実施例】
【００６１】
次に、実施例をあげて本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
（実施例１）ＳＡＮＫ２１２０５株の培養
ＳＡＮＫ２１２０５株のスラントより約１ｃｍ角の菌糸片を切り取り、あらかじめ滅菌水約３ｍｌで満たしたガラスポッターに懸濁した。ガラスポッターを用いて菌糸片をホモジナイズし、全量を滅菌（１２１℃、２０分間）した後述の組成からなる種培養培地(表１)３０ｍｌを含む１００ｍｌ容三角フラスコに接種した。同様の操作を行い、１５本の種培養フラスコを用意した。２３℃で２１０ｒｐｍのロータリー振とう培養機中で７日間培養した。このようにして得られた種培養液を、滅菌（１２１℃、４０分間）した後述の生産培養培地(表２)の培地組成を含む５００ｍｌ容固体培地培養容器（アグリフレックス、藤森工業（株）社製）１５本にそれぞれ３０ｍｌ接種し、２３℃で静置して１４日間培養した。
【００６２】
(表１)種培養培地の培地組成
―――――――――――――――――――――――――――――――――――――
グルコース ４ｇ
マルトエキス（Ｄｉｆｃｏ） １０ｇ
イーストエキス（Ｄｉｆｃｏ） ４ｇ
寒天 ３ｇ
消泡剤＊ ０．０５ｍｌ
蒸留水 １０００ｍｌ
―――――――――――――――――――――――――――――――――――――
＊ニッサン・ディスフォームＣＢ−４４２（登録商標、日本油脂（株）社製）
【００６３】
(表２)生産培養培地の培地組成（５００ｍｌ容固体培地培養容器1本あたり）
―――――――――――――――――――――――――――――――――――――
玄米 ９０ｇ
ＮａＮＯ３ ０．０５ｇ
ＫＨ２ＰＯ４ ０．０５ｇ
ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ ０．０５ｇ
蒸留水 １００ｍｌ
―――――――――――――――――――――――――――――――――――――
（実施例２）ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤの単離・精製
以下の精製においては、活性画分を以下の条件でＨＰＬＣを用い、モニターした。
【００６４】
カラム：カプセルパック（ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ）Ｃ１８ＵＧ１２０：
４．６φ×１５０ｍｍ (資生堂（株）製)
溶媒：０．０５％ギ酸を含有する３５％アセトニトリル水
流速：１．０ｍｌ／分
検出：紫外部吸収２１０ｎｍ
保持時間：８．４９分（ステレニンＡ）
９．６０分（ステレニンＢ）
９．６５分（ステレニンＣ）
１０．７１分（ステレニンＤ）
実施例１で得られた培養終了物（３Ｌ）にアセトン（３Ｌ）を添加し、攪拌しながら３０分間放置した後、抽出液にセライト５４５（１５０ｇ）を加え、ろ過した。得られたろ液を６Ｎ ＨＣｌでｐＨ３に調整し、酢酸エチル（２Ｌ）を加えて抽出を行った。得られた水層に再度酢酸エチル（１．５Ｌ）を加えて抽出し、２度の抽出操作で得られた有機層を合併した。この有機層（３．５Ｌ）を飽和食塩水（２Ｌ）で洗浄後、無水硫酸ナトリウム（４００ｇ）を加えて１時間脱水した。ろ過により無水硫酸ナトリウムを除去した後、ろ液を減圧濃縮乾固し、油状物質（１３ｇ）が得られた。この油状物質を、メタノール（５０ｍｌ）に溶解した後、コスモシル１４０Ｃ１８（６０ｇ：ナカライテスク（株）製）に攪拌しながら添加し、メタノールを留去した。油状物質がコーティングされたコスモシル１４０Ｃ１８に、０．３％ トリエチルアミン−リン酸を含有する、ｐＨ３に調整した水溶液（４００ｍｌ）を加えて懸濁させた後、０．３％ トリエチルアミン−リン酸を含有する、ｐＨ３に調整した１０％アセトニトリル水で平衡化したコスモシル１４０Ｃ１８カラム（６００ｍｌ）に供与した。カラムを同一溶媒（１Ｌ）で洗浄した後、同様に、０．３％ トリエチルアミン−リン酸を含有する、ｐＨ３に調整した２０％アセトニトリル水（１Ｌ）で展開し、溶出液を１７ｍｌ毎に分画した（Ｆｒ．１乃至６２）。その後、０．３％ トリエチルアミン−リン酸を含有する、ｐＨ３に調整した２５％アセトニトリル水（１．６Ｌ、Ｆｒ．６３乃至１５９）、０．３％ トリエチルアミン−リン酸を含有する、ｐＨ３に調整した３０％アセトニトリル水（３Ｌ、Ｆｒ．１６０乃至３３５）の順で展開し、ステレニンＡ，ステレニンＢ、ステレニンＣおよびステレニンＤを主成分とするＦｒ．２６５乃至２９４の画分（５００ｍｌ）が得られた。得られた画分を濃縮してアセトニトリルを留去した後、酢酸エチル（４００ｍｌ）を加えて抽出を行った。水層に再度酢酸エチル（３００ｍｌ）を加えて抽出し、２度の抽出操作で得られた有機層を合併した。この有機層（７００ｍｌ）を飽和食塩水（６００ｍｌ）で洗浄後、無水硫酸ナトリウム（８０ｇ）を加えて１時間脱水した。