レーザー誘起蛍光強度の減衰率比較によるアスベスト識別法
【解決課題】一般には困難と考えられる環境試料中の多様な物質からアスベストを簡便に識別する方法を提供する。
【解決手段】検査対象の検体試料にレーザー光を照射して物質から発生する任意波長のレーザー誘起蛍光の蛍光強度を計測し、所定経過時ごとの蛍光強度の減衰率を検出して、あらかじめ作成しておいた所定経過時ごとの基準アスベストの蛍光強度の減衰率とその場で比較し、検体試料がアスベストを含むか否かを識別する。
【解決手段】検査対象の検体試料にレーザー光を照射して物質から発生する任意波長のレーザー誘起蛍光の蛍光強度を計測し、所定経過時ごとの蛍光強度の減衰率を検出して、あらかじめ作成しておいた所定経過時ごとの基準アスベストの蛍光強度の減衰率とその場で比較し、検体試料がアスベストを含むか否かを識別する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アスベストの識別法に関し、特に大気中に浮遊するアスベストまたは建築材料中に含まれるアスベストの簡易識別法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来のアスベスト分析方法には、アスベスト粒子と他の物質粒子の屈折率の相違を利用する位相差顕微鏡による分散染色法、複屈折性をも確認できる手法を組み込んだ位相差顕微鏡による分散染色法（特許文献１）、アスベストの複屈折性を利用する偏光顕微鏡による消光角法、物質の結晶構造の相違を利用する基底標準吸収補正法等を利用したＸ線回折分析法、偏光顕微鏡による消光角法の改良型で暗視野落射照明を利用する偏光判定法（ＰＶＳ）（非特許文献１）、呈色試薬を用いる方法（特許文献２及び３）、蛍光色素を吸着させて染色させる方法（特許文献４）、アスベスト繊維粒子によるレーザー散乱光の偏光特性を利用する方法（特許文献５）、レーザーラマン分光を用いる分析法（非特許文献２）、バイオ技術を用いる方法（非特許文献３）などがある。これらのうち、位相差顕微鏡による分散染色法及び偏光顕微鏡による消光角法並びに基底標準吸収補正法等を利用したＸ線回折分析法は、建材、吹き付け材中のアスベスト含有量を計測する定性分析手法として２００６年のＪＩＳ Ａ １４８１に定められている手法である。また、大気汚染防止法で規制対象となる大気中の飛散アスベストの濃度測定法として、環境省 水・大気環境局大気環境課によるアスベストモニタリングマニュアル（第３版、平成１９年５月）では、光学顕微鏡法が標準とされており、結果を補足する手段として電子顕微鏡による観察、または分散染色法が参考法として定められている。
【０００３】
しかし、これらの方法は、欠点として煩雑な前処理や分析結果を得るまでに長い期間、日数を要すること、顕微鏡法では目視観察のため人為的測定誤差が大きいという測定精度の問題がある。
【０００４】
位相差顕微鏡による分散染色法は、粒子の屈折率の違いによって生じる色の相違を顕微鏡で観察してアスベストの識別を行うものである。建材を含む多くの材料からなる検体試料中にはアスベストの屈折率と同様の屈折率を有するタルク等の多くの鉱物材料が存在するため、目視による色の相違のみによる識別は熟練の専門家でも困難な作業となる。
【０００５】
偏光顕微鏡による消光角法では、顕微鏡操作の熟練と消光角による判定法に関する高度な鉱物の光学物性の専門知識が必要で、非専門家にはアスベストの同定が困難であり、識別には経験者でも長い分析時間を要する。ＪＩＳ Ａ １４８１には、位相差顕微鏡による分散染色法と偏光顕微鏡による消光角法とを併用することも参考として示されているが、これら二つの方法を両立できる専門家の数が極めて少ない。このため、これらの手法は現在標準的な計測技術であるが、結果としてアスベストの識別に煩雑な手間と長大な分析時間が必要となる。また、高精度の測定には高い専門知識及び技量が不可欠であることが、分析者による測定精度のばらつき（人為的な測定誤差）を大きくさせている原因となっている。
【０００６】
位相差顕微鏡による分散染色法及び偏光顕微鏡による消光角法の改良型である特許文献１に記載の方法や偏光判定法（ＰＶＳ）は、測定手法に関する改善は見られるものの、やはり同様の問題をかかえている。特に偏光判定法（ＰＶＳ）は、微細なアスベスト繊維粒子の識別が困難で、光学的倍率は位相差顕微鏡や偏光顕微鏡に及ばないとされている。
【０００７】
Ｘ線回折法によるアスベスト識別に関しては、分散染色法及び消光角法以上に高度な知識と経験が必要であることが指摘されている（非特許文献４）。
【０００８】
以上のように、顕微鏡観察、Ｘ線回折による従来方法で高精度な計測を行う際には、試料を準備し計測するまでに煩雑な手間や化学処理等が必要で、さらにアスベストの判定には高度な専門知識や熟達した技量が必要になる。アスベストをリアルタイムでその場で識別し計測することは困難で、結果を得るまでに長い時間と多くの労力が必要であり、測定精度は測定者の技量に依存するという問題点がある。
【０００９】
一方、呈色試薬による方法や蛍光色素を吸着させて染色させる手法、及びタンパク質を吸着させる手法等は、適用可能な建材材料等の範囲が不明な場合やクリソタイル以外には適用困難であるというような問題があるため、使用する際には対象範囲が限定されるという問題点がある。
【００１０】
また、レーザー散乱光の偏光特性を利用する方法やラマン分光を用いる分析法は、計測者の技量に関係なくアスベストをその場で計測することができる。しかし、前者は、繊維状粒子によるレーザー散乱光の偏光特性を利用することから、アスベスト以外の繊維粒子との識別が不十分であるという問題がある。また、後者は、ラマン散乱光が非常に微弱で小さいこと、また同様の波長域でラマン散乱光を発する建材、鉱物等が多数存在するためアスベストの識別が難しいという問題点がある。
【００１１】
これら従来技術を単独で用いる場合は、上記のような技術的問題点がありアスベストの識別を困難にしている。高精度で分析する場合には、高度な専門知識、経験、技量も要求され、上記の従来技術を単独ではなく複数併用しなくてはならない。結果として、従来技術で用いられている方法では、アスベスト繊維粒子のその場で迅速に識別計測することはできず、計測精度のばらつき、長い分析時間、及び煩雑な手間が不可欠という問題がある。
【００１２】
現在のアスベスト計測技術ではアスベストの厳密な判定が困難であるため、その場での迅速なリアルタイム計測が不可能である。よって、アスベストを含む建材を使用した老朽化した建物の解体工事現場などで建材中のアスベストの分析及び飛散するアスベストの環境調査のために長い日数と煩雑な作業を要している。
【００１３】
また、これまで計測対象は、クリソタイル、クロシドライト及びアモサイトの３種類であったが、アスベストの健康被害対策のため、厚生労働省通達（基安化発０２０６００３号、平成２０年２月６日付）によりクロシドライトと同じ各閃石族のアンソフィライト、トレモライトやアクチノライトの３種類のアスベストの分析も義務付けられることになった。しかしながら、現在、主流となっている分散染色法による位相差顕微鏡によるアスベスト計測法では、このような計測数の増加に対してある程度の計測精度を維持したまま対処することは大幅な作業時間の増加を招く。
【００１４】
一方、アスベスト計測に適用されてはいないが、蛍光寿命により物質の発光機構と化学種の関係等を分析する手法として時間分解蛍光分光（測光）法がある（非特許文献５）。この方法では、蛍光スペクトルを時間分解してスペクトルの変化や蛍光寿命を計測して２成分系試料の定量分析、物質の同定や分子の動的構造解析等を行う（特許文献６、７及び８）。また、代表的なものとしてバイオ分野で細胞内の微小環境評価、色素、抗体、アミノ酸の検出等に蛍光寿命顕微鏡が用いられている（特許文献９及び１０、非特許文献６）。蛍光寿命は、蛍光強度と違って物質の濃度により影響を受けないため、バイオ、化学分析分野では、主に蛍光色素、特定物質等の画像検出または挙動解析に用いられている。蛍光寿命を検出するため、寿命計測装置や寿命解析装置が開発されてきた（特許文献１１及び１２）。しかしながら、蛍光寿命による物質同定または識別法は、これまで細胞内や化学溶液内等の非常に限られた条件下で使用されており、アスベストのような無機物質または有機物質など多様な物質が混在する試料を分析する環境分析の分野では一般に使用されていない。その理由として、同様の蛍光寿命を有する物質が多数混在していること、それら多様かつ多数の蛍光寿命の解析に膨大な分析時間と手間が必要になることが挙げられる。また、それら多様な試料には蛍光強度に大きな差があるため、微量かつ微弱な蛍光強度を有する物質の同定は実質的に不可能である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】特開２００５−３３８５６７号公報
【特許文献２】特開２０００−８８８３８号公報
【特許文献３】特開平９−１０５７４３号公報
【特許文献４】特表２００４−５１９４４５号公報
【特許文献５】特開平１０−２６７８２８号公報
【特許文献６】特許第３３１８０１９号公報
【特許文献７】特開２００４−２９４１０５号公報
【特許文献８】特表２００３−５２２９４６号公報
【特許文献９】特開２００２−２８６６３９号公報
【特許文献１０】特開平９−４３１４６号公報
【特許文献１１】特表２００６−５１９３９５号公報
【特許文献１２】特開平８−３３４４６４号公報
【非特許文献】
【００１６】
【非特許文献１】亀和田俊一、和田哲、石井啓慈、南和明、許成基、境谷浩一、亀元宏宣、西田道夫、「建材中アスベストの偏光判定装置（ＰＶＳ）とこれを用いた現場判定法」、産業と環境、ｖｏｌ．３５，Ｎｏ．３，２００６
【非特許文献２】立石和男、古谷圭一、菊池正、石田英之、石谷炯、「ラマンマイクロプローブによる環境中のアスベストの分析」、ＢＵＮＳＥＫＩ ＫＡＧＡＫＵ、ｖｏｌ．３０、ｐｐ．７７４−７７９，１９８１
【非特許文献３】黒田章夫、野村和孝、西村智基、「アスベスト結合タンパク質を利用したアスベスト簡易検出」、オーム、１２月号、ｐｐ．４−５，２００６
