本発明は、候補化合物を視床下部プロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）由来生物活性ペプチドの分泌の調節因子としてスクリーニングするためにＧＰＲ１０１ Ｇタンパク質結合受容体（ＧＰＣＲ）を使用する方法に関する。ＧＰＲ１０１受容体の調節因子は、視床下部ＰＯＭＣ由来生物活性ペプチドの分泌を調節し、およびＰＯＭＣ由来生物活性ペプチド関連疾患の治療において有用である。ＰＯＭＣ由来生物活性ペプチドとしては、α−メラニン細胞刺激ホルモン（α−ＭＳＨ）、β−メラニン細胞刺激ホルモン（β−ＭＳＨ）およびγ−メラニン細胞刺激ホルモン（γ−ＭＳＨ）が挙げられるが、これらに限定されない。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
候補化合物を視床下部プロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）由来生物活性ペプチドの分泌の調節因子として同定する方法であって、該方法は、
（ａ）ＧＰＣＲを含む組換え宿主細胞またはその膜と該候補化合物を接触させる工程であって、ここで、該受容体は、
（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列；
（ｉｉ）特異的プライマー配列番号７および配列番号８を使用してヒトＤＮＡサンプルに対するポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）により増幅することができるポリヌクレオチドによってコードされているＧタンパク質結合受容体のアミノ酸配列；
（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列；
（ｉｖ）配列番号６のアミノ酸配列；
（ｖ）配列番号１、配列番号３または配列番号５の相補体にストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによってコードされているＧタンパク質結合受容体のアミノ酸配列；
（ｖｉ）配列番号２、配列番号４または配列番号６に対して少なくとも約７０％の同一性を有するアミノ酸配列を有するＧタンパク質結合受容体のアミノ酸配列；
（ｖｉｉ）配列番号２、配列番号４または配列番号６のアミノ酸配列の変異体を有するＧタンパク質結合受容体のアミノ酸配列；および
（ｖｉｉｉ）（ｉ）から（ｖｉｉ）のうちのいずれか１つの生物活性フラグメント
からなる群より選択されるアミノ酸配列を含み、かつ該受容体は、Ｇタンパク質に結合する、工程、および
（ｂ）該ＧＰＣＲの機能性を阻害または刺激する該化合物の能力を決定する工程
を含み、ここで、
該ＧＰＣＲの機能性を阻害または刺激する該化合物の能力が、その化合物が視床下部プロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）由来生物活性ペプチドの分泌の調節因子であることを示す
、
方法。
【請求項２】
前記ＧＰＣＲが、配列番号２のアミノ酸配列、または配列番号２に対して少なくとも約７０％の同一性を有するアミノ酸配列を有するＧタンパク質結合受容体のアミノ酸配列を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ＧＰＣＲの機能性を刺激する前記化合物の能力が、該化合物が視床下部プロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）由来生物活性ペプチドの分泌を刺激する化合物であることを示す、請求項１または請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記ＰＯＭＣ由来生物活性ペプチドが、ＡＣＴＨ、β−エンドルフィン、α−ＭＳＨ、β−ＭＳＨおよびγ−ＭＳＨからなる群より選択される、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
前記ＧＰＣＲのアゴニストを同定する工程を含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
前記ＧＰＣＲの部分アゴニストを同定する工程を含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記候補化合物が、肥満またはそれに関連した状態を治療または予防するための医薬としてスクリーニングされる、請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記肥満に関連した状態が、高血圧、インスリン抵抗性、メタボリック症候群、２型糖尿病、異脂肪血症、アテローム性硬化症、冠性心疾患および卒中からなる群より選択される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記候補化合物が、満腹を促進するための医薬としてスクリーニングされる、請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記候補化合物が、過食症を治療または予防するための医薬としてスクリーニングされる、請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記候補化合物が、発熱を治療または予防するための医薬としてスクリーニングされる、請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記候補化合物が、炎症関連障害を治療または予防するための医薬としてスクリーニングされる、請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記ＧＰＣＲの逆アゴニストを同定する工程を含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記ＧＰＣＲのアンタゴニストを同定する工程を含む、請求項１から４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記候補化合物が、悪液質を治療または予防するための医薬としてスクリーニングされる、請求項１から４、１３および１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記悪液質が、ＡＩＤＳ関連体重減少、癌関連体重減少および食欲不振関連体重減少からなる群より選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記候補化合物が、体重、脂肪蓄積、体脂肪率および食事摂取量からなる群より選択されるエネルギー恒常性関連パラメータを調節するための医薬としてスクリーニングされる、請求項１から６、１３および１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
