Ｂ／Ｆ洗浄装置
【課題】 反応容器内の反応液を吸引し、洗浄液の吐出／吸引によりＢ／Ｆ洗浄を行なうＢ／Ｆ洗浄装置において、簡単な構成で、吸引状態や吐出状態をリアルタイムにモニタ可能な装置を提供すること。
【解決手段】 反応容器と、前記反応容器を載置する導電性を有した架台と、前記反応容器に液体を吐出する導電性を有した吐出部と前記反応容器に収容された液体を吸引する導電性を有した吸引部を設けた洗浄ノズルと、洗浄ノズルと前記架台との間の静電容量を検出する手段と、前記手段からの出力信号に基づき吐出部による液体の吐出状態と吸引部による液体の吸引状態を判定する判定手段とを備え、かつ吐出部および吸引部が互いに電気的に接触したＢ／Ｆ洗浄装置により、前記課題を解決する。
【解決手段】 反応容器と、前記反応容器を載置する導電性を有した架台と、前記反応容器に液体を吐出する導電性を有した吐出部と前記反応容器に収容された液体を吸引する導電性を有した吸引部を設けた洗浄ノズルと、洗浄ノズルと前記架台との間の静電容量を検出する手段と、前記手段からの出力信号に基づき吐出部による液体の吐出状態と吸引部による液体の吸引状態を判定する判定手段とを備え、かつ吐出部および吸引部が互いに電気的に接触したＢ／Ｆ洗浄装置により、前記課題を解決する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、反応容器内の反応液を吸引し、洗浄液の吐出／吸引によりＢ／Ｆ（Ｂｏｕｎｄ／Ｆｒｅｅ）洗浄を行なうＢ／Ｆ洗浄装置に係る。特に本発明は、吸引状態や吐出状態を判定可能なＢ／Ｆ洗浄装置に係る。
【背景技術】
【０００２】
固液反応をともなう不均一反応系の抗原抗体反応を利用して、試料中の成分分析を行なう免疫測定装置において、固液反応後の反応液の除去および固相担体の洗浄を行なうＢ／Ｆ（Ｂｏｕｎｄ／Ｆｒｅｅ）洗浄は、測定結果の感度、再現性等の基本的性能に重要な役割を担っている。
【０００３】
Ｂ／Ｆ洗浄を行なう装置は、通常、液体を吸引する吸引ノズルと洗浄液を吐出する吐出ノズルを備えている。吸引または吐出の際、ノズルに目詰まりが発生したり、吐出する洗浄液に気泡が混入する等の動作不良が生じると、反応容器から液体があふれたり、洗浄不足となるため、測定結果の信頼性が損なわれ、また検査の誤判定を導くおそれが生じる。
【０００４】
洗浄装置における吐出ノズルや吸引ノズルの目詰まりを検知する方法については、特許文献１に開示されている。特許文献１に開示の洗浄装置は、導電性材料を含む吸引ノズルと、導電性材料を含む、洗浄対象のウェルを載置するための台との間の静電容量を計測する機構を有している。吸引ノズルの詰まりは、吸引前後の液面検知により吸引動作後に判定することができる。一方、吐出ノズルの詰まりは、吐出動作後の吸引ノズルによる液面検知によって判定することができる。すなわち、特許文献１の洗浄装置における目詰まりの検知は、吐出動作時や吸引動作時の異常を実時間でモニタリングするものではなく、吸引動作および吐出動作の結果が、正常動作した場合に得られたはずの状態（液面）と一致するかどうかを動作終了後に確認している。また検知する際、吐出ノズルまたは吸引ノズルの詰まりを検知する位置まで、吸引ノズルを移動させる動作が必要となる。
【０００５】
一方、種々の性状の試料を採取したり所定量の液体を移送する分注装置の分野においては、液体の正確な採取は重要な課題であり、特許文献２には、吸引配管中の圧力を検知することで、吸引動作の異常を実時間で直接モニタリングする方法が開示されている。また特許文献３には、静電容量による液面検知結果を圧力モニタによって確認する、液面検知装置を備えた分注装置が開示されている。しかし、圧力モニタの機構を備えるにはスペースやコストの面で課題が残る。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２００８−１６１８３３号公報
【特許文献２】特開２００６−３００８４３号公報
【特許文献３】特開２００７−２８５８８８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
Ｂ／Ｆ（Ｂｏｕｎｄ／Ｆｒｅｅ）洗浄装置も分注装置も液体を吸引して吐出するという機能では共通している。しかしながら、分注装置では１回の試料測定に対して試料採取（分注）を１回行なえばよいのに対し、Ｂ／Ｆ洗浄装置では１回の試料測定に対して吸引吐出操作を３回から６回程度必要とする。すなわち、動作頻度が、Ｂ／Ｆ洗浄装置は分注装置の３倍から６倍となる。一方、吸引量や吐出量の正確性については、分注装置は最高の正確性が要求されるのに対し、Ｂ／Ｆ洗浄装置は一定量の吸引／吐出を目詰まりなく速やかに行なうことができればよく、正確性の要求は分注装置ほど高くない。以上をまとめると、分注装置は動作頻度が比較的少ないため、動作時間に余裕がある。そのため分注後に吸引量や吐出量の精密な検証が可能である。一方、Ｂ／Ｆ洗浄装置は動作頻度が高いため、洗浄操作終了後に吸引／吐出の成否を確認するよりも、吸引／吐出の成否を洗浄操作中にリアルタイムにモニタすることが望まれる。