ろ過により無水硫酸ナトリウムを除去した後、ろ液を減圧濃縮乾固し、粗精製物（３３５ｍｇ）が得られた。この粗精製物の一部（１３０ｍｇ）をメタノール（２ｍｌ）に溶解した後、この溶液を２００μlずつ１０回に分け、０．０５％ギ酸を含有する３７％アセトニトリル水で平衡化したＨＰＬＣカラム（ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ Ｃ１８ ＵＧ１２０，２０φ×２５０ ｍｍ（資生堂（株）製）に供与した。カラムを流速１０．０ｍｌ／分で展開し、２１０ｎｍでの紫外部吸収を検出して、保持時間２５．０分（ステレニンＡ）、２６．５分（ステレニンＢ）、２９．０分（ステレニンＣ）および３０．２分（ステレニンＤ）に溶出される活性画分を各々分取した。得られた同一保持時間の画分をあわせ、別個に減圧濃縮後、凍結乾燥し、ステレニンＡ（２４ｍｇ）、ステレニンＢ(２５ｍｇ)、ステレニンＣ（１１ｍｇ）およびステレニンＤ（１０ｍｇ）が得られた
（試験例）１１β−ＨＳＤ１酵素阻害実験
（１）酵素源
ヒト１１β−ＨＳＤ１（GenBank Accession番号:NM_005525、 VERSION:NM_005525.2に配列が記載されている。）の全長をコードするｃＤＮＡを、哺乳類細胞発現ベクターｐＣＩｎｅｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ社）に組み込んだプラスミドをＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎプラス試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）を用いて添付文書に従ってＨＥＫ２９３細胞に導入し、４８時間後の細胞を回収して−８０℃で凍結した。コントロールとしてｐＣＩｎｅｏベクターを導入した細胞を同様に準備した。細胞を融解し、終濃度２０ｍＭのヘペス、１ｍＭのエチレンジアミン四酢酸、２ｍＭの塩化マグネシウム、およびプロテアーゼインヒビターカクテル（ロシュ社）を含む緩衝液で懸濁し、窒素ガス封入により氷上で４．１ＭＰａの圧力を３０分間かけ、細胞を破砕した。細胞破砕液を４℃で１０分間、１，０００×ｇにて遠心分離し、その上清を回収した。得られた上清を更に４℃で３０分間、１０５，０００×gで超遠心し、得られた沈殿をミクロソーム画分としてアッセイバッファー（５０ｍＭ トリス緩衝液、１０％ グリセロール）に懸濁し、酵素源とした。
【００６５】
（２）酵素阻害実験
反応は９６ウェルＰＣＲプレート（パーキンエルマー社）上、反応用量２０μLで行ない、いずれの試料もアッセイバッファー（５０ｍＭ トリス緩衝液，１０％ グリセロール）に希釈して用いた。終濃度５ｍＭとなるＮＡＤＰＨ、５０ｍＭとなるグルコース６リン酸、１０ユニット／ｍＬとなるグルコース６リン酸デヒドロゲナーゼ（シグマ社）、２０ｍＭとなる塩化マグネシウムおよび１ウェルあたり蛋白量５μｇとなるミクロソーム画分をプレートに添加し、ジメチルスルフォキシドに溶解した被検化合物（ステレニンＡ 、ステレニンＢ 、ステレニンＣ及びステレニンＤ のいずれか１種類）、を含む溶液を終濃度０．１％となるよう加えて、室温で１５分間プレインキュベートした。プレインキュベーション終了後、終濃度５００ｎＭとなるコルチゾンを添加して反応を開始し、室温で６０分間反応を行った。プレートを９９℃で１０分間熱して反応を止め、生成したコルチゾール量をコルチゾールプロトタイプキット（ＣＩＳバイオインターナショナル社）を用い、添付文書に従ってＤｉｓｃｏｖｅｒｙ(パッカード社)にて測定した。同様に処理したコントロール細胞由来のミクロソーム画分では見られない、１１β−ＨＳＤ１発現細胞依存的なコルチゾール生成に対し、ステレニンＡは１０μＭで８６％の阻害を、ステレニンＢは１０μＭで６１％の阻害を、ステレニンＣは１０μＭで９３％の阻害を、ステレニンＤは１０μＭで８３％の阻害を各々示した。
【産業上の利用可能性】
【００６６】
本発明により、１１β−ＨＳＤ１阻害活性を有する化合物、ステレニンＡ、ステレニンＢ、ステレニンＣ及びステレニンＤが提供された。さらに、本発明により、該化合物を製造する微生物、及び該微生物を用いた該化合物の製造方法が提供された。本発明の化合物は、糖尿病、肥満、高脂血症、高血圧症からなる群から選択される少なくとも一つの疾患及び／又はこれらの病態を複合的に発症したメタボリックシンドロームの予防および／又は治療に有用である。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記、一般式 (Ｉ)：
【化１】
［式中、Ｒは
−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ
−ＣＨ（ＣＯ２Ｈ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈ
−Ｈ、または、
−ＣＨ２ＣＯＯＨ］で表わされる化合物またはその塩。
【請求項２】
下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２３Ｈ２５ＮＯ７
４）分子量：４２７（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｎａ]＋は次に示す通りである。
実測値：４５０．１５２６
計算値：４５０．１５２９
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１２ｎｍ（ε５８６００）, ２６５ｎｍ（ε２４４００）, ２９７ｎｍ（ε１０９００）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３３５７，３２３１，２９７３，２９３１，１６６２，１６２３，１６０２，１４５６，１３７６，１３１１，１２５５，１１９９，１１６４，１０８４，１０６４，１０３５，９９０ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５０（３Ｈ，ｓ），１．５６（３Ｈ，ｓ），２．６０（３Ｈ，ｓ），３．３７（２Ｈ，ｍ），３．７５（２Ｈ，ｔ，J＝５．１Ｈｚ），３．８３（２Ｈ，ｔ，J＝５．１Ｈｚ），４．５８（２Ｈ，ｓ），５．０３（１Ｈ，ｍ），６．２３（１Ｈ，ｂｒ, s），６．３１（１Ｈ，ｂｒ, s），７．０８（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．７（ｔ），２５．９（ｑ），４６．５（ｔ），５０．９（ｔ），６１．３（ｔ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．１(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．１（ｓ），１２７．２（ｓ），１３２．７（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．３（ｓ），１５２．２（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７０．７（ｓ），１７１．８（ｓ）ｐｐｍ。
【請求項３】
下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２６Ｈ２７ＮＯ１０
４）分子量：５１３（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｈ]＋は次に示す通りである。
実測値：５１４．１６９７
計算値：５１４．１７１３
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１４ｎｍ（ε５８１００）, ２６５ｎｍ（ε２６５００）, ２９６ｎｍ（ε１１１００）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３３４８，３２６４，２９７３，２９２８，２８５８，１７１８，１６６２，１６２４，１６０３，１４５０，１４１３，１３７７，１３１０，１２５４，１１９８，１１６２，１０８７，１０６３，１０３５，９９１ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５２（３Ｈ，ｓ），１．５７（３Ｈ，ｓ），２．２５（１Ｈ，ｍ），２．４０（２Ｈ，ｍ），２．４９（１Ｈ，ｍ），２．６０（３Ｈ，ｓ），３．３９（２Ｈ，ｍ），４．４６（１Ｈ，ｄ，J＝１６．９Ｈｚ），４．５８（１Ｈ，ｄ，J＝１６．９Ｈｚ），４．９９（１Ｈ，ｍ），５．０４（１Ｈ，ｍ），６．２４（１Ｈ，ｂｒ, s），６．３１（１Ｈ，ｂｒ, s），７．０９（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．８（ｔ），２５．９（ｑ），２６．３（ｔ），３１．９（ｔ），４６．９（ｔ），５５．５（ｄ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．４(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．３（ｓ），１２７．５（ｓ），１３２．０（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．４（ｓ），１５２．４（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７１．３（ｓ），１７１．８（ｓ），１７３．９（ｓ），１７６．３（ｓ）ｐｐｍ。
【請求項４】
下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２１Ｈ２１ＮＯ６