前記アゴニストまたは部分アゴニストを医薬として調合する工程をさらに含む、請求項５から１２および１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
前記逆アゴニストまたはアンタゴニストを医薬として調合する工程をさらに含む、請求項１３から１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２０】
前記決定する工程が、第二メッセンジャーのレベルの測定によるものである、請求項１から１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２１】
前記第二メッセンジャーが、ｃＡＭＰである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記決定する工程が、メラニン保有細胞アッセイの使用を含む方法によるものであるか、または前記ＧＰＣＲを含む膜へのＧＴＰγＳの結合の測定を含む方法によるものであるか、またはｃＡＭＰ応答性レポーターアッセイの使用を含む方法によるものである、請求項１から１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
請求項１から２２のいずれか一項に記載の方法に従って同定することができる調節因子。
【請求項２４】
脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体の調節因子と医薬的に許容される担体とを含む医薬組成物。
【請求項２５】
脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体の調節因子と医薬的に許容される担体を混合することを含む、医薬組成物の作製方法。
【請求項２６】
視床下部プロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）由来生物活性ペプチドの分泌を増加させる方法であって、該方法は、増加を必要とする脊椎動物に、該脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体のアゴニストもしくは部分アゴニストの治療有効量または該アゴニストもしくは部分アゴニストと医薬的に許容される担体とを含む医薬組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
【請求項２７】
肥満またはそれに関連した状態を治療または予防する方法であって、該方法は、治療または予防を必要とする脊椎動物に、該脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体のアゴニストもしくは部分アゴニストの治療有効量または該アゴニストもしくは部分アゴニストと医薬的に許容される担体とを含む医薬組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
【請求項２８】
前記肥満に関連した状態が、高血圧、インスリン抵抗性、メタボリック症候群、２型糖尿病、異脂肪血症、アテローム性硬化症、冠性心疾患および卒中からなる群より選択される、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
脊椎動物において満腹を促進する方法であって、該方法は、満腹を必要とする脊椎動物に、該脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体のアゴニストもしくは部分アゴニストの治療有効量または該アゴニストもしくは部分アゴニストと医薬的に許容される担体とを含む医薬組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
【請求項３０】
過食症を治療または予防する方法であって、該方法は、治療または予防を必要とする脊椎動物に、該脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体のアゴニストもしくは部分アゴニストの治療有効量または該アゴニストもしくは部分アゴニストと医薬的に許容される担体とを含む医薬組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
【請求項３１】
発熱を治療または予防する方法であって、該方法は、治療または予防を必要とする脊椎動物に、該脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体のアゴニストもしくは部分アゴニストの治療有効量または該アゴニストもしくは部分アゴニストと医薬的に許容される担体とを含む医薬組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
【請求項３２】
炎症関連障害を治療または予防する方法であって、該方法は、治療または予防を必要とする脊椎動物に、該脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体のアゴニストもしくは部分アゴニストの治療有効量または該アゴニストもしくは部分アゴニストと医薬的に許容される担体とを含む医薬組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
【請求項３３】