【０００８】
そこで本発明は、反応容器内の反応液を吸引し、洗浄液の吐出／吸引によりＢ／Ｆ洗浄を行なうＢ／Ｆ洗浄装置において、簡単な構成で、吸引状態や吐出状態をリアルタイムにモニタ可能な装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
上記課題を解決するため、吸引状態および吐出状態を、ともに静電容量を用いて検出することに着目して検討を重ねた結果、本発明に到達した。
【００１０】
すなわち本発明の第一の態様は、
反応容器と、前記反応容器を載置する架台と、前記反応容器に液体を吐出する吐出部および前記反応容器に収容された液体を吸引する吸引部を設けた洗浄ノズルと、を備えたＢ／Ｆ洗浄装置であって、
洗浄ノズルに設けた前記吐出部および前記吸引部、ならびに前記架台が導電性を有しており、
前記吐出部および前記吸引部が互いに電気的に接触しており、かつ、
洗浄ノズルと前記架台との間の静電容量を検出する手段と、前記手段からの出力信号に基づき前記吐出部による液体の吐出状態および前記吸引部による液体の吸引状態を判定する判定手段とをさらに備えた、前記洗浄装置である。
【００１１】
また本発明の第二の態様は、
前記第一の態様に記載の洗浄装置を用いて吐出状態における静電容量の経時変化を測定し、
前記経時変化を、あらかじめ判定手段に記録した正常な吐出状態における静電容量の経時変化と比較することで、
洗浄ノズルに設けた吐出部による液体の吐出状態を判定する方法である。
【００１２】
また本発明の第三の態様は、
前記第一の態様に記載の洗浄装置を用いて吸引状態における静電容量の経時変化を測定し、
前記経時変化を、あらかじめ判定手段に記録した正常な吸引状態における静電容量の経時変化と比較することで、
洗浄ノズルに設けた吸引部による液体の吸引状態を判定する方法である。
【００１３】
以下、本発明を詳細に説明する。
【００１４】
本発明の洗浄装置に備える洗浄ノズルのうち、吐出部と吸引部は、静電容量を測定する際、一方の電極を構成することから、導電性を有した材料である必要がある。ただし、その材料については特定の材質に限定されることはなく、一例として、長期間液体に接触しても腐食や変質しにくいステンレス鋼の管体、耐薬品性に優れた導電性プラスチック（例えば、カーボンを練りこんだポリエーテルエーテルケトン）の管体、プラスチック製の管体に金属メッキを施したもの、があげられる。
【００１５】
本発明の洗浄装置に備える洗浄ノズルのうち、吐出部と吸引部は互いに電気的に接触した状態で固定されている。さらに吐出部と吸引部とが互いに略平行状態で固定されており、かつ固定した吐出部と吸引部を、反応容器を載置する架台に対し鉛直方向に保持すると、静電容量を正確に測定できる点で好ましい。また、当該固定した吐出部と吸引部のうち、吸引部の先端を吐出部の先端よりも架台側に（下側に）突き出た構造とすると、吸引部による反応容器に収容された液体の吸引時に、吐出部の先端が反応容器に収容された液体と接触し汚染されるリスクが低減するため好ましい。
【００１６】
吸引部と吐出部とを互いに電気的に接触した状態で固定させる方法の一例として、吸引部と吐出部とを導電性の基体を用いて固定させることで基端部を一体化する方法があげられる。前記基体は、吐出部の配管と洗浄液を送液する手段、および吸引部の配管と吸引のための真空手段をそれぞれ接続するための２本の連通管を内部に有した構造とすると好ましい。吸引部と吐出部とを互いに電気的に接触した状態で固定させる方法の別の例として、吸引部の先端を吐出部の先端よりも架台側に（下側に）突き出た状態で吸引部と吐出部とを導電性のクランプ手段を用いて固定させる方法があげられる。前記基材またはクランプ手段は、反応容器を載置する架台に対し鉛直方向に保持し、かつ上下方向に移動可能な駆動手段と接続すればよい。
【００１７】
本発明の洗浄装置では、洗浄ノズルに設けた吐出部または吸引部を一方の電極とし、Ｂ／Ｆ洗浄を行なう反応容器を載置する導電性の架台を他方の電極として、吐出部または吸引部と反応容器に収容された液体との接触／非接触に基づく過渡現象を静電容量の変化として検出する。静電容量を検出する手段として、静電容量の変化を検出するためのコルピッツ型発振回路等の、発振器を設けた公知の手段を用いることができる。なお通常は、反応容器を載置する架台を接地した回路で構成される。静電容量を検出する手段に設けた発振器の発振条件は回路基盤に実装されるコイルと洗浄ノズル周辺の浮遊容量に基づき決定すればよい。また、静電容量を検出する手段と、吸引部と吐出部を固定するのに用いた基体またはクランプ手段等との間は同軸ケーブルで接続すると好ましい。前記ケーブルの長さ、ケーブルと洗浄ノズルとの接続や固定方法等の条件は、予備的に作製した回路の有意な出力とノイズを考慮し、適宜決定すればよい。
【００１８】
静電容量を検出する手段から出力された静電容量の変化を、電圧計、電流計、マルチテスタ等公知の信号変換回路およびアナログ・ディジタル変換回路等を介して、判定手段に入力し、洗浄ノズルによる液体の吐出または吸引が正常に行なわれているかを判定する。判定手段には、信号波形の各種演算、閾値との比較による判定、判定結果の記録、判定結果のデータベース化等を行なう手段を設けており、通常はコンピュータがその役割を受けもつが、専用の演算回路を構成してもよい。