【非特許文献４】佐々木一弘、中倉隆雄、藤巻宏和、「位相差顕微鏡を用いた分散染色法によるアスベスト同定の問題点」、ぶんせき、４、ｐｐ．１７７−１８４，２００７
【非特許文献５】南茂夫、合志陽一編集、「分光技術ハンドブック」、ｐｐ．５３３−５３５，１９９０
【非特許文献６】Bernard Valeur, “Molecular Fluorescence: Principal and Applications”, Weinheim: Wiley-VCH, 2002
【非特許文献７】諫早典夫、中江茂、平沢紘介編集：「空気清浄のための浮遊微粒子の計測・制御総合技術」、Ｒ＆Ｄプラニング、１９８７年発行
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
したがって、本発明は、従来法の欠点を解消し、一般には困難と考えられる環境試料中の多様な物質からレーザー誘起蛍光の蛍光強度の減衰率を用いてアスベストを簡便に識別する方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明によれば、アスベストを識別する指標として物質固有のレーザー誘起蛍光の蛍光寿命を用いることにより、従来技術でのアスベスト判定の困難さ、計測に係る煩雑な処理または手間、及び測定精度等の問題点を解消する。
【００１９】
具体的には、検査対象の検体試料にレーザー光を照射して物質から発生する任意波長のレーザー誘起蛍光の蛍光強度を計測し、所定経過時ごとの蛍光強度の減衰率を検出して、あらかじめ作成しておいた所定経過時ごとの基準アスベストの蛍光強度の減衰率とその場で比較し、検体試料がアスベストを含むか否かを識別する。本発明において、「蛍光強度の減衰率」とは、レーザー照射直後の任意の時間（基準時）に検出した蛍光強度の値を基準蛍光強度（例えば１）とし、当該基準時から所定経過時において計測されるレーザー誘起蛍光の基準蛍光強度に対する減衰比から求められるものである。
【００２０】
一般に物質にレーザー光が照射されると、その物質表面から物質の組成に依存する物質特有のレーザー誘起蛍光が発生する。その蛍光の発生波長域は、照射するレーザー光の波長域よりも広く、数ナノメートルから数百ナノメートルに及ぶことがある。蛍光スペクトルの発生特性は、同じ物質でも照射するレーザーの波長によっても異なる。同一波長のレーザー光で様々な物質を照射すると、蛍光強度、ピークを示す波長、蛍光スペクトル形状、及びその蛍光寿命は物質によって種々異なる。蛍光寿命は、全ての波長域にわたって均一な場合もあれば、観測する波長域によって変化する場合もあり、物質によって様々である。この蛍光寿命の特性を利用して、予め任意の波長域でのアスベストの蛍光寿命特性を調査してレーザー照射直後からの蛍光強度の減衰率の値を把握しておき、それを基準として同条件での物質からの減衰率と比較することでアスベストの識別が可能となる。
【００２１】
本発明においては、蛍光寿命に従って減衰する蛍光強度を連続的に計測して蛍光寿命を直接求めるのではなく、基準とする経過時間帯での蛍光強度に基づいて複数の所定経過時における蛍光強度を計測して減衰率を求める。アスベストの識別は、ある任意波長域における物質の所定経過時における蛍光強度の減衰率を計測して、予め同条件で計測しておいた同波長域でのアスベストの減衰率（以後「基準アスベスト減衰率」という）と比較することによって行う。さらに、所定経過時における蛍光強度の減衰率が、計測誤差を考慮した場合に基準アスベスト減衰率と非常に近似した値を示す場合には、計測した任意の波長域とは離れた異なる波長域での蛍光強度の減衰率を上記と同様の手法によって求め、アスベストであるか否かを識別する。ある任意の波長域での所定経過時における蛍光強度の減衰率が基準アスベスト減衰率と近似した値を示す物質もあるが、物質によって蛍光特性が異なるためアスベストと違う物質ならば他の複数の波長域でも蛍光強度の減衰率が一致することはない。したがって、計測波長域を変化させて複数の計測波長域での蛍光強度の減衰率を比較することにより、アスベストの識別精度を向上させることが可能となる。複数の波長域にわたって複数の所定経過時における蛍光強度の減衰率が一致すれば、その物質はアスベストであると厳密に判定することができる。
【００２２】
蛍光強度を連続的に計測した減衰曲線から求められる蛍光寿命ではなく、蛍光強度の減衰率を比較基準とするのは、計測を簡易にするためである。減衰曲線から蛍光寿命を求めるには長い時間域での計測が必要で、かつデータ数が極端に増え、寿命を導出するための数値解析等の複雑な処理が必要となる。データ数が不足すると正確に寿命を割り出すことが困難となる。また、物質によっては２または３の蛍光寿命が重なるような複雑な減衰曲線を有するものもあり、解析により正確な寿命を導出することが困難となる場合もある。複数の所定経過時における蛍光強度の減衰率を評価指標とすれば、これらの問題を回避して計測が容易になる。
【００２３】
本発明は、アスベストが混在する試料中にレーザー照射を施し、そこに発生するレーザー誘起蛍光の複数の任意波長域での蛍光強度の減衰率を比較するだけの簡単な手法である。また、従来技術で用いられている識別法よりも数値で評価できるため簡易かつ精度の高いアスベストの識別法となる。このため、本発明は、従来技術の問題点である目視によるアスベスト判定に伴う人為的な誤差や煩雑な顕微鏡の操作、試料の前処理等を解決する有力な手段となる。
【００２４】
次に、蛍光強度の減衰率を利用するアスベストの識別原理について説明する。
【００２５】
天然または人為的に生成された化学物質、有機物、無機物等の物質に単色のレーザー光が照射されると、物質表面からレーザー誘起蛍光を発生する。この蛍光は、一般に照射したレーザー波長よりも長い波長域に幅広く発生し、同一波長のレーザー照射条件では、物質ごとに異なる発生特性を示し、発生するスペクトルの波長域、強度、及び蛍光の寿命が異なる。同じ物質であっても、蛍光の波長によっては蛍光寿命も異なり、蛍光強度の時間に対する減衰率も変化する。図１には、異なる物質Ａ、Ｂ及びＣのレーザー誘起蛍光のスペクトル概念図を示す。レーザー誘起蛍光スペクトルは、基本的に物質の組成が異なれば、蛍光の発生波長域、スペクトル形状及び蛍光寿命なども異なる。蛍光寿命は、同じ物質であっても計測する蛍光の波長域によって異なる。例えば紫外域（波長：２６６ｎｍ）の照射パルスレーザー光を照射した場合に、可視波長域に各物質Ａ、Ｂ及びＣにより異なるスペクトル形状のレーザー誘起蛍光の発生が観測される。図では、蛍光スペクトルのピークを１として表示した。
【００２６】
図２には、パルスレーザーの照射直後を経過時間０（基準時）として、そこで発生する蛍光強度を１とした場合、図１中の波長λ１での各物質Ａ、Ｂ及びＣの蛍光強度の経過時間に対する減衰曲線をそれぞれ示す。図２において、経過時ｔ１とｔ２での各物質の蛍光強度の減衰率を比較すると、物質Ｂの減衰率は物質Ａ及びＣの減衰率と大きく異なり、簡単に識別することができる。しかし、物質ＡとＣとは、蛍光強度の減衰率が近似した値を示しており簡単に識別することができない。ところが、経過時ｔ３以降になると、物質Ａ及びＣの間で蛍光強度の減衰率の差が顕著になり、物質ＡとＣとを識別することが可能となる。しかし、経過時間が長くなると、蛍光強度が微弱になり、Ｓ／Ｎ比が劣化して数値の誤差が大きくなるので、蛍光強度の減衰率の差に基づく識別精度が劣化する。そこで、たとえばｔ３以上の長い経過時間でも蛍光強度の減衰率の差が顕著でなく識別することが困難な場合には、別の波長域での蛍光強度の減衰率を比較する。図３には、図１の波長λ２での各物質の蛍光強度の減衰率を示す。物質の組成が異なれば、蛍光の観測波長域を変えることによって蛍光寿命及び蛍光強度の減衰率の特性も変化するからである。波長λ２では、物質ＡとＣの蛍光強度減衰率は、蛍光発生直後から差が顕著であり、経過時ｔ１付近からそれ以降にかけて大きな差があることから簡単に識別することが可能になる。ただし、波長λ２では、物質ＡとＢの蛍光強度の減衰曲線が図２のように同様の特性を示し、蛍光強度の減衰率に差異が無くなるケースも出てくる。
【００２７】
このように、ある一つの任意波長域での蛍光強度の減衰率を所定経過時ごとに計測し、それら時間帯の蛍光強度の減衰率が完全にアスベストの蛍光強度の減衰率（基準アスベスト減衰率）と一致すれば、その物質がアスベストであると識別することができる。また、計測誤差等により完全に一致しない場合でも、アスベストと疑わしい場合には、異なる波長域での蛍光強度の減衰率を同様に計測して比較することによって、アスベストであるか否かを正確に識別することができる。計測波長域を変えて蛍光強度の減衰率を比較する操作を繰り返すことで、一つの波長域だけで蛍光強度の減衰率を比較する場合に比して識別精度を大幅に向上させることが可能となる。蛍光強度の減衰率という数値によってアスベストの識別が可能となるため、目視によって観測、識別する顕微鏡観察法等の従来技術よりも簡易かつ迅速なアスベスト計測が可能となる。本発明では、様々な種類のアスベストの蛍光強度の減衰率を予め測定しておいて既知のデータ（基準アスベスト減衰率）として、計測対象物質の蛍光強度の減衰率を計測して比較する。したがって、アスベスト以外の物質との識別が容易となるばかりでなく、計測すべきアスベストの種類が増加してもアスベストの種類別識別も容易であり、従来方法のように特段の作業時間の増加を招くことはない。
【００２８】
本発明のアスベスト識別法は、既存の顕微鏡システムに組み込むことができる。図７に本発明のアスベスト識別法を組み込んだ顕微鏡システムの概念図を示す。
【００２９】
本発明を適用したアスベスト識別顕微鏡システムは、通常の生物分野等で使用される蛍光顕微鏡に光源をパルスレーザー光としたものを用いる。蛍光顕微鏡は、対物レンズの光路中に光学フィルターを設けたもので、観測したい波長域の蛍光を画像観測するものである。一方、従来の顕微鏡によるアスベスト顕微鏡システムは、位相板と呼ばれる特殊なフィルターを対物レンズの光路中に設けた位相差顕微鏡や同様に偏光光学素子を光路中に設けた偏光顕微鏡が用いられる（特許文献１、非特許文献１及び非特許文献４参照）。また分散染色法を用いる場合には、検体試料をアスベストと同じ屈折率を有する浸液で浸して観察するものである。