体重を減少させる、脂肪蓄積を減少させる、体脂肪率を減少させる、または食事摂取を減少させる方法であって、該方法は、減少を必要とする脊椎動物に、該脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体のアゴニストもしくは部分アゴニストの治療有効量または該アゴニストもしくは部分アゴニストと医薬的に許容される担体とを含む医薬組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
【請求項３４】
前記脊椎動物が、哺乳動物またはヒトである、請求項２６から３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
視床下部プロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）由来生物活性ペプチドの分泌を減少させる方法であって、該方法は、減少を必要とする脊椎動物に、該脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体の逆アゴニストもしくはアンタゴニストの治療有効量または該逆アゴニストもしくはアンタゴニストと医薬的に許容される担体とを含む医薬組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
【請求項３６】
悪液質を治療または予防する方法であって、該方法は、治療または予防を必要とする脊椎動物に、該脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体の逆アゴニストもしくはアンタゴニストの治療有効量または該逆アゴニストもしくはアンタゴニストと医薬的に許容される担体とを含む医薬組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
【請求項３７】
前記悪液質が、ＡＩＤＳ関連体重減少、癌関連体重減少および食欲不振関連体重減少からなる群より選択される、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
体重を増加させる、脂肪蓄積を増加させる、体脂肪率を増加させる、または食事摂取を増加させる方法であって、該方法は、増加を必要とする脊椎動物に、該脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体の逆アゴニストもしくはアンタゴニストの治療有効量または該逆アゴニストもしくはアンタゴニストと医薬的に許容される担体とを含む医薬組成物の治療有効量を投与することを含む、方法。
【請求項３９】
前記脊椎動物が、哺乳動物またはヒトである、請求項３５から３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
視床下部プロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）由来生物活性ペプチドの分泌を増加させるための薬物の製造における脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体のアゴニストまたは部分アゴニストの使用。
【請求項４１】
肥満またはそれに関連した状態を治療または予防するための薬物の製造における脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体のアゴニストまたは部分アゴニストの使用。
【請求項４２】
前記肥満に関連した状態が、高血圧、インスリン抵抗性、メタボリック症候群、２型糖尿病、異脂肪血症、アテローム性硬化症、冠性心疾患および卒中からなる群より選択される、請求項４１に記載の使用。
【請求項４３】
満腹を促進するための薬物の製造における脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体のアゴニストまたは部分アゴニストの使用。
【請求項４４】
過食症を治療または予防するための薬物の製造における脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体のアゴニストまたは部分アゴニストの使用。
【請求項４５】
発熱を治療または予防するための薬物の製造における脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体のアゴニストまたは部分アゴニストの使用。
【請求項４６】
炎症関連障害を治療または予防するための薬物の製造における脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体のアゴニストまたは部分アゴニストの使用。
【請求項４７】
体重を減少させるための、脂肪蓄積を減少させるための、体脂肪率を減少させるための、または食事摂取量を減少させるための薬物の製造における脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体のアゴニストまたは部分アゴニストの使用。
【請求項４８】
視床下部プロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）由来生物活性ペプチドの分泌を減少させるための薬物の製造における脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体の逆アゴニストまたはアンタゴニストの使用。
【請求項４９】
脊椎動物において悪液質を治療または予防するための薬物の製造における該脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体の逆アゴニストまたはアンタゴニストの使用。
【請求項５０】
前記悪液質が、ＡＩＤＳ関連体重減少、癌関連体重減少および食欲不振関連体重減少からなる群より選択される、請求項４９に記載の使用。
【請求項５１】
体重を増加させるための、脂肪蓄積を増加させるための、体脂肪率を増加させるための、または食事摂取量を増加させるための薬物の製造における脊椎動物ＧＰＲ１０１受容体の逆アゴニストまたはアンタゴニストの使用。
【請求項５２】
ＰＯＭＣ由来生物活性ペプチド関連疾患のための医薬として候補化合物をスクリーニングする方法であって、該方法は、