４）分子量：３８３（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｎａ]＋は次に示す通りである。
実測値：４０６．１２７３
計算値：４０６．１２６７
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１３ｎｍ（ε６６７００）, ２６８ｎｍ（ε２３０００）, ２９７ｎｍ（ε１２０００）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３４０９，３２６７，２９７４，２９３１，１６６９，１６５３，１６２３，１５９９，１５０４，１４４６，１４１３，１３７４，１３４９，１３１３，１２５５，１１９３，１１７３，１１６１，１１００，１０６３，１０３８，９９８，９８９ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５０（３Ｈ，ｓ），１．５７（３Ｈ，ｓ），２．６０（３Ｈ，ｓ），３．３８（２Ｈ，ｍ），４．４０（２Ｈ，ｓ），５．０３（１Ｈ，ｍ），６．２２（１Ｈ，ｂｒ，ｓ），６．３０（１Ｈ，ｂｒ，ｓ），７．０８（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．７（ｔ），２５．９（ｑ），４５．０（ｔ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．２(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．３（ｓ），１２９．３（ｓ），１３２．５（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．４（ｓ），１５２．６（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７１．８（ｓ），１７３．４（ｓ）ｐｐｍ。
【請求項５】
下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２３Ｈ２３ＮＯ８
４）分子量：４４１（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｈ]＋は次に示す通りである。
実測値：４４２．１４９５
計算値：４４２．１５０２
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１３ｎｍ（ε９６２００）, ２６５ｎｍ（ε４１３００）, ２９７ｎｍ（ε１７５００）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３３６６，３２４５，２９７３，２９２９，２７３３，１６６２，１６２４，１６０１，１４５８，１４４８，１４０１，１３７７，１３１１，１２５４，１２０１，１１６５，１１０３，１０８１，１０３５，９９５，９４６ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５０（３Ｈ，ｓ），１．５７（３Ｈ，ｓ），２．６１（３Ｈ，ｓ），３．３９（２Ｈ，ｍ），４．３８（２Ｈ，ｓ），４．５４（２Ｈ，ｓ），５．０４（１Ｈ，ｍ），６．２３（１Ｈ，ｂｒ，ｓ），６．３０（１Ｈ，ｂｒ，ｓ），７．０８（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．８（ｔ），２５．９（ｑ），４５．１（ｔ），５０．３（ｔ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．４(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．３（ｓ），１２７．５（ｓ），１３２．１（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．４（ｓ），１５２．４（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７０．８（ｓ），１７１．８（ｓ），１７２．８ｐｐｍ。
【請求項６】
ステレウム（Ｓｔｅｒｅｕｍ）属に属する、請求項１乃至５のいずれか１項に記載の化合物の生産菌を培養し、その培養物より請求項１乃至５のいずれか１項に記載の化合物を採取することを特徴とする、請求項１乃至５のいずれか１項に記載の化合物の製造方法。
【請求項７】
ステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１２０５株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６５）または、ステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１１０５株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６４）を培養し、その培養物より請求項１乃至５のいずれか１項に記載の化合物を採取することを特徴とする、請求項１乃至５のいずれか１項に記載の化合物の製造方法。