【００３０】
本発明を蛍光顕微鏡システムに適用する場合、図７に示すように検体試料として繊維粒子状の試料にレーザーを照射し、検体試料から発生するレーザー誘起蛍光をある任意の波長のみを透過する光学フィルター（波長λＡ）を通して、さらに二つに等分した蛍光を二つの高速シャッター付ＣＣＤカメラを用いて顕微鏡観察することを基本とし、レーザー照射から所定の経過時間差で画像観測できることを特徴とする。パルスレーザー照射直後より所定経過時ｔ１及びｔ２における蛍光顕微鏡観察画像（図中右下に示す）をそれぞれ取得する。これらの画像は、それぞれの経過時におけるカメラの高速ゲート（露出）機能により非常に短い時間内に計測される粒子からの蛍光強度を表す。２つの画像中の対応する繊維状粒子の蛍光強度をＣＣＤ画像の信号から導出することにより、それら経過時における差と蛍光強度の差から蛍光強度の減衰率を計測制御用のパーソナルコンピュータで求め、予め調べておいたアスベストの数値と比較することによってアスベストの識別を行う。これにより、その繊維状粒子がアスベストであるか否かを減衰率から直ちに判定することが可能となる。複数の所定経過時における蛍光強度の減衰率を計測するには、一方のＣＣＤカメラの高速シャッター時間を固定し、他方のＣＣＤカメラの高速シャッター時間を早めるか遅らせるかしながら逐次変化させて画像取得する。これにより、複数の所定経過時における蛍光強度の減衰率を求めることができる。
【００３１】
さらに、識別精度を上げるために異なる波長域での減衰率を測定する場合には、光学バンドパスフィルターの透過波長を変える。すなわち、他の波長域に透過特性を有する光学バンドパスフィルターに交換して計測すればよい。なお、ＣＣＤカメラを二個具備する形態について説明したが、ＣＣＤカメラは一個でもよい。この場合には、パルスレーザー光の出力の時間変動が小さいことが条件となるため、ＣＣＤカメラのシャッターのタイミングを逐次変化させることによって所定経過時における蛍光強度の減衰率を計測すればよい。
【００３２】
次に、従来のレーザー光を用いる光散乱式のパーティクルカウンター等の微粒子計測技術に本発明を適用したアスベスト識別法を図８を参照しながら説明する。通常の大気中の浮遊微粒子を計数するレーザー散乱式の微粒子計測装置では、連続的に空気とともに吸引する微粒子またはエアロゾルにレーザー光を照射し、微粒子からのレーザー散乱光を検出して、その散乱光の有無及び散乱光強度から微粒子の個数や粒径を計測するものである（非特許文献７）。このとき、レーザー散乱光の代わりにレーザー誘起蛍光を図８に示すような要領で計測すればアスベストの計測を迅速に行うことができる。空気吸引ポンプによって装置内に捕集された大気中の微粒子がレーザー照射部に到着した時にパルスレーザーを照射して、その微粒子からレーザー誘起蛍光を発生させる。発生した誘起蛍光を図８のように波長λＡに透過特性を有するバンドパスフィルター（ａ）を通してビームスプリッター（ハーフミラー）（ｂ）で二つに等分し、それらの蛍光を二つの高速ゲート（露出）機能付き光検出器（ｄ）でレーザー照射時間に対して異なる経過時間（ｔ１、ｔ２）で各々の蛍光強度Ｉｔ１、Ｉｔ２を計測する。それら蛍光強度から所定経過時における波長λＡでの蛍光強度の減衰率を算出し、基準となるアスベストの蛍光強度の減衰率と比較することにより、その微粒子がアスベストであるか否かをリアルタイムで識別し計数する。ここで得られる所定経過時における蛍光強度の減衰率の導出及び蛍光強度の減衰率の比較は、パーソナルコンピュータや電子回路等の高速のデータ処理機能を有する機器で行うことが望ましい。この方法の場合、微粒子がレーザー光照射部を通過する時にしか計測ができないので、上記の経過時（ｔ１、ｔ２）以外での経過時での蛍光強度を計測する場合には、バンドパスフィルター（ａ）からの蛍光を３つまたは４つ等に複数等分しかつ光検出器（ｄ）の個数をそれに応じて増やして計測する。あるいは、高速ゲート機能付光検出器（ｄ）において、離れた経過時における２度または３度の蛍光強度計測を行う。また、別の波長での蛍光強度の減衰率を同時に計測するためには、波長λＡ以外の透過波長を有するバンドパスフィルター（ａ）を装備したビームスプリッター（ｂ）、全反射ミラー（ｃ）及びゲート機能付き高感度光検出器（ｄ）からなる別個の計測システムを追加装備すればよい。さらに、このシステムでは、通常の光散乱式のパーティクルカウンターで用いる連続波のレーザー光とは異なりパルスレーザーを用いるため、レーザー照射部に微粒子が来た時にタイミングよくパルスレーザーを照射するために、図８下部に示す装置内での微粒子の位置、動きを検出する機能を有する粒子位置検出システムを具備する。これは、連続波のレーザーを粒子に照射し、粒子から発生する照射レーザー波長と同波長のレーザー散乱光を検出するものである。その機能は、粒子導入部のパルスレーザー照射付近に位置検出用の連続波レーザーを照射し、その付近に粒子が来たときに粒子から発生するレーザー散乱光を検出し、その粒子検出信号をもってパルスレーザーの照射タイミングを知らせるものである。これをトリガー信号としてパルスレーザーを粒子に精度良く照射することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】図１は、異なる物質Ａ、Ｂ及びＣのレーザー誘起蛍光のスペクトル概念図である。
【図２】図２は、図１中の波長λ１での各物質の蛍光強度の減衰曲線の説明図である。
【図３】図３は、図１中の波長λ２での各物質の蛍光強度の減衰曲線の説明図である。
【図４】図４は、アスベスト（クリソタイル）、ガラスウール及びタルクの紫外レーザーパルス照射によるレーザー誘起蛍光スペクトルを示す。
【図５】図５は、アスベスト（クリソタイル、クロシドライト、アモサイト、トレモライト、アンソフィライト）、ガラスウール、ロックウール、タルク及び石膏等の物質のレーザー誘起蛍光の波長４３２ｎｍ付近での減衰率曲線を示す。
【図６】図６は、アスベスト（クリソタイル、クロシドライト、アモサイト、トレモライト、アンソフィライト）、ガラスウール、ロックウール、タルク及び石膏等の物質のレーザー誘起蛍光の波長５２２ｎｍ付近での減衰率曲線を示す。
【図７】図７は、本発明のアスベスト識別法を組み込んだ顕微鏡システムの概念図である。
【図８】図８は、本発明のアスベスト識別法を適用した空気吸引型光散乱式微粒子計測装置の概念図である。
【図９】図９は、図７に示す本発明のアスベスト識別装置の一実施形態である顕微鏡システムにおいて紫外（波長２６６ｎｍ）レーザー照射によりクリソタイル（アスベスト）粒子及びガラスウール粒子から発生した５４０ｎｍの波長域でのレーザー誘起蛍光を観測したそれら粒子の顕微蛍光画像を示す。
【図１０】図１０は、波長５４０ｎｍでのクリソタイルとガラスウールの分光試験でのバルク試料と顕微鏡観察試験での粒子試料からの各々のレーザー誘起蛍光の各経過時間での減衰率を示す。
【実施例】
【００３４】
以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
［実施例１］
代表的なアスベストの種類であるクリソタイル、計測時にアスベストと誤認されやすいアスベスト繊維と同様の繊維状物質であるガラスウール、及び繊維状ではないがアスベストと同様の化学組成である建材試料のタルクに対して、Ｎｄ：ＹＡＧレーザーの４倍波である波長２６６ｎｍのパルスレーザー光（パルス時間半値幅：〜４ｎｓ）を照射して、波長３５０ｎｍ付近から７００ｎｍのレーザー誘起蛍光スペクトルを計測した。蛍光計測時には試料からのレーザーの散乱光を除外するため、３６０ｎｍ付近にカットオフ波長を有する光学ローパスフィルターを使用した。レーザー照射直後より２００ｎｓの露出時間で計測した蛍光スペクトルを図４に示す。図４には、比較のため蛍光スペクトル形状のピークを１として表示した。クリソタイルの蛍光スペクトルは、ガラスウールとは異なるスペクトル形状を示した。一方、タルクはスペクトル幅がクリソタイルのものよりも狭いが、蛍光ピーク位置はほぼ同じ位置であり、同様のスペクトル形状を示した。
【００３５】
図５に、図４の蛍光スペクトルの波長４３２ｎｍの波長域でのアスベスト５種類（クリソタイル、クロシドライト、アモサイト、トレモライト、アンソフィライト）、繊維状物質のガラスウール、ロックウール、及び非繊維状物質のタルク、石膏の蛍光強度の各経過時間での減衰率から求めた減衰曲線を示す。
レーザー照射直後より５ｎｓの露出時間で計測した蛍光強度を、５ｎｓまたは１０ｎｓの経過時間おきに計測したものであり、照射直後の蛍光強度を１として表示した。図５より、クリソタイルとアンソフィライト、及びアモサイトとロックウールの減衰曲線がそれぞれ酷似していることがわかる。図５において、各物質の減衰曲線が交わらない経過時の減衰率を比較すれば、図５に示した物質をそれぞれ識別することができることがわかる。図５のレーザー照射直後から５ｎｓごとの４５ｎｓまでの各経過時間での蛍光強度の減衰率を例として表１に示す。
【００３６】
【表１】
【００３７】
表１より、波長４３２ｎｍでの経過時４５ｎｓの減衰率を厳密に比較すれば、物質ごとに異なる数値を有しているためアスベストとそれ以外の物質の識別、さらにアスベスト種類の識別が可能であることがわかる。しかし、経過時４５ｎｓの減衰率のみで比較すると、アモサイトとガラスウールの値が非常に近く、現実的には測定誤差を考慮すると識別が困難になる場合がある。この場合は、経過時４５ｎｓ以前の経過時（例えば１０ｎｓ）での値を比較すれば差が顕著になり（アモサイトの０.２に対してガラスウールの３.３）容易に識別することができる。また、クリソタイルとアンソフィライト、アモサイトとロックウールは、経過時５ｎｓから２５ｎｓにかけて各経過時の減衰率が非常に近い値かまたは同じ値を有するが、経過時４５ｎｓでは識別可能な減衰率の差を有するので経過時４５ｎｓでの減衰率をもって識別することができる。波長４３２ｎｍでの減衰率の比較結果として、各物質の各経過時において、個々の各経過時で減衰率が一致または非常に近い値を示す物質同士は存在したが、全ての経過時で減衰率が全て一致する物質同士は無かった。経過時を細かく区切って（例えば５ｎｓ毎）、蛍光強度の減衰率を厳密に比較すれば識別も可能であるが、それでも任意の波長域の減衰率が非常に近い値を示すものがあるときには、別の波長域の減衰率を参考にすると正確な識別が可能となる。