【００１９】
本発明の洗浄装置において、Ｂ／Ｆ洗浄の際に吐出部から吐出する洗浄液としては、抗体を固定化した固相担体と試料中の抗原との抗原抗体反応により形成された抗原抗体複合体を再解離することなく、かつ固相担体からの抗体の剥離がない条件で、適切な電解質濃度、適切なｐＨ、適切な界面活性剤の種類や濃度等を選択すればよい。
【発明の効果】
【００２０】
本発明のＢ／Ｆ（Ｂｏｕｎｄ／Ｆｒｅｅ）洗浄装置は、反応容器と、前記反応容器を載置する導電性を有した架台と、前記反応容器に液体を吐出する導電性を有した吐出部と前記反応容器に収容された液体を吸引する導電性を有した吸引部を設けた洗浄ノズルと、洗浄ノズルと前記架台との間の静電容量を検出する手段と、前記手段からの出力信号に基づき吐出部による液体の吐出状態と吸引部による液体の吸引状態を判定する判定手段とを備え、かつ吐出部および吸引部が互いに電気的に接触していることを特徴としている。本発明のＢ／Ｆ洗浄装置は、反応容器に収容された液体（例えば、抗原抗体反応後の反応液や洗浄液）が正しく吐出／吸引されているかを、静電容量の経時変化に基づき、洗浄操作中にリアルタイムにモニタ（判定）できるという利点を有している。また本発明のＢ／Ｆ分離装置は、吸引部と吐出部とが互いに電気的に接触しているため、一つの静電容量検出手段で吐出部と吸引部の目詰まりを検知できる。そのため、機械構成が簡単であり、装置の保守面、コスト面でも有利である。
【００２１】
Ｂ／Ｆ洗浄における吸引工程では反応容器に収容された液体を全量吸い尽くしたいので、一定の液量を吸引した吸引部は、正常な吸引を達成した前後に、反応容器の液面に対して接した状態から離れた状態に移行する。しかしながら、吸引部が目詰まりを起こしているときは、仮に正常な吸引であれば吸引が終了しているであろう時間が経過した後でも、吸引ノズルは接液状態のままである。このため、静電容量の波形は正常吸引の場合とは明らかに異なったものとなり、異常吸引であると判定できる。また、吸引ノズルを液中に浸漬したうえで、液体を吸引している状態と、ノズル詰まりのために吸引していない状態とに関しても、ノズル管内の溶液の有無によって静電容量が変化するので、本発明の洗浄装置によって直接判定することができる。
【００２２】
一方Ｂ／Ｆ洗浄における吐出工程では、汚染を避けるため吐出部を反応容器の液面から離した状態で吐出する。そのため吸引工程では吸引部の接液状態を直接検知するのに対し、吐出工程では吐出中に吐出部先端と反応容器の液面との間に形成される液柱を介した間接的な接液状態を検知することになる。通常Ｂ／Ｆ洗浄における吐出工程では、液柱が形成される程度の吐出量で吐出するが、吐出部に目詰まりが生じ吐出量が低下すると液柱が形成されず液滴状態となるため、静電容量の経時変化は正常吐出時と比較し明らかに異なる変化を示す。したがって、本発明のＢ／Ｆ洗浄装置により吐出不良を吐出した瞬間に判定することができる。また、吐出部の目詰まりにより吐出量が低下したものの液柱は形成されている場合であっても、本発明のＢ／Ｆ洗浄装置による静電容量の経時変化の検出は再現性がすぐれているため、正常吐出時の静電容量の経時変化をあらかじめ判定手段に記憶させた上で、前記記憶させた経時変化と、判定対象の吐出における静電容量の経時変化とを比較することで、吐出不良を判定することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】本発明のＢ／Ｆ洗浄装置の一例を示す概略図である。
【図２】本発明のＢ／Ｆ洗浄装置に備えた洗浄ノズルによる吐出のうち、液柱を形成して吐出する状態を示す模式図である。
【図３】本発明のＢ／Ｆ洗浄装置に備えた洗浄ノズルによる吐出のうち、液滴を形成して吐出する状態を示す模式図である。
【図４】実施例２の結果を示した図である。（ａ）は静電容量（検出器出力）の経時変化を、（ｂ）は静電容量（検出器出力）の積分値の経時変化を、それぞれ示している。
【図５】実施例３の結果を示した図である。（ａ）は正常吐出時および気泡混入時における静電容量（検出器出力）の経時変化を、（ｂ）は気泡混入時における静電容量（検出器出力）と正常吐出時における静電容量（検出器出力）との差分を、それぞれ示している。
【図６】実施例４の結果を示した図である。
【図７】本発明のＢ／Ｆ洗浄装置を用いてＢ／Ｆ洗浄を行なった場合の静電容量（検出器出力）の経時変化の一例を示す図である。
【実施例】
【００２４】
以下実施例により本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
【００２５】
実施例１ 本発明のＢ／Ｆ洗浄装置
以降の実施例で使用した、本発明のＢ／Ｆ（Ｂｏｕｎｄ／Ｆｒｅｅ）洗浄装置を図１に示す。図１に示す装置は、
吐出部１１と吸引部１２を設けた洗浄ノズル１０と、
Ｂ／Ｆ洗浄を行なう液体を収容した反応容器２０を載置する接地架台３０と、