（ａ）ＧＰＣＲを含む組換え宿主細胞またはその膜と候補化合物を、該受容体と該候補化合物との相互作用を可能にする条件下で接触させる工程であって、該受容体は、
（ｉ）配列番号２のアミノ酸配列；
（ｉｉ）特異的プライマー配列番号７および配列番号８を使用してヒトＤＮＡサンプルに対するポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）により増幅することができるポリヌクレオチドによってコードされているＧタンパク質結合受容体のアミノ酸配列；
（ｉｉｉ）配列番号４のアミノ酸配列；
（ｉｖ）配列番号６のアミノ酸配列；
（ｖ）配列番号１、配列番号３または配列番号５の相補体にストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによってコードされているＧタンパク質結合受容体のアミノ酸配列；
（ｖｉ）配列番号２、配列番号４または配列番号６に対して少なくとも約７０％の同一性を有するアミノ酸配列を有するＧタンパク質結合受容体のアミノ酸配列；
（ｖｉｉ）配列番号２、配列番号４または配列番号６のアミノ酸配列の変異体を有するＧタンパク質結合受容体のアミノ酸配列；および
（ｖｉｉｉ）（ｉ）から（ｖｉｉ）のうちのいずれか１つの生物活性フラグメント
からなる群より選択されるアミノ酸を含む、工程、および
（ｂ）該ＧＰＣＲに結合するリガンドを検出する工程
を含む、
ＰＯＭＣ由来生物活性ペプチド関連疾患のための医薬として候補化合物をスクリーニングする方法。
【請求項５３】
前記ＧＰＣＲが、配列番号２、または配列番号２に対して少なくとも約７０％の同一性を有するアミノ酸配列を有するＧタンパク質結合受容体のアミノ酸配列を含む、請求項５２に記載の方法。
【請求項５４】
前記ＰＯＭＣ由来生物活性ペプチドが、ＡＣＴＨ、β−エンドルフィン、α−ＭＳＨ、β−ＭＳＨおよびγ−ＭＳＨからなる群より選択される、請求項５２または請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記スクリーニングが、肥満もしくはそれに関連した状態の危険があるか、または肥満もしくはそれに関連した状態に進行している脊椎動物を特定するための放射線イメージング剤についてのスクリーニングである、請求項５２から５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５６】
視床下部プロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）由来生物活性ペプチドの分泌の調節因子として、またはＰＯＭＣ由来生物活性ペプチド関連疾患のための医薬として候補化合物をスクリーニングするためのＧＰＣＲの使用であって、該ＧＰＣＲは、
（ａ）配列番号２のアミノ酸配列；
（ｂ）特異的プライマー配列番号７および配列番号８を使用してヒトＤＮＡサンプルに対するポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）により増幅することができるポリヌクレオチドによってコードされているＧタンパク質結合受容体のアミノ酸配列；
（ｃ）配列番号４のアミノ酸配列；
（ｄ）配列番号６のアミノ酸配列；
（ｅ）配列番号１、配列番号３または配列番号５の相補体にストリンジェントな条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによってコードされているＧタンパク質結合受容体のアミノ酸配列；
（ｆ）配列番号２、配列番号４または配列番号６に対して少なくとも約７０％の同一性を有するアミノ酸配列を有するＧタンパク質結合受容体のアミノ酸配列；
（ｇ）配列番号２、配列番号４または配列番号６のアミノ酸配列の変異体を有するＧタンパク質結合受容体のアミノ酸配列；
（ｈ）（ａ）から（ｇ）のうちのいずれか１つの生物活性フラグメント
からなる群より選択されるアミノ酸配列を含む、使用。
【請求項５７】
前記ＧＰＣＲが、配列番号２のアミノ酸配列、または配列番号２に対して少なくとも約７０％の同一性を有するアミノ酸配列を有するＧタンパク質結合受容体のアミノ酸配列を含む、請求項５６に記載の使用。
【請求項５８】
前記ＰＯＭＣ由来生物活性ペプチドが、ＡＣＴＨ、β−エンドルフィン、α−ＭＳＨ、β−ＭＳＨおよびγ−ＭＳＨからなる群より選択される、請求項５６または請求項５７に記載の使用。
【請求項５９】
前記スクリーニングが、前記ＧＰＣＲのアゴニストについてのスクリーニングである、請求項５６から５８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項６０】
前記スクリーニングが、前記ＧＰＣＲの部分アゴニストについてのスクリーニングである、請求項５６から５９のいずれか一項に記載の使用。
【請求項６１】
前記スクリーニングが、前記ＧＰＣＲの逆アゴニストについてのスクリーニングである、請求項５６から５８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項６２】
前記スクリーニングが、前記ＧＰＣＲのアンタゴニストについてのスクリーニングである、請求項５６から５８のいずれか一項に記載の使用。

【図１】

【図２】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図３Ｃ】

【図４Ａ】

【図４Ｂ】

【図５】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図８】

【公表番号】特表２００９−５３８６２３（Ｐ２００９−５３８６２３Ａ）
【公表日】平成２１年１１月１２日（２００９．１１．１２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５１３２５８（Ｐ２００９−５１３２５８）
【出願日】平成１９年５月３０日（２００７．５．３０）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０１２７５８
【国際公開番号】ＷＯ２００７／１４２９７９
【国際公開日】平成１９年１２月１３日（２００７．１２．１３）
【出願人】（５００４７８０９７）アリーナ　ファーマシューティカルズ，　インコーポレイテッド (97)
【Ｆターム（参考）】