【００３８】
図６に、図５と異なる波長域（図４の５２２ｎｍ）の蛍光強度の減衰率を計測した結果を示す。図５と比較すると明らかなように、計測する波長域が９０ｎｍ程度大きく長波長側に離れると、各物質の蛍光強度の減衰率も大きく変化することがわかる。表２に表１と同様に図６の経過時間に対する各物質の蛍光強度の減衰率を示す。
【００３９】
【表２】
【００４０】
図６の計測波長域（５２２ｎｍ）では、図５で類似の蛍光強度の減衰率を示していたアモサイトとロックウールが経過時間１０ｎｓを除いて相互に顕著な差異を生じていることがわかる。さらに、アモサイトとガラスウールの経過時間４５ｎｓでの減衰率を比較すると波長４３２ｎｍでは差が非常に小さかったが、波長５２２ｎｍでは、ガラスウールはアモサイトの８分の１程度と差が拡大した。クリソタイルとアンソフィライトの場合は、クリソタイルの減衰率は、波長４３２ｎｍでは４５ｎｓ以外の経過時間５ｎｓ、１０ｎｓ、１５ｎｓ、及び２５ｎｓでは全てアンソフィライトよりも同じか僅かに低い値を示したが、波長５２２ｎｍでは５ｎｓ、１０ｎｓ、１５ｎｓの経過時ではクリソタイルの減衰率が逆に高い値を示すようになった。このように蛍光の計測波長を変えることでクリソタイルとアンソフィライトの各経過時の減衰率の差が変化することを確認することでクリソタイルとアンソフィライトを厳密に識別することができる。クリソタイルとアンソフィライトは、波長５２２ｎｍでも経過時４５ｎｓでの減衰率の差が最も大きく異なり、それを比較することで正確に識別できることがわかった。
【００４１】
このように、図５の波長域（４３２ｎｍ）では蛍光強度の減衰率に大きな差がない物質でも計測波長域を変えることで明確に識別することが可能になることが確認できた。また、図６の５２２ｎｍの波長域では、図５の４３２ｎｍの波長域で明確な差異があったクリソタイルとアモサイトの蛍光強度の減衰率が経過時間５ｎｓ、１０ｎｓで近い値を示すことがわかった。
【００４２】
このように一つの波長域での所定経過時における蛍光強度の減衰率の比較だけで識別が困難な場合には、その波長域から大きく離れた別の波長域の蛍光強度の減衰率を調べることで物質判定の確認ができ、精度の良い識別が可能となる。予めアスベストのこのような各波長での蛍光強度の減衰率のデータベースを構築しておくことで、アスベストの蛍光強度の減衰率に合致しない物質を識別することは容易であり、迅速にアスベスト識別を行うことができる。また、様々な物質の減衰率を広く調査し、統計処理等により最初に比較する蛍光強度の減衰率の測定波長を最適化しておくことで、最適波長域の蛍光強度の減衰率を比較するだけで大部分の物質が識別することができる。
［実施例２］
表１及び表２に示した蛍光減衰率は、繊維状或いは粉末状のアスベスト及び建材試料を固めたバルク試料を用いた分光試験によるバルク試料の蛍光減衰率である。その分光試験で得られたアスベスト識別の指標となるバルク試料の蛍光減衰率が、実際に図７に例示した顕微鏡システムでも同様の値が得られることを証明するため、アスベストと他の物質試料の粒子からのレーザー誘起蛍光の減衰率を顕微鏡で計測した。
【００４３】
計測した試料は、クリソタイル（アスベスト）とガラスウール（アスベスト代替建材試料）の繊維状粒子である。石英ガラス製の顕微鏡観察用スライドガラス２枚の内側にそれらの粒子を各々区別して挟んだものを顕微鏡で観測し、各々粒子からのレーザー誘起蛍光の減衰率を計測した。この顕微鏡観察試験では、高感度ＣＣＤカメラが一台しかないため、レーザー照射直後より経過時間をずらして画像中の各粒子から発生するレーザー誘起蛍光を複数画像計測して減衰率を測定した。図９は、図４での試験条件と同様に波長２６６ｎｍのパルスレーザー光を照射して、顕微鏡の対物レンズに透過波長５４０ｎｍのバンドパスフィルターを使用して観察したクリソタイルとガラスウールの二つの粒子の実際の蛍光画像である。図９は、レーザー誘起蛍光をレーザー照射直後から経過時間０ｎｓにおいてカメラ露出時間５ｎｓで観察したものである。図中左の粒子はクリソタイル、右はガラスウールである。ガラスウールはクリソタイルよりもレーザー誘起蛍光量が格段に多いためガラスウールの画像はクリソタイルのものよりも顕著に輝度が高かった。
【００４４】
この経過時間でのそれぞれの粒子の蛍光強度を基準にして経過時間を増やして画像中の各粒子の輝度の高い領域の蛍光強度の減衰率を計測し、バルク試料を用いた分光試験で得られたものと比較した。その結果を図１０に示す。図１０では、顕微鏡観察試験での粒子からの蛍光強度の減衰率とともに図４及び図５の分光スペクトル計測試験から得られた波長５４０ｎｍでの減衰率の曲線を同時に示す。顕微鏡観察試験で計測した粒子からの蛍光の各経過時間での減衰率は、図４及び図５での分光試験のものと同様の値を示した。図１０に示すようにクリソタイル及びガラスウールとも顕微鏡観察試験での減衰率は、バルク試料を使用した分光試験の減衰率とほぼ完全に一致した。さらに、別の波長域で確認するため透過波長４５０ｎｍのバンドパスフィルターを用いて同様に減衰率を計測し比較した結果でも、透過波長５４０ｎｍのバンドパスフィルターでの顕微鏡観察試験結果と同様に図４及び図５の分光試験でのクリソタイルとガラスウールの減衰率が顕微鏡観察での各々の経過時間での減衰率と一致した。
【００４５】
以上より、バルク試料を用いた分光試験での減衰率と顕微鏡観察による粒子からの蛍光計測の減衰率とほぼ一致することが確認できた。よって、実際に図７に例示した顕微鏡観察下でも上述の蛍光の減衰率比較によってアスベスト粒子を識別する手法が適用可能であることの確証が得られた。
【産業上の利用可能性】
【００４６】
本発明は、大気中に浮遊するアスベストを含むエアロゾルを捕集し、アスベストの同定、計数を行う環境分析産業分野、または、建築材料中に含有されるアスベストを分析する材料分析産業分野などで利用することができる。さらに、建屋解体時におけるアスベストの大量処理処分等を行う廃棄物処理産業でのアスベスト分析、アスベストの健康被害、人体影響等を調査する医療分野等で利用できる。
【００４７】
また、本発明のアスベスト識別方法と顕微鏡法等の従来技術とを結合させることで、分析時間の大幅な短縮と計測精度の向上を図ることができる。さらに、アスベスト計測の自動化も可能である。本発明は、アスベスト計測に係る作業効率と計測精度を飛躍的に向上させ、これまでよりも正確にアスベストの迅速識別を可能とする。結果として、本発明を用いることにより従来よりも正確にアスベストの迅速識別が可能となるめ、本発明はアスベストに係る環境汚染問題の解決に役立てることのできる有効な一つの手段となりうるものと考えられる。
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アスベストの識別法に関し、特に大気中に浮遊するアスベストまたは建築材料中に含まれるアスベストの簡易識別法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来のアスベスト分析方法には、アスベスト粒子と他の物質粒子の屈折率の相違を利用する位相差顕微鏡による分散染色法、複屈折性をも確認できる手法を組み込んだ位相差顕微鏡による分散染色法（特許文献１）、アスベストの複屈折性を利用する偏光顕微鏡による消光角法、物質の結晶構造の相違を利用する基底標準吸収補正法等を利用したＸ線回折分析法、偏光顕微鏡による消光角法の改良型で暗視野落射照明を利用する偏光判定法（ＰＶＳ）（非特許文献１）、呈色試薬を用いる方法（特許文献２及び３）、蛍光色素を吸着させて染色させる方法（特許文献４）、アスベスト繊維粒子によるレーザー散乱光の偏光特性を利用する方法（特許文献５）、レーザーラマン分光を用いる分析法（非特許文献２）、バイオ技術を用いる方法（非特許文献３）などがある。これらのうち、位相差顕微鏡による分散染色法及び偏光顕微鏡による消光角法並びに基底標準吸収補正法等を利用したＸ線回折分析法は、建材、吹き付け材中のアスベスト含有量を計測する定性分析手法として２００６年のＪＩＳ Ａ １４８１に定められている手法である。また、大気汚染防止法で規制対象となる大気中の飛散アスベストの濃度測定法として、環境省 水・大気環境局大気環境課によるアスベストモニタリングマニュアル（第３版、平成１９年５月）では、光学顕微鏡法が標準とされており、結果を補足する手段として電子顕微鏡による観察、または分散染色法が参考法として定められている。
【０００３】
しかし、これらの方法は、欠点として煩雑な前処理や分析結果を得るまでに長い期間、日数を要すること、顕微鏡法では目視観察のため人為的測定誤差が大きいという測定精度の問題がある。
【０００４】
位相差顕微鏡による分散染色法は、粒子の屈折率の違いによって生じる色の相違を顕微鏡で観察してアスベストの識別を行うものである。建材を含む多くの材料からなる検体試料中にはアスベストの屈折率と同様の屈折率を有するタルク等の多くの鉱物材料が存在するため、目視による色の相違のみによる識別は熟練の専門家でも困難な作業となる。
【０００５】
偏光顕微鏡による消光角法では、顕微鏡操作の熟練と消光角による判定法に関する高度な鉱物の光学物性の専門知識が必要で、非専門家にはアスベストの同定が困難であり、識別には経験者でも長い分析時間を要する。ＪＩＳ Ａ １４８１には、位相差顕微鏡による分散染色法と偏光顕微鏡による消光角法とを併用することも参考として示されているが、これら二つの方法を両立できる専門家の数が極めて少ない。このため、これらの手法は現在標準的な計測技術であるが、結果としてアスベストの識別に煩雑な手間と長大な分析時間が必要となる。また、高精度の測定には高い専門知識及び技量が不可欠であることが、分析者による測定精度のばらつき（人為的な測定誤差）を大きくさせている原因となっている。