発振器５１と電流測定部５２と電源５３を設けた静電容量検出手段（検出器）５０と、
演算部６１と記録部６２を設けた判定手段６０と、
を備えている。
【００２６】
洗浄ノズル１０は導電性の基体１３を介して、吐出部１１と吸引部１２とが一体化した構造となっており、吐出部１１は、外径φ１．４８ｍｍ、内径φ１．１２ｍｍ、長さ１６ｍｍのステンレス製配管であり、吸引部１２は、外径φ１．４８ｍｍ、内径φ１．１２ｍｍ、長さ３５ｍｍのステンレス製配管である。また吐出部１１にはステッピングモータ駆動のシリンジポンプを設けた洗浄液送液手段（不図示）が、吸引部１２には反応容器に収容した液体を吸引可能な真空手段および廃液入れ（不図示）が、それぞれ接続されている。さらに洗浄ノズル１０には、架台３０に対し鉛直方向に保持した状態で上下および水平方向に移動可能な駆動手段（不図示）も設けており、当該駆動手段はステッピングモータにより制御され、吸引部１２先端が反応容器２０内の底面に衝突したときの緩衝手段も備えている。
【００２７】
静電容量検出手段５０と洗浄ノズル１０の間を同軸ケーブル４０（内部導体径φ０．２ｍｍ、保護被覆径φ２．０ｍｍ、長さ１５０ｍｍ）で接続し、接地架台３０も静電容量検出手段５０と接続する（不図示）。静電容量検出手段５０に設けた発振器５１の発振条件は、基板（不図示）に実装されるコイル・コンデンサ（不図示）と洗浄ノズル１０周囲の浮遊容量で決まり、例えば約５０ＭＨｚの高周波で発振する。
【００２８】
静電容量検出手段５０に設けた電流測定部５２により、静電容量の変化に基づき出力された電圧は、信号変換回路（不図示）およびアナログ・ディジタル変換回路（不図示）を介して判定手段６０に供される。通常、判定手段６０はコンピュータが受けもつ。判定手段６０に設ける記録部６２は閾値の記録、判定結果の記録等を行ない、演算部６１は信号波形の積分演算、信号波形同士の差分演算、記録部６２から読み出した閾値と測定データとの比較演算を行なう。
【００２９】
実施例２ 吐出動作における静電容量変化
図１に示すＢ／Ｆ洗浄装置を用いて、吐出動作による静電容量の変化を確認した。具体的には、吐出部１１先端を反応容器２０の底から２０ｍｍの高さに保った状態で、洗浄液（０．１Ｍ ＮａＣｌと０．０５％ ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレートを含むトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．０））を、吐出速度２４７μＬ／ｓ、４０６μＬ／ｓまたは６００μＬ／ｓでそれぞれ５００μＬ吐出し、静電容量の変化を測定した。なお、吐出速度６００μＬ／ｓが正常な吐出を想定したものであり、吐出速度２４７μＬ／ｓおよび４０６μＬ／ｓは吐出不良が生じた場合を想定したものである。吐出速度６００μＬ／ｓおよび４０６μＬ／ｓの場合は液柱を形成する態様で洗浄液が吐出され（図２）、吐出速度２４７μＬ／ｓの場合は液滴状に洗浄液が吐出された（図３）。
【００３０】
検出器から出力された静電容量の経時変化を図４（ａ）に示す。吐出速度２４７μＬ／ｓの場合は、吐出中も静電容量（検出器出力）の大きな変化は見られず、約０．１５秒の一定周期で、液滴に起因すると思われる下向きヒゲ状の小さな波形変化が確認された。一方、吐出速度４０６μＬ／ｓおよび６００μＬ／ｓの場合は、切り出し刀状の大きな波形が確認された。具体的には、吐出開始直後に静電容量（検出器出力）が急低下した後、１．７５Ｖ付近からは０．７５Ｖ付近まで鋭角状に一定の割合で静電容量（検出器出力）が低下し、０．７５Ｖ付近で液柱の消失により吐出開始前の静電容量（検出器出力）に復帰している。吐出した洗浄液量はいずれも５００μＬであることから、１．７５Ｖ付近から０．７５Ｖ付近までの領域における静電容量（検出器出力）低下の割合は、洗浄液の吐出により反応容器内の液面が上昇することに対応した静電容量変化を示すものと推定され、静電容量（検出器出力）低下の割合は吐出速度と相関する。したがって、静電容量検出器における出力低下の割合から吐出速度を見積もることで、吐出速度の低下を確認することができる。
【００３１】
図４（ａ）の結果を基に、吐出開始前の検出器に出力された静電容量（２．６５Ｖ）との差分を時間で積分した値を計算して得られたグラフを図４（ｂ）に示す。吐出速度が減少するに従い、吐出時間に対する積分値の絶対値は減少傾向にあることがわかる。すなわち、正常な吐出速度である６００μＬ／ｓでの、吐出時間に対する検出器に出力された静電容量の積分値のグラフをあらかじめ用意し、当該グラフに基づき、一定の閾値（例えば、吐出開始０．７秒後における出力積分値−０．９５Ｖｓ）を設定することで、出力積分値の絶対値が一定の閾値を下回る（例えば、吐出速度４０６μＬ／ｓ）場合に、吐出不良と判定することができる。なお、吐出速度４０６μＬ／ｓも正常吐出とみなし、液滴状に吐出した場合（例えば、吐出速度２４７μＬ／ｓ）のみ吐出不良と判定する場合は、閾値の設定は容易となる。
【００３２】
実施例３ 吐出動作の気泡混入の評価