【請求項８】
ステレウム（Ｓｔｅｒｅｕｍ）属に属し、請求項１乃至５のいずれか１項に記載の化合物を生産することを特徴とする微生物。
【請求項９】
ステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１２０５株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６５）。
【請求項１０】
ステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１１０５株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６４）。
【請求項１１】
請求項１乃至５のいずれか１項に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬組成物。
【請求項１２】
糖尿病、肥満、高脂血症、高血圧症及びメタボリックシンドロームからなる群から選択される少なくとも一つの疾患の治療及び／又は予防薬である、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
請求項１乃至５のいずれか１項に記載の化合物もしくはその塩を含有してなる１１β−ｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ ｔｙｐｅ１（１１β−ＨＳＤ１）阻害剤。
【請求項１】
下記、一般式 (Ｉ)：
【化１】
［式中、Ｒは
−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ
−ＣＨ（ＣＯ２Ｈ）ＣＨ２ＣＨ２ＣＯ２Ｈ
−Ｈ、または、
−ＣＨ２ＣＯＯＨ］で表わされる化合物またはその塩。
【請求項２】
下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２３Ｈ２５ＮＯ７
４）分子量：４２７（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｎａ]＋は次に示す通りである。
実測値：４５０．１５２６
計算値：４５０．１５２９
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１２ｎｍ（ε５８６００）, ２６５ｎｍ（ε２４４００）, ２９７ｎｍ（ε１０９００）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３３５７，３２３１，２９７３，２９３１，１６６２，１６２３，１６０２，１４５６，１３７６，１３１１，１２５５，１１９９，１１６４，１０８４，１０６４，１０３５，９９０ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５０（３Ｈ，ｓ），１．５６（３Ｈ，ｓ），２．６０（３Ｈ，ｓ），３．３７（２Ｈ，ｍ），３．７５（２Ｈ，ｔ，J＝５．１Ｈｚ），３．８３（２Ｈ，ｔ，J＝５．１Ｈｚ），４．５８（２Ｈ，ｓ），５．０３（１Ｈ，ｍ），６．２３（１Ｈ，ｂｒ, s），６．３１（１Ｈ，ｂｒ, s），７．０８（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．７（ｔ），２５．９（ｑ），４６．５（ｔ），５０．９（ｔ），６１．３（ｔ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．１(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．１（ｓ），１２７．２（ｓ），１３２．７（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．３（ｓ），１５２．２（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７０．７（ｓ），１７１．８（ｓ）ｐｐｍ。
【請求項３】
下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２６Ｈ２７ＮＯ１０
４）分子量：５１３（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｈ]＋は次に示す通りである。
実測値：５１４．１６９７
計算値：５１４．１７１３