【０００６】
位相差顕微鏡による分散染色法及び偏光顕微鏡による消光角法の改良型である特許文献１に記載の方法や偏光判定法（ＰＶＳ）は、測定手法に関する改善は見られるものの、やはり同様の問題をかかえている。特に偏光判定法（ＰＶＳ）は、微細なアスベスト繊維粒子の識別が困難で、光学的倍率は位相差顕微鏡や偏光顕微鏡に及ばないとされている。
【０００７】
Ｘ線回折法によるアスベスト識別に関しては、分散染色法及び消光角法以上に高度な知識と経験が必要であることが指摘されている（非特許文献４）。
【０００８】
以上のように、顕微鏡観察、Ｘ線回折による従来方法で高精度な計測を行う際には、試料を準備し計測するまでに煩雑な手間や化学処理等が必要で、さらにアスベストの判定には高度な専門知識や熟達した技量が必要になる。アスベストをリアルタイムでその場で識別し計測することは困難で、結果を得るまでに長い時間と多くの労力が必要であり、測定精度は測定者の技量に依存するという問題点がある。
【０００９】
一方、呈色試薬による方法や蛍光色素を吸着させて染色させる手法、及びタンパク質を吸着させる手法等は、適用可能な建材材料等の範囲が不明な場合やクリソタイル以外には適用困難であるというような問題があるため、使用する際には対象範囲が限定されるという問題点がある。
【００１０】
また、レーザー散乱光の偏光特性を利用する方法やラマン分光を用いる分析法は、計測者の技量に関係なくアスベストをその場で計測することができる。しかし、前者は、繊維状粒子によるレーザー散乱光の偏光特性を利用することから、アスベスト以外の繊維粒子との識別が不十分であるという問題がある。また、後者は、ラマン散乱光が非常に微弱で小さいこと、また同様の波長域でラマン散乱光を発する建材、鉱物等が多数存在するためアスベストの識別が難しいという問題点がある。
【００１１】
これら従来技術を単独で用いる場合は、上記のような技術的問題点がありアスベストの識別を困難にしている。高精度で分析する場合には、高度な専門知識、経験、技量も要求され、上記の従来技術を単独ではなく複数併用しなくてはならない。結果として、従来技術で用いられている方法では、アスベスト繊維粒子のその場で迅速に識別計測することはできず、計測精度のばらつき、長い分析時間、及び煩雑な手間が不可欠という問題がある。
【００１２】
現在のアスベスト計測技術ではアスベストの厳密な判定が困難であるため、その場での迅速なリアルタイム計測が不可能である。よって、アスベストを含む建材を使用した老朽化した建物の解体工事現場などで建材中のアスベストの分析及び飛散するアスベストの環境調査のために長い日数と煩雑な作業を要している。
【００１３】
また、これまで計測対象は、クリソタイル、クロシドライト及びアモサイトの３種類であったが、アスベストの健康被害対策のため、厚生労働省通達（基安化発０２０６００３号、平成２０年２月６日付）によりクロシドライトと同じ各閃石族のアンソフィライト、トレモライトやアクチノライトの３種類のアスベストの分析も義務付けられることになった。しかしながら、現在、主流となっている分散染色法による位相差顕微鏡によるアスベスト計測法では、このような計測数の増加に対してある程度の計測精度を維持したまま対処することは大幅な作業時間の増加を招く。
【００１４】
一方、アスベスト計測に適用されてはいないが、蛍光寿命により物質の発光機構と化学種の関係等を分析する手法として時間分解蛍光分光（測光）法がある（非特許文献５）。この方法では、蛍光スペクトルを時間分解してスペクトルの変化や蛍光寿命を計測して２成分系試料の定量分析、物質の同定や分子の動的構造解析等を行う（特許文献６、７及び８）。また、代表的なものとしてバイオ分野で細胞内の微小環境評価、色素、抗体、アミノ酸の検出等に蛍光寿命顕微鏡が用いられている（特許文献９及び１０、非特許文献６）。蛍光寿命は、蛍光強度と違って物質の濃度により影響を受けないため、バイオ、化学分析分野では、主に蛍光色素、特定物質等の画像検出または挙動解析に用いられている。蛍光寿命を検出するため、寿命計測装置や寿命解析装置が開発されてきた（特許文献１１及び１２）。しかしながら、蛍光寿命による物質同定または識別法は、これまで細胞内や化学溶液内等の非常に限られた条件下で使用されており、アスベストのような無機物質または有機物質など多様な物質が混在する試料を分析する環境分析の分野では一般に使用されていない。その理由として、同様の蛍光寿命を有する物質が多数混在していること、それら多様かつ多数の蛍光寿命の解析に膨大な分析時間と手間が必要になることが挙げられる。また、それら多様な試料には蛍光強度に大きな差があるため、微量かつ微弱な蛍光強度を有する物質の同定は実質的に不可能である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】特開２００５−３３８５６７号公報
【特許文献２】特開２０００−８８８３８号公報
【特許文献３】特開平９−１０５７４３号公報
【特許文献４】特表２００４−５１９４４５号公報
【特許文献５】特開平１０−２６７８２８号公報
【特許文献６】特許第３３１８０１９号公報
【特許文献７】特開２００４−２９４１０５号公報
【特許文献８】特表２００３−５２２９４６号公報
【特許文献９】特開２００２−２８６６３９号公報
【特許文献１０】特開平９−４３１４６号公報
【特許文献１１】特表２００６−５１９３９５号公報
【特許文献１２】特開平８−３３４４６４号公報
【非特許文献】
【００１６】
【非特許文献１】亀和田俊一、和田哲、石井啓慈、南和明、許成基、境谷浩一、亀元宏宣、西田道夫、「建材中アスベストの偏光判定装置（ＰＶＳ）とこれを用いた現場判定法」、産業と環境、ｖｏｌ．３５，Ｎｏ．３，２００６
【非特許文献２】立石和男、古谷圭一、菊池正、石田英之、石谷炯、「ラマンマイクロプローブによる環境中のアスベストの分析」、ＢＵＮＳＥＫＩ ＫＡＧＡＫＵ、ｖｏｌ．３０、ｐｐ．７７４−７７９，１９８１
【非特許文献３】黒田章夫、野村和孝、西村智基、「アスベスト結合タンパク質を利用したアスベスト簡易検出」、オーム、１２月号、ｐｐ．４−５，２００６
【非特許文献４】佐々木一弘、中倉隆雄、藤巻宏和、「位相差顕微鏡を用いた分散染色法によるアスベスト同定の問題点」、ぶんせき、４、ｐｐ．１７７−１８４，２００７
【非特許文献５】南茂夫、合志陽一編集、「分光技術ハンドブック」、ｐｐ．５３３−５３５，１９９０
【非特許文献６】Bernard Valeur, “Molecular Fluorescence: Principal and Applications”, Weinheim: Wiley-VCH, 2002
【非特許文献７】諫早典夫、中江茂、平沢紘介編集：「空気清浄のための浮遊微粒子の計測・制御総合技術」、Ｒ＆Ｄプラニング、１９８７年発行
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
したがって、本発明は、従来法の欠点を解消し、一般には困難と考えられる環境試料中の多様な物質からレーザー誘起蛍光の蛍光強度の減衰率を用いてアスベストを簡便に識別する方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明によれば、アスベストを識別する指標として物質固有のレーザー誘起蛍光の蛍光寿命を用いることにより、従来技術でのアスベスト判定の困難さ、計測に係る煩雑な処理または手間、及び測定精度等の問題点を解消する。
【００１９】
具体的には、検査対象の検体試料にレーザー光を照射して物質から発生する任意波長のレーザー誘起蛍光の蛍光強度を計測し、所定経過時ごとの蛍光強度の減衰率を検出して、あらかじめ作成しておいた所定経過時ごとの基準アスベストの蛍光強度の減衰率とその場で比較し、検体試料がアスベストを含むか否かを識別する。本発明において、「蛍光強度の減衰率」とは、レーザー照射直後の任意の時間（基準時）に検出した蛍光強度の値を基準蛍光強度（例えば１）とし、当該基準時から所定経過時において計測されるレーザー誘起蛍光の基準蛍光強度に対する減衰比から求められるものである。
【００２０】
一般に物質にレーザー光が照射されると、その物質表面から物質の組成に依存する物質特有のレーザー誘起蛍光が発生する。その蛍光の発生波長域は、照射するレーザー光の波長域よりも広く、数ナノメートルから数百ナノメートルに及ぶことがある。蛍光スペクトルの発生特性は、同じ物質でも照射するレーザーの波長によっても異なる。同一波長のレーザー光で様々な物質を照射すると、蛍光強度、ピークを示す波長、蛍光スペクトル形状、及びその蛍光寿命は物質によって種々異なる。蛍光寿命は、全ての波長域にわたって均一な場合もあれば、観測する波長域によって変化する場合もあり、物質によって様々である。この蛍光寿命の特性を利用して、予め任意の波長域でのアスベストの蛍光寿命特性を調査してレーザー照射直後からの蛍光強度の減衰率の値を把握しておき、それを基準として同条件での物質からの減衰率と比較することでアスベストの識別が可能となる。
【００２１】
本発明においては、蛍光寿命に従って減衰する蛍光強度を連続的に計測して蛍光寿命を直接求めるのではなく、基準とする経過時間帯での蛍光強度に基づいて複数の所定経過時における蛍光強度を計測して減衰率を求める。アスベストの識別は、ある任意波長域における物質の所定経過時における蛍光強度の減衰率を計測して、予め同条件で計測しておいた同波長域でのアスベストの減衰率（以後「基準アスベスト減衰率」という）と比較することによって行う。さらに、所定経過時における蛍光強度の減衰率が、計測誤差を考慮した場合に基準アスベスト減衰率と非常に近似した値を示す場合には、計測した任意の波長域とは離れた異なる波長域での蛍光強度の減衰率を上記と同様の手法によって求め、アスベストであるか否かを識別する。ある任意の波長域での所定経過時における蛍光強度の減衰率が基準アスベスト減衰率と近似した値を示す物質もあるが、物質によって蛍光特性が異なるためアスベストと違う物質ならば他の複数の波長域でも蛍光強度の減衰率が一致することはない。したがって、計測波長域を変化させて複数の計測波長域での蛍光強度の減衰率を比較することにより、アスベストの識別精度を向上させることが可能となる。複数の波長域にわたって複数の所定経過時における蛍光強度の減衰率が一致すれば、その物質はアスベストであると厳密に判定することができる。