図１に示すＢ／Ｆ洗浄装置を用いて、実施例２と同様、吐出部１１先端を反応容器２０の底から２０ｍｍの高さに保った状態で、洗浄液を吐出速度６００μＬ／ｓで５００μＬ吐出した。吐出部配管に気泡が混入した場合と混入しない（正常に吐出された）場合における静電容量の変化を測定し、正常に吐出された場合の静電容量（検出器出力）値との差分を逐次演算した。
【００３３】
正常吐出時の静電容量（検出器出力）の経時変化を示すグラフと、気泡混入時の静電容量（検出器出力）の経時変化を示すグラフとを重ねたものを図５（ａ）に示し、気泡混入時と正常吐出時とで静電容量（検出器出力）の差分を逐次演算した結果を図５（ｂ）に示す。なお図５（ａ）のうち、正常吐出時の静電容量（検出器出力）の経時変化は、２回測定した結果の平均値とした。また図５（ｂ）のうち、吐出開始後の０．１秒間と吐出終了時前の０．１秒間は、静電容量値が大きく変動するため演算範囲から省いた。
【００３４】
図５（ａ）では吐出開始０．５秒後に気泡混入に由来する静電容量（検出器出力）の変化が確認できるが、正常吐出時における静電容量（検出器出力）との差分に一定の閾値（例えば、０．５Ｖ）を設定することで、気泡が混入しているかを判定することができる。
【００３５】
実施例４ 吸い残しの検知
図１に示すＢ／Ｆ洗浄装置のうち、反応容器２０に収容した液体を吸引部１２により吸引した後の残液量の検知について検討した。
【００３６】
反応容器２０として、内径が約５ｍｍ、高さ約２０ｍｍのポリプロピレン製円筒容器を用意し、当該容器の中に、実施例２で使用した洗浄液０μＬ、１μＬ、３μＬ、５μＬ、１０μＬ、２０μＬをそれぞれ加えた。吸引部１２を反応容器２０の底まで降下させ、静電容量出力を測定した。反応容器２０に加えた洗浄液量と静電容量出力との関係を図６に示す。図６から、例えば、静電容量出力の閾値を３．０Ｖに設定することで、反応容器２０に１μＬ以上の洗浄液が残存している（すなわち吸い残している）ことを検知することができる。
【００３７】
実施例５ Ｂ／Ｆ洗浄動作の出力波形
図１に示すＢ／Ｆ洗浄装置において、まず反応容器２０に洗浄液（実施例２と同じ組成）１００μＬを加えた後、吸引部１２による１００μＬ吸引（操作ａ）、吐出部１１による１００μＬ吐出（操作ｂ）、吸引部１２による１００μＬ吸引（操作ｃ）、吐出部１１による４００μＬ吐出（操作ｄ）、吸引部１２による４００μＬ吸引（操作ｅ）、吐出部１１による４００μＬ吐出（操作ｆ）、吸引部１２による４００μＬ吸引（操作ｇ）、吐出部１１による４００μＬ吐出（操作ｈ）後、洗浄ノズル１０を洗浄ポートに搬送した。前記一連の操作を行なったときの静電容量（検出器出力）変化の一例を図７に示す。なお図７のうち、記号は前述した操作の記号に対応する。
【００３８】
吐出部１１により洗浄液を４００μＬ吐出した（操作ｄ、ｆおよびｈ）時の波形は、図４および５と同様、吐出後に静電容量（検出器出力）が一定割合で低下する切り出し刀状の形状を示している。図７における操作ｄ、ｆおよびｈの波形から算出したピーク面積の平均は０．９２４Ｖｓであり、変動係数（ＣＶ）も１．１％と極めて良好な再現性を示した。
【００３９】
一方、吸引部１２により洗浄液を吸引した（操作ａ、ｃ、ｅおよびｇ）時の波形は、吐出時の波形とは反対側を向いた切り出し刀状の形状を示している。これは、吸引動作の進行に伴い、反応容器２０内の液面が低下することに応じた、静電容量の変化を示すものと推定される。図７において、１００μＬ吸引したとき（操作ａおよびｃ）の波形から算出したピーク面積はそれぞれ、０．４８６Ｖｓ，０．６９７Ｖｓであり、４００μＬ吸引したとき（操作ｅおよびｇ）の波形から算出したピーク面積はそれぞれ、１．２２Ｖｓ，０．９８７Ｖｓであった。吸引時の出力波形が、吐出時の出力波形と比較し再現性が良好でない理由として、吸引部１２による吸引操作では吐出部１１にはない洗浄液の浸漬動作があること、および吸引終了時に反応容器２０に残留した洗浄液と吸引部１２との接触状態のばらつきがあること、に由来するものと思われる。
【００４０】
図７と同じ条件で合計５回のＢ／Ｆ洗浄操作を行ない、それぞれ波形出力データを取得した。操作ａからｈでの波形から算出したピーク面積の平均と変動係数（ＣＶ）を表１に示す。吐出部１１による洗浄液の吐出操作（操作ｄ、ｆおよびｈ）時は、いずれもピーク面積のＣＶが５％以下と良好な再現性が得られた、一方、吸引部１２による洗浄液の吸引操作（操作ａ、ｃ、ｅおよびｇ）時は、ピーク面積のＣＶが１０％を超える操作も見られたものの、吸引による液面低下に対応する特徴的な静電容量変化は共通して観察された。よって、Ｂ／Ｆ洗浄装置に求められる性能、すなわち一定量の吸引／吐出を目詰まりなく速やかに実施できる性能を確認する際は、ピーク面積のＣＶが１０％を超える吸引波形のばらつきがあっても確認作業には影響を与えないことがわかる。
【表１】
【００４１】
以上のように、図１に代表される本発明のＢ／Ｆ洗浄装置は、Ｂ／Ｆ洗浄中の吸引／吐出操作を再現性よくモニタすることができるため、閾値を用いた判定または波形比較による判定により、Ｂ／Ｆ洗浄動作の異常を早期に発見することができる。