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１４ｎｍ（ε５８１００）, ２６５ｎｍ（ε２６５００）, ２９６ｎｍ（ε１１１００）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３３４８，３２６４，２９７３，２９２８，２８５８，１７１８，１６６２，１６２４，１６０３，１４５０，１４１３，１３７７，１３１０，１２５４，１１９８，１１６２，１０８７，１０６３，１０３５，９９１ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５２（３Ｈ，ｓ），１．５７（３Ｈ，ｓ），２．２５（１Ｈ，ｍ），２．４０（２Ｈ，ｍ），２．４９（１Ｈ，ｍ），２．６０（３Ｈ，ｓ），３．３９（２Ｈ，ｍ），４．４６（１Ｈ，ｄ，J＝１６．９Ｈｚ），４．５８（１Ｈ，ｄ，J＝１６．９Ｈｚ），４．９９（１Ｈ，ｍ），５．０４（１Ｈ，ｍ），６．２４（１Ｈ，ｂｒ, s），６．３１（１Ｈ，ｂｒ, s），７．０９（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．８（ｔ），２５．９（ｑ），２６．３（ｔ），３１．９（ｔ），４６．９（ｔ），５５．５（ｄ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．４(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．３（ｓ），１２７．５（ｓ），１３２．０（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．４（ｓ），１５２．４（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７１．３（ｓ），１７１．８（ｓ），１７３．９（ｓ），１７６．３（ｓ）ｐｐｍ。
【請求項４】
下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２１Ｈ２１ＮＯ６
４）分子量：３８３（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｎａ]＋は次に示す通りである。
実測値：４０６．１２７３
計算値：４０６．１２６７
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１３ｎｍ（ε６６７００）, ２６８ｎｍ（ε２３０００）, ２９７ｎｍ（ε１２０００）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３４０９，３２６７，２９７４，２９３１，１６６９，１６５３，１６２３，１５９９，１５０４，１４４６，１４１３，１３７４，１３４９，１３１３，１２５５，１１９３，１１７３，１１６１，１１００，１０６３，１０３８，９９８，９８９ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５０（３Ｈ，ｓ），１．５７（３Ｈ，ｓ），２．６０（３Ｈ，ｓ），３．３８（２Ｈ，ｍ），４．４０（２Ｈ，ｓ），５．０３（１Ｈ，ｍ），６．２２（１Ｈ，ｂｒ，ｓ），６．３０（１Ｈ，ｂｒ，ｓ），７．０８（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．７（ｔ），２５．９（ｑ），４５．０（ｔ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．２(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．３（ｓ），１２９．３（ｓ），１３２．５（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．４（ｓ），１５２．６（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７１．８（ｓ），１７３．４（ｓ）ｐｐｍ。
【請求項５】
下記の物理化学的性状を有する化合物又はその塩
１）物質の性状：無色酸性脂溶性物質
２）溶解性：メタノール、ジメチルスルホキシド、酢酸エチルに可溶
３）分子式：Ｃ２３Ｈ２３ＮＯ８
４）分子量：４４１（ＴＯＦマススペクトル法により測定）
５）高分解能ＴＯＦマススペクトル法により測定した精密質量、[Ｍ＋Ｈ]＋は次に示す通りである。
実測値：４４２．１４９５
計算値：４４２．１５０２
６）紫外部吸収スペクトル：
メタノール中で測定した紫外部吸収スペクトルは、次に示す極大吸収を示す：
２１３ｎｍ（ε９６２００）, ２６５ｎｍ（ε４１３００）, ２９７ｎｍ（ε１７５００）
７）赤外吸収スペクトル：
ＫＢｒ ｐｅｌｌｅｔ法で測定した赤外吸収スペクトルは以下に示す極大吸収を示す。
３３６６，３２４５，２９７３，２９２９，２７３３，１６６２，１６２４，１６０１，１４５８，１４４８，１４０１，１３７７，１３１１，１２５４，１２０１，１１６５，１１０３，１０８１，１０３５，９９５，９４６ｃｍ−１