【００２２】
蛍光強度を連続的に計測した減衰曲線から求められる蛍光寿命ではなく、蛍光強度の減衰率を比較基準とするのは、計測を簡易にするためである。減衰曲線から蛍光寿命を求めるには長い時間域での計測が必要で、かつデータ数が極端に増え、寿命を導出するための数値解析等の複雑な処理が必要となる。データ数が不足すると正確に寿命を割り出すことが困難となる。また、物質によっては２または３の蛍光寿命が重なるような複雑な減衰曲線を有するものもあり、解析により正確な寿命を導出することが困難となる場合もある。複数の所定経過時における蛍光強度の減衰率を評価指標とすれば、これらの問題を回避して計測が容易になる。
【００２３】
本発明は、アスベストが混在する試料中にレーザー照射を施し、そこに発生するレーザー誘起蛍光の複数の任意波長域での蛍光強度の減衰率を比較するだけの簡単な手法である。また、従来技術で用いられている識別法よりも数値で評価できるため簡易かつ精度の高いアスベストの識別法となる。このため、本発明は、従来技術の問題点である目視によるアスベスト判定に伴う人為的な誤差や煩雑な顕微鏡の操作、試料の前処理等を解決する有力な手段となる。
【００２４】
次に、蛍光強度の減衰率を利用するアスベストの識別原理について説明する。
【００２５】
天然または人為的に生成された化学物質、有機物、無機物等の物質に単色のレーザー光が照射されると、物質表面からレーザー誘起蛍光を発生する。この蛍光は、一般に照射したレーザー波長よりも長い波長域に幅広く発生し、同一波長のレーザー照射条件では、物質ごとに異なる発生特性を示し、発生するスペクトルの波長域、強度、及び蛍光の寿命が異なる。同じ物質であっても、蛍光の波長によっては蛍光寿命も異なり、蛍光強度の時間に対する減衰率も変化する。図１には、異なる物質Ａ、Ｂ及びＣのレーザー誘起蛍光のスペクトル概念図を示す。レーザー誘起蛍光スペクトルは、基本的に物質の組成が異なれば、蛍光の発生波長域、スペクトル形状及び蛍光寿命なども異なる。蛍光寿命は、同じ物質であっても計測する蛍光の波長域によって異なる。例えば紫外域（波長：２６６ｎｍ）の照射パルスレーザー光を照射した場合に、可視波長域に各物質Ａ、Ｂ及びＣにより異なるスペクトル形状のレーザー誘起蛍光の発生が観測される。図では、蛍光スペクトルのピークを１として表示した。
【００２６】
図２には、パルスレーザーの照射直後を経過時間０（基準時）として、そこで発生する蛍光強度を１とした場合、図１中の波長λ１での各物質Ａ、Ｂ及びＣの蛍光強度の経過時間に対する減衰曲線をそれぞれ示す。図２において、経過時ｔ１とｔ２での各物質の蛍光強度の減衰率を比較すると、物質Ｂの減衰率は物質Ａ及びＣの減衰率と大きく異なり、簡単に識別することができる。しかし、物質ＡとＣとは、蛍光強度の減衰率が近似した値を示しており簡単に識別することができない。ところが、経過時ｔ３以降になると、物質Ａ及びＣの間で蛍光強度の減衰率の差が顕著になり、物質ＡとＣとを識別することが可能となる。しかし、経過時間が長くなると、蛍光強度が微弱になり、Ｓ／Ｎ比が劣化して数値の誤差が大きくなるので、蛍光強度の減衰率の差に基づく識別精度が劣化する。そこで、たとえばｔ３以上の長い経過時間でも蛍光強度の減衰率の差が顕著でなく識別することが困難な場合には、別の波長域での蛍光強度の減衰率を比較する。図３には、図１の波長λ２での各物質の蛍光強度の減衰率を示す。物質の組成が異なれば、蛍光の観測波長域を変えることによって蛍光寿命及び蛍光強度の減衰率の特性も変化するからである。波長λ２では、物質ＡとＣの蛍光強度減衰率は、蛍光発生直後から差が顕著であり、経過時ｔ１付近からそれ以降にかけて大きな差があることから簡単に識別することが可能になる。ただし、波長λ２では、物質ＡとＢの蛍光強度の減衰曲線が図２のように同様の特性を示し、蛍光強度の減衰率に差異が無くなるケースも出てくる。
【００２７】
このように、ある一つの任意波長域での蛍光強度の減衰率を所定経過時ごとに計測し、それら時間帯の蛍光強度の減衰率が完全にアスベストの蛍光強度の減衰率（基準アスベスト減衰率）と一致すれば、その物質がアスベストであると識別することができる。また、計測誤差等により完全に一致しない場合でも、アスベストと疑わしい場合には、異なる波長域での蛍光強度の減衰率を同様に計測して比較することによって、アスベストであるか否かを正確に識別することができる。計測波長域を変えて蛍光強度の減衰率を比較する操作を繰り返すことで、一つの波長域だけで蛍光強度の減衰率を比較する場合に比して識別精度を大幅に向上させることが可能となる。蛍光強度の減衰率という数値によってアスベストの識別が可能となるため、目視によって観測、識別する顕微鏡観察法等の従来技術よりも簡易かつ迅速なアスベスト計測が可能となる。本発明では、様々な種類のアスベストの蛍光強度の減衰率を予め測定しておいて既知のデータ（基準アスベスト減衰率）として、計測対象物質の蛍光強度の減衰率を計測して比較する。したがって、アスベスト以外の物質との識別が容易となるばかりでなく、計測すべきアスベストの種類が増加してもアスベストの種類別識別も容易であり、従来方法のように特段の作業時間の増加を招くことはない。
【００２８】
本発明のアスベスト識別法は、既存の顕微鏡システムに組み込むことができる。図７に本発明のアスベスト識別法を組み込んだ顕微鏡システムの概念図を示す。
【００２９】
本発明を適用したアスベスト識別顕微鏡システムは、通常の生物分野等で使用される蛍光顕微鏡に光源をパルスレーザー光としたものを用いる。蛍光顕微鏡は、対物レンズの光路中に光学フィルターを設けたもので、観測したい波長域の蛍光を画像観測するものである。一方、従来の顕微鏡によるアスベスト顕微鏡システムは、位相板と呼ばれる特殊なフィルターを対物レンズの光路中に設けた位相差顕微鏡や同様に偏光光学素子を光路中に設けた偏光顕微鏡が用いられる（特許文献１、非特許文献１及び非特許文献４参照）。また分散染色法を用いる場合には、検体試料をアスベストと同じ屈折率を有する浸液で浸して観察するものである。
【００３０】
本発明を蛍光顕微鏡システムに適用する場合、図７に示すように検体試料として繊維粒子状の試料にレーザーを照射し、検体試料から発生するレーザー誘起蛍光をある任意の波長のみを透過する光学フィルター（波長λＡ）を通して、さらに二つに等分した蛍光を二つの高速シャッター付ＣＣＤカメラを用いて顕微鏡観察することを基本とし、レーザー照射から所定の経過時間差で画像観測できることを特徴とする。パルスレーザー照射直後より所定経過時ｔ１及びｔ２における蛍光顕微鏡観察画像（図中右下に示す）をそれぞれ取得する。これらの画像は、それぞれの経過時におけるカメラの高速ゲート（露出）機能により非常に短い時間内に計測される粒子からの蛍光強度を表す。２つの画像中の対応する繊維状粒子の蛍光強度をＣＣＤ画像の信号から導出することにより、それら経過時における差と蛍光強度の差から蛍光強度の減衰率を計測制御用のパーソナルコンピュータで求め、予め調べておいたアスベストの数値と比較することによってアスベストの識別を行う。これにより、その繊維状粒子がアスベストであるか否かを減衰率から直ちに判定することが可能となる。複数の所定経過時における蛍光強度の減衰率を計測するには、一方のＣＣＤカメラの高速シャッター時間を固定し、他方のＣＣＤカメラの高速シャッター時間を早めるか遅らせるかしながら逐次変化させて画像取得する。これにより、複数の所定経過時における蛍光強度の減衰率を求めることができる。
【００３１】
さらに、識別精度を上げるために異なる波長域での減衰率を測定する場合には、光学バンドパスフィルターの透過波長を変える。すなわち、他の波長域に透過特性を有する光学バンドパスフィルターに交換して計測すればよい。なお、ＣＣＤカメラを二個具備する形態について説明したが、ＣＣＤカメラは一個でもよい。この場合には、パルスレーザー光の出力の時間変動が小さいことが条件となるため、ＣＣＤカメラのシャッターのタイミングを逐次変化させることによって所定経過時における蛍光強度の減衰率を計測すればよい。
【００３２】