【符号の説明】
【００４２】
１０：洗浄ノズル
１１：吐出部
１２：吸引部
１３：基体
２０：反応容器
３０：接地架台
４０：同軸ケーブル
５０：静電容量検出手段
５１：発振器
５２：電流測定部
５３：電源
６０：判定手段
６１：演算部
６２：記録部
【技術分野】
【０００１】
本発明は、反応容器内の反応液を吸引し、洗浄液の吐出／吸引によりＢ／Ｆ（Ｂｏｕｎｄ／Ｆｒｅｅ）洗浄を行なうＢ／Ｆ洗浄装置に係る。特に本発明は、吸引状態や吐出状態を判定可能なＢ／Ｆ洗浄装置に係る。
【背景技術】
【０００２】
固液反応をともなう不均一反応系の抗原抗体反応を利用して、試料中の成分分析を行なう免疫測定装置において、固液反応後の反応液の除去および固相担体の洗浄を行なうＢ／Ｆ（Ｂｏｕｎｄ／Ｆｒｅｅ）洗浄は、測定結果の感度、再現性等の基本的性能に重要な役割を担っている。
【０００３】
Ｂ／Ｆ洗浄を行なう装置は、通常、液体を吸引する吸引ノズルと洗浄液を吐出する吐出ノズルを備えている。吸引または吐出の際、ノズルに目詰まりが発生したり、吐出する洗浄液に気泡が混入する等の動作不良が生じると、反応容器から液体があふれたり、洗浄不足となるため、測定結果の信頼性が損なわれ、また検査の誤判定を導くおそれが生じる。
【０００４】
洗浄装置における吐出ノズルや吸引ノズルの目詰まりを検知する方法については、特許文献１に開示されている。特許文献１に開示の洗浄装置は、導電性材料を含む吸引ノズルと、導電性材料を含む、洗浄対象のウェルを載置するための台との間の静電容量を計測する機構を有している。吸引ノズルの詰まりは、吸引前後の液面検知により吸引動作後に判定することができる。一方、吐出ノズルの詰まりは、吐出動作後の吸引ノズルによる液面検知によって判定することができる。すなわち、特許文献１の洗浄装置における目詰まりの検知は、吐出動作時や吸引動作時の異常を実時間でモニタリングするものではなく、吸引動作および吐出動作の結果が、正常動作した場合に得られたはずの状態（液面）と一致するかどうかを動作終了後に確認している。また検知する際、吐出ノズルまたは吸引ノズルの詰まりを検知する位置まで、吸引ノズルを移動させる動作が必要となる。
【０００５】
一方、種々の性状の試料を採取したり所定量の液体を移送する分注装置の分野においては、液体の正確な採取は重要な課題であり、特許文献２には、吸引配管中の圧力を検知することで、吸引動作の異常を実時間で直接モニタリングする方法が開示されている。また特許文献３には、静電容量による液面検知結果を圧力モニタによって確認する、液面検知装置を備えた分注装置が開示されている。しかし、圧力モニタの機構を備えるにはスペースやコストの面で課題が残る。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２００８−１６１８３３号公報
【特許文献２】特開２００６−３００８４３号公報
【特許文献３】特開２００７−２８５８８８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
Ｂ／Ｆ（Ｂｏｕｎｄ／Ｆｒｅｅ）洗浄装置も分注装置も液体を吸引して吐出するという機能では共通している。しかしながら、分注装置では１回の試料測定に対して試料採取（分注）を１回行なえばよいのに対し、Ｂ／Ｆ洗浄装置では１回の試料測定に対して吸引吐出操作を３回から６回程度必要とする。すなわち、動作頻度が、Ｂ／Ｆ洗浄装置は分注装置の３倍から６倍となる。一方、吸引量や吐出量の正確性については、分注装置は最高の正確性が要求されるのに対し、Ｂ／Ｆ洗浄装置は一定量の吸引／吐出を目詰まりなく速やかに行なうことができればよく、正確性の要求は分注装置ほど高くない。以上をまとめると、分注装置は動作頻度が比較的少ないため、動作時間に余裕がある。そのため分注後に吸引量や吐出量の精密な検証が可能である。一方、Ｂ／Ｆ洗浄装置は動作頻度が高いため、洗浄操作終了後に吸引／吐出の成否を確認するよりも、吸引／吐出の成否を洗浄操作中にリアルタイムにモニタすることが望まれる。
【０００８】
そこで本発明は、反応容器内の反応液を吸引し、洗浄液の吐出／吸引によりＢ／Ｆ洗浄を行なうＢ／Ｆ洗浄装置において、簡単な構成で、吸引状態や吐出状態をリアルタイムにモニタ可能な装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
上記課題を解決するため、吸引状態および吐出状態を、ともに静電容量を用いて検出することに着目して検討を重ねた結果、本発明に到達した。
【００１０】
すなわち本発明の第一の態様は、
反応容器と、前記反応容器を載置する架台と、前記反応容器に液体を吐出する吐出部および前記反応容器に収容された液体を吸引する吸引部を設けた洗浄ノズルと、を備えたＢ／Ｆ洗浄装置であって、
洗浄ノズルに設けた前記吐出部および前記吸引部、ならびに前記架台が導電性を有しており、
前記吐出部および前記吸引部が互いに電気的に接触しており、かつ、