８）１Ｈ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、その残存プロトンシグナル（３．３１ｐｐｍ）を内部標準として測定した１Ｈ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１．５０（３Ｈ，ｓ），１．５７（３Ｈ，ｓ），２．６１（３Ｈ，ｓ），３．３９（２Ｈ，ｍ），４．３８（２Ｈ，ｓ），４．５４（２Ｈ，ｓ），５．０４（１Ｈ，ｍ），６．２３（１Ｈ，ｂｒ，ｓ），６．３０（１Ｈ，ｂｒ，ｓ），７．０８（１Ｈ，ｓ）ｐｐｍ
９）１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトル：
重メタノール中、重メタノール（４９．１５ｐｐｍ）を内部標準として測定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクトルは、以下に示すとおりである。
１７．９（ｑ），２４．７（ｑ），２４．８（ｔ），２５．９（ｑ），４５．１（ｔ），５０．３（ｔ），１０２．０（ｄ），１０５．３（ｓ），１１０．４(ｄ)，１１３．１（ｄ），１２２．７（ｄ），１２７．３（ｓ），１２７．５（ｓ），１３２．１（ｓ），１３３．３（ｓ），１４５．１（ｓ），１５１．４（ｓ），１５２．４（ｓ），１６４．９（ｓ），１６７．１（ｓ），１７０．８（ｓ），１７１．８（ｓ），１７２．８ｐｐｍ。
【請求項６】
ステレウム（Ｓｔｅｒｅｕｍ）属に属する、請求項１乃至５のいずれか１項に記載の化合物の生産菌を培養し、その培養物より請求項１乃至５のいずれか１項に記載の化合物を採取することを特徴とする、請求項１乃至５のいずれか１項に記載の化合物の製造方法。
【請求項７】
ステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１２０５株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６５）または、ステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１１０５株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６４）を培養し、その培養物より請求項１乃至５のいずれか１項に記載の化合物を採取することを特徴とする、請求項１乃至５のいずれか１項に記載の化合物の製造方法。
【請求項８】
ステレウム（Ｓｔｅｒｅｕｍ）属に属し、請求項１乃至５のいずれか１項に記載の化合物を生産することを特徴とする微生物。
【請求項９】
ステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１２０５株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６５）。
【請求項１０】
ステレウム エスピー（Ｓｔｅｒｅｕｍ ｓｐ．）ＳＡＮＫ２１１０５株（ＦＥＲＭ ＢＰ−１０４６４）。
【請求項１１】
請求項１乃至５のいずれか１項に記載の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬組成物。
【請求項１２】
糖尿病、肥満、高脂血症、高血圧症及びメタボリックシンドロームからなる群から選択される少なくとも一つの疾患の治療及び／又は予防薬である、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
請求項１乃至５のいずれか１項に記載の化合物もしくはその塩を含有してなる１１β−ｈｙｄｒｏｘｙｓｔｅｒｏｉｄ ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ ｔｙｐｅ１（１１β−ＨＳＤ１）阻害剤。
【公開番号】特開２００７−２９１０７５（Ｐ２００７−２９１０７５Ａ）
【公開日】平成１９年１１月８日（２００７．１１．８）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００７−６９１０４（Ｐ２００７−６９１０４）
【出願日】平成１９年３月１６日（２００７．３．１６）
【出願人】（０００００１８５６）三共株式会社 (98)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成１９年１１月８日（２００７．１１．８）
【国際特許分類】
【出願日】平成１９年３月１６日（２００７．３．１６）
【出願人】（０００００１８５６）三共株式会社 (98)
【Ｆターム（参考）】
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