【課題】抗原結合分子の薬物動態を向上する方法、抗原結合分子の抗原への結合回数を増やす方法、薬物動態が向上した抗原結合分子、抗原結合分子の抗原への結合回数が向上した抗原結合分子、および、それらの製造法等の提供。
【解決手段】抗原に対するｐＨ５．８でのＫＤとｐＨ７．４でのＫＤの比であるＫＤ（ｐＨ５．８）／ＫＤ（ｐＨ７．４）の値が２以上である抗原結合分子。抗原結合分子のｐＨ５．８における抗原結合活性をｐＨ７．４における抗原結合活性より弱くすることにより抗原結合分子の薬物動態を向上させる方法。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の工程；
(a) pH6.7〜pH10.0における抗体の抗原結合活性を得る工程、
(b) pH4.0〜pH6.5における抗体の抗原結合活性を得る工程、
(c) pH6.7〜pH10.0での抗原結合活性がpH4.0〜pH6.5での抗原結合活性より高い抗体を選択する工程、
(d) (c)で選択された抗体をコードする遺伝子を得る工程、
(e) (d)で得られた遺伝子を用いて抗体を製造する工程、
を含む、以下のいずれか；
(i) 血漿中滞留性が優れた抗体、
(ii) FcRnを発現する細胞を含む動物での測定で抗原に2回以上結合することができる抗体、
(iii) FcRnを発現する細胞を含む動物での測定で結合可能な抗原の数が抗原結合部位より多い抗体、
(iv) 細胞外で結合した抗原を細胞内で解離する抗体、
(v) 抗原と結合した状態で細胞内に取り込まれ、抗原と結合していない状態で細胞外に放出される抗体、または、
(vi) 血漿中抗原消失能が増加した抗体、
を含む医薬品の製造方法。
【請求項２】
以下の工程；
(a) pH6.7〜pH10.0の条件下で抗体を抗原に結合させる工程、
(b) (a)の抗原に結合した抗体をpH4.0〜pH6.5の条件下に置く工程、
(c) pH4.0〜pH6.5の条件下で解離した抗体を取得する工程、
(d) (c)で取得された抗体をコードする遺伝子を得る工程、
(e) (d)で得られた遺伝子を用いて抗体を製造する工程、
を含む、以下のいずれか；
(i) 血漿中滞留性が優れた抗体、
(ii) FcRnを発現する細胞を含む動物での測定で抗原に2回以上結合することができる抗体、
(iii) FcRnを発現する細胞を含む動物での測定で結合可能な抗原の数が抗原結合部位より多い抗体、
(iv) 細胞外で結合した抗原を細胞内で解離する抗体、
(v) 抗原と結合した状態で細胞内に取り込まれ、抗原と結合していない状態で細胞外に放出される抗体、または、
(vi) 血漿中抗原消失能が増加した抗体、
を含む医薬品の製造方法。
【請求項３】
以下の工程；
(a) 抗原を固定したカラムに第一のpH条件下で抗体を結合させる工程、
(b) 第一のpH条件下でカラムに結合した抗体を、第二のpH条件下でカラムから溶出する工程、
(c) 溶出された抗体を取得する工程、
(d) (c)で取得された抗体をコードする遺伝子を得る工程、
(e) (d)で得られた遺伝子を用いて抗体を製造する工程、
を含む製造方法であって、以下のいずれか；
(i) 血漿中滞留性が優れた抗体、
(ii) FcRnを発現する細胞を含む動物での測定で抗原に2回以上結合することができる抗体、
(iii) FcRnを発現する細胞を含む動物での測定で結合可能な抗原の数が抗原結合部位より多い抗体、
(iv) 細胞外で結合した抗原を細胞内で解離する抗体、
(v) 抗原と結合した状態で細胞内に取り込まれ、抗原と結合していない状態で細胞外に放出される抗体、または、
(vi) 血漿中抗原消失能が増加した抗体、
であって、第一のpHがpH6.7.〜pH10.0、第二のpHが4.0〜pH6.5である、第一のpHでの抗原への結合活性が第二のpHでの抗原への結合活性よりも高い抗体を含む医薬品の製造方法。
【請求項４】
以下の工程；
(a) 抗体ライブラリーを、抗原を固定したカラムに第一のpH条件下で結合させる工程、
(b) カラムから第二のpH条件下で抗体を溶出する工程、
(c) 溶出された抗体をコードする遺伝子を増幅する工程、
(d) 溶出された抗体を取得する工程、
(e) (d)で取得された抗体をコードする遺伝子を得る工程、
(f) (e)で得られた遺伝子を用いて抗体を製造する工程。
を含む製造方法であって、以下のいずれか；
(i) 血漿中滞留性が優れた抗体、
(ii) FcRnを発現する細胞を含む動物での測定で抗原に2回以上結合することができる抗体、
(iii) FcRnを発現する細胞を含む動物での測定で結合可能な抗原の数が抗原結合部位より多い抗体、
(iv) 細胞外で結合した抗原を細胞内で解離する抗体、
(v) 抗原と結合した状態で細胞内に取り込まれ、抗原と結合していない状態で細胞外に放出される抗体、または、
(vi) 血漿中抗原消失能が増加した抗体、
であって、第一のpHがpH6.7.〜pH10.0、第二のpHが4.0〜pH6.5である、第一のpHでの結合活性が第二のpHでの結合活性よりも高い抗体を含む医薬品の製造方法。
【請求項５】
抗体中の少なくとも1つ以上のアミノ酸をヒスチジンで置換する又は少なくとも1つのヒスチジンを挿入する工程をさらに含む請求項1〜4いずれかに記載の製造方法。

【図１】

【図２】

【図３】

【図４】

【図５】

【図６】

【図７】

【図８】

【図９】

【図１０】

【図１１】

【図１２】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【図２６】

【図２７】

【図２８】

【図２９】

【公開番号】特開２０１２−２２４６３３（Ｐ２０１２−２２４６３３Ａ）
【公開日】平成２４年１１月１５日（２０１２．１１．１５）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１２−１６０６９２（Ｐ２０１２−１６０６９２）
【出願日】平成２４年７月１９日（２０１２．７．１９）
【分割の表示】特願２０１１−２６８４９７（Ｐ２０１１−２６８４９７）の分割
【原出願日】平成２１年４月１０日（２００９．４．１０）
【出願人】（０００００３３１１）中外製薬株式会社 (228)
【Ｆターム（参考）】