洗浄ノズルと前記架台との間の静電容量を検出する手段と、前記手段からの出力信号に基づき前記吐出部による液体の吐出状態および前記吸引部による液体の吸引状態を判定する判定手段とをさらに備えた、前記洗浄装置である。
【００１１】
また本発明の第二の態様は、
前記第一の態様に記載の洗浄装置を用いて吐出状態における静電容量の経時変化を測定し、
前記経時変化を、あらかじめ判定手段に記録した正常な吐出状態における静電容量の経時変化と比較することで、
洗浄ノズルに設けた吐出部による液体の吐出状態を判定する方法である。
【００１２】
また本発明の第三の態様は、
前記第一の態様に記載の洗浄装置を用いて吸引状態における静電容量の経時変化を測定し、
前記経時変化を、あらかじめ判定手段に記録した正常な吸引状態における静電容量の経時変化と比較することで、
洗浄ノズルに設けた吸引部による液体の吸引状態を判定する方法である。
【００１３】
以下、本発明を詳細に説明する。
【００１４】
本発明の洗浄装置に備える洗浄ノズルのうち、吐出部と吸引部は、静電容量を測定する際、一方の電極を構成することから、導電性を有した材料である必要がある。ただし、その材料については特定の材質に限定されることはなく、一例として、長期間液体に接触しても腐食や変質しにくいステンレス鋼の管体、耐薬品性に優れた導電性プラスチック（例えば、カーボンを練りこんだポリエーテルエーテルケトン）の管体、プラスチック製の管体に金属メッキを施したもの、があげられる。
【００１５】
本発明の洗浄装置に備える洗浄ノズルのうち、吐出部と吸引部は互いに電気的に接触した状態で固定されている。さらに吐出部と吸引部とが互いに略平行状態で固定されており、かつ固定した吐出部と吸引部を、反応容器を載置する架台に対し鉛直方向に保持すると、静電容量を正確に測定できる点で好ましい。また、当該固定した吐出部と吸引部のうち、吸引部の先端を吐出部の先端よりも架台側に（下側に）突き出た構造とすると、吸引部による反応容器に収容された液体の吸引時に、吐出部の先端が反応容器に収容された液体と接触し汚染されるリスクが低減するため好ましい。
【００１６】
吸引部と吐出部とを互いに電気的に接触した状態で固定させる方法の一例として、吸引部と吐出部とを導電性の基体を用いて固定させることで基端部を一体化する方法があげられる。前記基体は、吐出部の配管と洗浄液を送液する手段、および吸引部の配管と吸引のための真空手段をそれぞれ接続するための２本の連通管を内部に有した構造とすると好ましい。吸引部と吐出部とを互いに電気的に接触した状態で固定させる方法の別の例として、吸引部の先端を吐出部の先端よりも架台側に（下側に）突き出た状態で吸引部と吐出部とを導電性のクランプ手段を用いて固定させる方法があげられる。前記基材またはクランプ手段は、反応容器を載置する架台に対し鉛直方向に保持し、かつ上下方向に移動可能な駆動手段と接続すればよい。
【００１７】
本発明の洗浄装置では、洗浄ノズルに設けた吐出部または吸引部を一方の電極とし、Ｂ／Ｆ洗浄を行なう反応容器を載置する導電性の架台を他方の電極として、吐出部または吸引部と反応容器に収容された液体との接触／非接触に基づく過渡現象を静電容量の変化として検出する。静電容量を検出する手段として、静電容量の変化を検出するためのコルピッツ型発振回路等の、発振器を設けた公知の手段を用いることができる。なお通常は、反応容器を載置する架台を接地した回路で構成される。静電容量を検出する手段に設けた発振器の発振条件は回路基盤に実装されるコイルと洗浄ノズル周辺の浮遊容量に基づき決定すればよい。また、静電容量を検出する手段と、吸引部と吐出部を固定するのに用いた基体またはクランプ手段等との間は同軸ケーブルで接続すると好ましい。前記ケーブルの長さ、ケーブルと洗浄ノズルとの接続や固定方法等の条件は、予備的に作製した回路の有意な出力とノイズを考慮し、適宜決定すればよい。
【００１８】
静電容量を検出する手段から出力された静電容量の変化を、電圧計、電流計、マルチテスタ等公知の信号変換回路およびアナログ・ディジタル変換回路等を介して、判定手段に入力し、洗浄ノズルによる液体の吐出または吸引が正常に行なわれているかを判定する。判定手段には、信号波形の各種演算、閾値との比較による判定、判定結果の記録、判定結果のデータベース化等を行なう手段を設けており、通常はコンピュータがその役割を受けもつが、専用の演算回路を構成してもよい。
【００１９】
本発明の洗浄装置において、Ｂ／Ｆ洗浄の際に吐出部から吐出する洗浄液としては、抗体を固定化した固相担体と試料中の抗原との抗原抗体反応により形成された抗原抗体複合体を再解離することなく、かつ固相担体からの抗体の剥離がない条件で、適切な電解質濃度、適切なｐＨ、適切な界面活性剤の種類や濃度等を選択すればよい。
【発明の効果】
【００２０】