次に、従来のレーザー光を用いる光散乱式のパーティクルカウンター等の微粒子計測技術に本発明を適用したアスベスト識別法を図８を参照しながら説明する。通常の大気中の浮遊微粒子を計数するレーザー散乱式の微粒子計測装置では、連続的に空気とともに吸引する微粒子またはエアロゾルにレーザー光を照射し、微粒子からのレーザー散乱光を検出して、その散乱光の有無及び散乱光強度から微粒子の個数や粒径を計測するものである（非特許文献７）。このとき、レーザー散乱光の代わりにレーザー誘起蛍光を図８に示すような要領で計測すればアスベストの計測を迅速に行うことができる。空気吸引ポンプによって装置内に捕集された大気中の微粒子がレーザー照射部に到着した時にパルスレーザーを照射して、その微粒子からレーザー誘起蛍光を発生させる。発生した誘起蛍光を図８のように波長λＡに透過特性を有するバンドパスフィルター（ａ）を通してビームスプリッター（ハーフミラー）（ｂ）で二つに等分し、それらの蛍光を二つの高速ゲート（露出）機能付き光検出器（ｄ）でレーザー照射時間に対して異なる経過時間（ｔ１、ｔ２）で各々の蛍光強度Ｉｔ１、Ｉｔ２を計測する。それら蛍光強度から所定経過時における波長λＡでの蛍光強度の減衰率を算出し、基準となるアスベストの蛍光強度の減衰率と比較することにより、その微粒子がアスベストであるか否かをリアルタイムで識別し計数する。ここで得られる所定経過時における蛍光強度の減衰率の導出及び蛍光強度の減衰率の比較は、パーソナルコンピュータや電子回路等の高速のデータ処理機能を有する機器で行うことが望ましい。この方法の場合、微粒子がレーザー光照射部を通過する時にしか計測ができないので、上記の経過時（ｔ１、ｔ２）以外での経過時での蛍光強度を計測する場合には、バンドパスフィルター（ａ）からの蛍光を３つまたは４つ等に複数等分しかつ光検出器（ｄ）の個数をそれに応じて増やして計測する。あるいは、高速ゲート機能付光検出器（ｄ）において、離れた経過時における２度または３度の蛍光強度計測を行う。また、別の波長での蛍光強度の減衰率を同時に計測するためには、波長λＡ以外の透過波長を有するバンドパスフィルター（ａ）を装備したビームスプリッター（ｂ）、全反射ミラー（ｃ）及びゲート機能付き高感度光検出器（ｄ）からなる別個の計測システムを追加装備すればよい。さらに、このシステムでは、通常の光散乱式のパーティクルカウンターで用いる連続波のレーザー光とは異なりパルスレーザーを用いるため、レーザー照射部に微粒子が来た時にタイミングよくパルスレーザーを照射するために、図８下部に示す装置内での微粒子の位置、動きを検出する機能を有する粒子位置検出システムを具備する。これは、連続波のレーザーを粒子に照射し、粒子から発生する照射レーザー波長と同波長のレーザー散乱光を検出するものである。その機能は、粒子導入部のパルスレーザー照射付近に位置検出用の連続波レーザーを照射し、その付近に粒子が来たときに粒子から発生するレーザー散乱光を検出し、その粒子検出信号をもってパルスレーザーの照射タイミングを知らせるものである。これをトリガー信号としてパルスレーザーを粒子に精度良く照射することが可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】図１は、異なる物質Ａ、Ｂ及びＣのレーザー誘起蛍光のスペクトル概念図である。
【図２】図２は、図１中の波長λ１での各物質の蛍光強度の減衰曲線の説明図である。
【図３】図３は、図１中の波長λ２での各物質の蛍光強度の減衰曲線の説明図である。
【図４】図４は、アスベスト（クリソタイル）、ガラスウール及びタルクの紫外レーザーパルス照射によるレーザー誘起蛍光スペクトルを示す。
【図５】図５は、アスベスト（クリソタイル、クロシドライト、アモサイト、トレモライト、アンソフィライト）、ガラスウール、ロックウール、タルク及び石膏等の物質のレーザー誘起蛍光の波長４３２ｎｍ付近での減衰率曲線を示す。
【図６】図６は、アスベスト（クリソタイル、クロシドライト、アモサイト、トレモライト、アンソフィライト）、ガラスウール、ロックウール、タルク及び石膏等の物質のレーザー誘起蛍光の波長５２２ｎｍ付近での減衰率曲線を示す。
【図７】図７は、本発明のアスベスト識別法を組み込んだ顕微鏡システムの概念図である。
【図８】図８は、本発明のアスベスト識別法を適用した空気吸引型光散乱式微粒子計測装置の概念図である。
【図９】図９は、図７に示す本発明のアスベスト識別装置の一実施形態である顕微鏡システムにおいて紫外（波長２６６ｎｍ）レーザー照射によりクリソタイル（アスベスト）粒子及びガラスウール粒子から発生した５４０ｎｍの波長域でのレーザー誘起蛍光を観測したそれら粒子の顕微蛍光画像を示す。
【図１０】図１０は、波長５４０ｎｍでのクリソタイルとガラスウールの分光試験でのバルク試料と顕微鏡観察試験での粒子試料からの各々のレーザー誘起蛍光の各経過時間での減衰率を示す。
【実施例】
【００３４】
以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
［実施例１］
代表的なアスベストの種類であるクリソタイル、計測時にアスベストと誤認されやすいアスベスト繊維と同様の繊維状物質であるガラスウール、及び繊維状ではないがアスベストと同様の化学組成である建材試料のタルクに対して、Ｎｄ：ＹＡＧレーザーの４倍波である波長２６６ｎｍのパルスレーザー光（パルス時間半値幅：〜４ｎｓ）を照射して、波長３５０ｎｍ付近から７００ｎｍのレーザー誘起蛍光スペクトルを計測した。蛍光計測時には試料からのレーザーの散乱光を除外するため、３６０ｎｍ付近にカットオフ波長を有する光学ローパスフィルターを使用した。レーザー照射直後より２００ｎｓの露出時間で計測した蛍光スペクトルを図４に示す。図４には、比較のため蛍光スペクトル形状のピークを１として表示した。クリソタイルの蛍光スペクトルは、ガラスウールとは異なるスペクトル形状を示した。一方、タルクはスペクトル幅がクリソタイルのものよりも狭いが、蛍光ピーク位置はほぼ同じ位置であり、同様のスペクトル形状を示した。
【００３５】
図５に、図４の蛍光スペクトルの波長４３２ｎｍの波長域でのアスベスト５種類（クリソタイル、クロシドライト、アモサイト、トレモライト、アンソフィライト）、繊維状物質のガラスウール、ロックウール、及び非繊維状物質のタルク、石膏の蛍光強度の各経過時間での減衰率から求めた減衰曲線を示す。
レーザー照射直後より５ｎｓの露出時間で計測した蛍光強度を、５ｎｓまたは１０ｎｓの経過時間おきに計測したものであり、照射直後の蛍光強度を１として表示した。図５より、クリソタイルとアンソフィライト、及びアモサイトとロックウールの減衰曲線がそれぞれ酷似していることがわかる。図５において、各物質の減衰曲線が交わらない経過時の減衰率を比較すれば、図５に示した物質をそれぞれ識別することができることがわかる。図５のレーザー照射直後から５ｎｓごとの４５ｎｓまでの各経過時間での蛍光強度の減衰率を例として表１に示す。
【００３６】
【表１】
【００３７】
表１より、波長４３２ｎｍでの経過時４５ｎｓの減衰率を厳密に比較すれば、物質ごとに異なる数値を有しているためアスベストとそれ以外の物質の識別、さらにアスベスト種類の識別が可能であることがわかる。しかし、経過時４５ｎｓの減衰率のみで比較すると、アモサイトとガラスウールの値が非常に近く、現実的には測定誤差を考慮すると識別が困難になる場合がある。この場合は、経過時４５ｎｓ以前の経過時（例えば１０ｎｓ）での値を比較すれば差が顕著になり（アモサイトの０.２に対してガラスウールの３.３）容易に識別することができる。また、クリソタイルとアンソフィライト、アモサイトとロックウールは、経過時５ｎｓから２５ｎｓにかけて各経過時の減衰率が非常に近い値かまたは同じ値を有するが、経過時４５ｎｓでは識別可能な減衰率の差を有するので経過時４５ｎｓでの減衰率をもって識別することができる。波長４３２ｎｍでの減衰率の比較結果として、各物質の各経過時において、個々の各経過時で減衰率が一致または非常に近い値を示す物質同士は存在したが、全ての経過時で減衰率が全て一致する物質同士は無かった。経過時を細かく区切って（例えば５ｎｓ毎）、蛍光強度の減衰率を厳密に比較すれば識別も可能であるが、それでも任意の波長域の減衰率が非常に近い値を示すものがあるときには、別の波長域の減衰率を参考にすると正確な識別が可能となる。
【００３８】
図６に、図５と異なる波長域（図４の５２２ｎｍ）の蛍光強度の減衰率を計測した結果を示す。図５と比較すると明らかなように、計測する波長域が９０ｎｍ程度大きく長波長側に離れると、各物質の蛍光強度の減衰率も大きく変化することがわかる。表２に表１と同様に図６の経過時間に対する各物質の蛍光強度の減衰率を示す。
【００３９】
【表２】
【００４０】
図６の計測波長域（５２２ｎｍ）では、図５で類似の蛍光強度の減衰率を示していたアモサイトとロックウールが経過時間１０ｎｓを除いて相互に顕著な差異を生じていることがわかる。さらに、アモサイトとガラスウールの経過時間４５ｎｓでの減衰率を比較すると波長４３２ｎｍでは差が非常に小さかったが、波長５２２ｎｍでは、ガラスウールはアモサイトの８分の１程度と差が拡大した。クリソタイルとアンソフィライトの場合は、クリソタイルの減衰率は、波長４３２ｎｍでは４５ｎｓ以外の経過時間５ｎｓ、１０ｎｓ、１５ｎｓ、及び２５ｎｓでは全てアンソフィライトよりも同じか僅かに低い値を示したが、波長５２２ｎｍでは５ｎｓ、１０ｎｓ、１５ｎｓの経過時ではクリソタイルの減衰率が逆に高い値を示すようになった。このように蛍光の計測波長を変えることでクリソタイルとアンソフィライトの各経過時の減衰率の差が変化することを確認することでクリソタイルとアンソフィライトを厳密に識別することができる。クリソタイルとアンソフィライトは、波長５２２ｎｍでも経過時４５ｎｓでの減衰率の差が最も大きく異なり、それを比較することで正確に識別できることがわかった。
【００４１】
このように、図５の波長域（４３２ｎｍ）では蛍光強度の減衰率に大きな差がない物質でも計測波長域を変えることで明確に識別することが可能になることが確認できた。また、図６の５２２ｎｍの波長域では、図５の４３２ｎｍの波長域で明確な差異があったクリソタイルとアモサイトの蛍光強度の減衰率が経過時間５ｎｓ、１０ｎｓで近い値を示すことがわかった。
【００４２】
このように一つの波長域での所定経過時における蛍光強度の減衰率の比較だけで識別が困難な場合には、その波長域から大きく離れた別の波長域の蛍光強度の減衰率を調べることで物質判定の確認ができ、精度の良い識別が可能となる。予めアスベストのこのような各波長での蛍光強度の減衰率のデータベースを構築しておくことで、アスベストの蛍光強度の減衰率に合致しない物質を識別することは容易であり、迅速にアスベスト識別を行うことができる。また、様々な物質の減衰率を広く調査し、統計処理等により最初に比較する蛍光強度の減衰率の測定波長を最適化しておくことで、最適波長域の蛍光強度の減衰率を比較するだけで大部分の物質が識別することができる。
［実施例２］
表１及び表２に示した蛍光減衰率は、繊維状或いは粉末状のアスベスト及び建材試料を固めたバルク試料を用いた分光試験によるバルク試料の蛍光減衰率である。その分光試験で得られたアスベスト識別の指標となるバルク試料の蛍光減衰率が、実際に図７に例示した顕微鏡システムでも同様の値が得られることを証明するため、アスベストと他の物質試料の粒子からのレーザー誘起蛍光の減衰率を顕微鏡で計測した。
【００４３】
計測した試料は、クリソタイル（アスベスト）とガラスウール（アスベスト代替建材試料）の繊維状粒子である。石英ガラス製の顕微鏡観察用スライドガラス２枚の内側にそれらの粒子を各々区別して挟んだものを顕微鏡で観測し、各々粒子からのレーザー誘起蛍光の減衰率を計測した。この顕微鏡観察試験では、高感度ＣＣＤカメラが一台しかないため、レーザー照射直後より経過時間をずらして画像中の各粒子から発生するレーザー誘起蛍光を複数画像計測して減衰率を測定した。図９は、図４での試験条件と同様に波長２６６ｎｍのパルスレーザー光を照射して、顕微鏡の対物レンズに透過波長５４０ｎｍのバンドパスフィルターを使用して観察したクリソタイルとガラスウールの二つの粒子の実際の蛍光画像である。図９は、レーザー誘起蛍光をレーザー照射直後から経過時間０ｎｓにおいてカメラ露出時間５ｎｓで観察したものである。図中左の粒子はクリソタイル、右はガラスウールである。ガラスウールはクリソタイルよりもレーザー誘起蛍光量が格段に多いためガラスウールの画像はクリソタイルのものよりも顕著に輝度が高かった。
【００４４】
この経過時間でのそれぞれの粒子の蛍光強度を基準にして経過時間を増やして画像中の各粒子の輝度の高い領域の蛍光強度の減衰率を計測し、バルク試料を用いた分光試験で得られたものと比較した。その結果を図１０に示す。図１０では、顕微鏡観察試験での粒子からの蛍光強度の減衰率とともに図４及び図５の分光スペクトル計測試験から得られた波長５４０ｎｍでの減衰率の曲線を同時に示す。顕微鏡観察試験で計測した粒子からの蛍光の各経過時間での減衰率は、図４及び図５での分光試験のものと同様の値を示した。図１０に示すようにクリソタイル及びガラスウールとも顕微鏡観察試験での減衰率は、バルク試料を使用した分光試験の減衰率とほぼ完全に一致した。さらに、別の波長域で確認するため透過波長４５０ｎｍのバンドパスフィルターを用いて同様に減衰率を計測し比較した結果でも、透過波長５４０ｎｍのバンドパスフィルターでの顕微鏡観察試験結果と同様に図４及び図５の分光試験でのクリソタイルとガラスウールの減衰率が顕微鏡観察での各々の経過時間での減衰率と一致した。
【００４５】
以上より、バルク試料を用いた分光試験での減衰率と顕微鏡観察による粒子からの蛍光計測の減衰率とほぼ一致することが確認できた。よって、実際に図７に例示した顕微鏡観察下でも上述の蛍光の減衰率比較によってアスベスト粒子を識別する手法が適用可能であることの確証が得られた。
【産業上の利用可能性】
【００４６】
本発明は、大気中に浮遊するアスベストを含むエアロゾルを捕集し、アスベストの同定、計数を行う環境分析産業分野、または、建築材料中に含有されるアスベストを分析する材料分析産業分野などで利用することができる。さらに、建屋解体時におけるアスベストの大量処理処分等を行う廃棄物処理産業でのアスベスト分析、アスベストの健康被害、人体影響等を調査する医療分野等で利用できる。
【００４７】
また、本発明のアスベスト識別方法と顕微鏡法等の従来技術とを結合させることで、分析時間の大幅な短縮と計測精度の向上を図ることができる。さらに、アスベスト計測の自動化も可能である。本発明は、アスベスト計測に係る作業効率と計測精度を飛躍的に向上させ、これまでよりも正確にアスベストの迅速識別を可能とする。結果として、本発明を用いることにより従来よりも正確にアスベストの迅速識別が可能となるめ、本発明はアスベストに係る環境汚染問題の解決に役立てることのできる有効な一つの手段となりうるものと考えられる。
【特許請求の範囲】
【請求項１】
検体試料にレーザー光を照射して検体試料中の物質から発生する任意波長域でのレーザー誘起蛍光の蛍光強度を計測し、所定経過時ごとの当該蛍光強度の減衰率を検出して、あらかじめ作成しておいた所定経過時ごとの基準アスベストの蛍光強度の減衰率とその場で比較し、検体試料中の物質がアスベストであるか否かを識別する、アスベスト識別法。
【請求項２】
前記任意波長域でのレーザー誘起蛍光の蛍光強度の減衰率は、発生したレーザー誘起蛍光を当該任意波長域に光透過特性を有するバンドパスフィルターを通過させ、レーザー照射直後の任意の時間（基準時）に蛍光強度を検出して基準蛍光強度とし、当該任意の時間（基準時）から所定経過時においてレーザー誘起蛍光の蛍光強度を計測し、基準蛍光強度に対する減衰比から求める、請求項１に記載のアスベスト識別法。
【請求項３】
光検出した所定経過時における蛍光強度の減衰率を、各所定経過時におけるアスベストの同一波長域での蛍光強度の減衰率である基準値と比較する、請求項１又は２に記載のアスベスト識別法。
【請求項４】
一つの任意の波長域での所定経過時における蛍光強度の減衰率がアスベストの基準値と同等の場合には、この任意波長域とは異なる波長域での蛍光強度の減衰率をさらに計測して比較する、請求項１〜３のいずれかに記載のアスベスト識別法。
【請求項５】
前記レーザー光は、パルス時間幅が数十ナノ秒以下のパルス発振のレーザー光である、請求項１〜４のいずれかに記載のアスベスト識別法。
【請求項６】
パルス発振のレーザー光源と、
対物レンズの光路中に任意波長域に光透過特性を有するバンドパスフィルターと、
当該バンドバスフィルターにより分離されたレーザー誘起蛍光を二等分するビームスプリッターと、
当該ビームスプリッターにより二等分されたレーザー誘起蛍光をそれぞれ観察する２個の高速ゲート付高感度ＣＣＤカメラと、
を具備する蛍光顕微鏡、及び
当該高速ゲート付高感度ＣＣＤカメラの画像から所定経過時ごとの蛍光強度の減衰率を求める計測制御装置
を具備するアスベスト識別装置。
【請求項７】
微粒子導入部に設けられたパルス発振のレーザー光源と、
任意波長域に光透過特性を有するバンドパスフィルターと、
当該バンドバスフィルターにより分離されたレーザー誘起蛍光を二等分するビームスプリッターと、
当該ビームスプリッターにより二等分されたレーザー誘起蛍光から異なる経過時における蛍光強度を検出する２個の高速ゲート付光検出器と、
当該高速ゲート付光検出器で検出された異なる経過時における蛍光強度から減衰率を求める計測制御装置と、
微粒子導入部に設けられた連続発振のレーザー光源及びレーザー散乱光検出器を具備する微粒子位置検出システムと、
を具備するアスベスト識別装置。
【請求項１】
検体試料にレーザー光を照射して検体試料中の物質から発生する任意波長域でのレーザー誘起蛍光の蛍光強度を計測し、所定経過時ごとの当該蛍光強度の減衰率を検出して、あらかじめ作成しておいた所定経過時ごとの基準アスベストの蛍光強度の減衰率とその場で比較し、検体試料中の物質がアスベストであるか否かを識別する、アスベスト識別法。
【請求項２】
前記任意波長域でのレーザー誘起蛍光の蛍光強度の減衰率は、発生したレーザー誘起蛍光を当該任意波長域に光透過特性を有するバンドパスフィルターを通過させ、レーザー照射直後の任意の時間（基準時）に蛍光強度を検出して基準蛍光強度とし、当該任意の時間（基準時）から所定経過時においてレーザー誘起蛍光の蛍光強度を計測し、基準蛍光強度に対する減衰比から求める、請求項１に記載のアスベスト識別法。
【請求項３】
光検出した所定経過時における蛍光強度の減衰率を、各所定経過時におけるアスベストの同一波長域での蛍光強度の減衰率である基準値と比較する、請求項１又は２に記載のアスベスト識別法。
【請求項４】
一つの任意の波長域での所定経過時における蛍光強度の減衰率がアスベストの基準値と同等の場合には、この任意波長域とは異なる波長域での蛍光強度の減衰率をさらに計測して比較する、請求項１〜３のいずれかに記載のアスベスト識別法。
【請求項５】
前記レーザー光は、パルス時間幅が数十ナノ秒以下のパルス発振のレーザー光である、請求項１〜４のいずれかに記載のアスベスト識別法。
【請求項６】
パルス発振のレーザー光源と、
対物レンズの光路中に任意波長域に光透過特性を有するバンドパスフィルターと、
当該バンドバスフィルターにより分離されたレーザー誘起蛍光を二等分するビームスプリッターと、
当該ビームスプリッターにより二等分されたレーザー誘起蛍光をそれぞれ観察する２個の高速ゲート付高感度ＣＣＤカメラと、
を具備する蛍光顕微鏡、及び
当該高速ゲート付高感度ＣＣＤカメラの画像から所定経過時ごとの蛍光強度の減衰率を求める計測制御装置
を具備するアスベスト識別装置。
【請求項７】
微粒子導入部に設けられたパルス発振のレーザー光源と、
任意波長域に光透過特性を有するバンドパスフィルターと、
当該バンドバスフィルターにより分離されたレーザー誘起蛍光を二等分するビームスプリッターと、
当該ビームスプリッターにより二等分されたレーザー誘起蛍光から異なる経過時における蛍光強度を検出する２個の高速ゲート付光検出器と、
当該高速ゲート付光検出器で検出された異なる経過時における蛍光強度から減衰率を求める計測制御装置と、
微粒子導入部に設けられた連続発振のレーザー光源及びレーザー散乱光検出器を具備する微粒子位置検出システムと、
を具備するアスベスト識別装置。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図８】
【図９】
【図１０】
【公開番号】特開２０１０−７１９８２（Ｐ２０１０−７１９８２Ａ）
【公開日】平成２２年４月２日（２０１０．４．２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−１８４７１７（Ｐ２００９−１８４７１７）
【出願日】平成２１年８月７日（２００９．８．７）
【出願人】（５０５３７４７８３）独立行政法人 日本原子力研究開発機構 (727)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２２年４月２日（２０１０．４．２）
【国際特許分類】
【出願日】平成２１年８月７日（２００９．８．７）
【出願人】（５０５３７４７８３）独立行政法人 日本原子力研究開発機構 (727)
【Ｆターム（参考）】
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