本発明のＢ／Ｆ（Ｂｏｕｎｄ／Ｆｒｅｅ）洗浄装置は、反応容器と、前記反応容器を載置する導電性を有した架台と、前記反応容器に液体を吐出する導電性を有した吐出部と前記反応容器に収容された液体を吸引する導電性を有した吸引部を設けた洗浄ノズルと、洗浄ノズルと前記架台との間の静電容量を検出する手段と、前記手段からの出力信号に基づき吐出部による液体の吐出状態と吸引部による液体の吸引状態を判定する判定手段とを備え、かつ吐出部および吸引部が互いに電気的に接触していることを特徴としている。本発明のＢ／Ｆ洗浄装置は、反応容器に収容された液体（例えば、抗原抗体反応後の反応液や洗浄液）が正しく吐出／吸引されているかを、静電容量の経時変化に基づき、洗浄操作中にリアルタイムにモニタ（判定）できるという利点を有している。また本発明のＢ／Ｆ分離装置は、吸引部と吐出部とが互いに電気的に接触しているため、一つの静電容量検出手段で吐出部と吸引部の目詰まりを検知できる。そのため、機械構成が簡単であり、装置の保守面、コスト面でも有利である。
【００２１】
Ｂ／Ｆ洗浄における吸引工程では反応容器に収容された液体を全量吸い尽くしたいので、一定の液量を吸引した吸引部は、正常な吸引を達成した前後に、反応容器の液面に対して接した状態から離れた状態に移行する。しかしながら、吸引部が目詰まりを起こしているときは、仮に正常な吸引であれば吸引が終了しているであろう時間が経過した後でも、吸引ノズルは接液状態のままである。このため、静電容量の波形は正常吸引の場合とは明らかに異なったものとなり、異常吸引であると判定できる。また、吸引ノズルを液中に浸漬したうえで、液体を吸引している状態と、ノズル詰まりのために吸引していない状態とに関しても、ノズル管内の溶液の有無によって静電容量が変化するので、本発明の洗浄装置によって直接判定することができる。
【００２２】
一方Ｂ／Ｆ洗浄における吐出工程では、汚染を避けるため吐出部を反応容器の液面から離した状態で吐出する。そのため吸引工程では吸引部の接液状態を直接検知するのに対し、吐出工程では吐出中に吐出部先端と反応容器の液面との間に形成される液柱を介した間接的な接液状態を検知することになる。通常Ｂ／Ｆ洗浄における吐出工程では、液柱が形成される程度の吐出量で吐出するが、吐出部に目詰まりが生じ吐出量が低下すると液柱が形成されず液滴状態となるため、静電容量の経時変化は正常吐出時と比較し明らかに異なる変化を示す。したがって、本発明のＢ／Ｆ洗浄装置により吐出不良を吐出した瞬間に判定することができる。また、吐出部の目詰まりにより吐出量が低下したものの液柱は形成されている場合であっても、本発明のＢ／Ｆ洗浄装置による静電容量の経時変化の検出は再現性がすぐれているため、正常吐出時の静電容量の経時変化をあらかじめ判定手段に記憶させた上で、前記記憶させた経時変化と、判定対象の吐出における静電容量の経時変化とを比較することで、吐出不良を判定することができる。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】本発明のＢ／Ｆ洗浄装置の一例を示す概略図である。
【図２】本発明のＢ／Ｆ洗浄装置に備えた洗浄ノズルによる吐出のうち、液柱を形成して吐出する状態を示す模式図である。
【図３】本発明のＢ／Ｆ洗浄装置に備えた洗浄ノズルによる吐出のうち、液滴を形成して吐出する状態を示す模式図である。
【図４】実施例２の結果を示した図である。（ａ）は静電容量（検出器出力）の経時変化を、（ｂ）は静電容量（検出器出力）の積分値の経時変化を、それぞれ示している。
【図５】実施例３の結果を示した図である。（ａ）は正常吐出時および気泡混入時における静電容量（検出器出力）の経時変化を、（ｂ）は気泡混入時における静電容量（検出器出力）と正常吐出時における静電容量（検出器出力）との差分を、それぞれ示している。
【図６】実施例４の結果を示した図である。
【図７】本発明のＢ／Ｆ洗浄装置を用いてＢ／Ｆ洗浄を行なった場合の静電容量（検出器出力）の経時変化の一例を示す図である。
【実施例】
【００２４】
以下実施例により本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
【００２５】
実施例１ 本発明のＢ／Ｆ洗浄装置
以降の実施例で使用した、本発明のＢ／Ｆ（Ｂｏｕｎｄ／Ｆｒｅｅ）洗浄装置を図１に示す。図１に示す装置は、
吐出部１１と吸引部１２を設けた洗浄ノズル１０と、
Ｂ／Ｆ洗浄を行なう液体を収容した反応容器２０を載置する接地架台３０と、
発振器５１と電流測定部５２と電源５３を設けた静電容量検出手段（検出器）５０と、
演算部６１と記録部６２を設けた判定手段６０と、
を備えている。
【００２６】
洗浄ノズル１０は導電性の基体１３を介して、吐出部１１と吸引部１２とが一体化した構造となっており、吐出部１１は、外径φ１．４８ｍｍ、内径φ１．１２ｍｍ、長さ１６ｍｍのステンレス製配管であり、吸引部１２は、外径φ１．４８ｍｍ、内径φ１．１２ｍｍ、長さ３５ｍｍのステンレス製配管である。また吐出部１１にはステッピングモータ駆動のシリンジポンプを設けた洗浄液送液手段（不図示）が、吸引部１２には反応容器に収容した液体を吸引可能な真空手段および廃液入れ（不図示）が、それぞれ接続されている。さらに洗浄ノズル１０には、架台３０に対し鉛直方向に保持した状態で上下および水平方向に移動可能な駆動手段（不図示）も設けており、当該駆動手段はステッピングモータにより制御され、吸引部１２先端が反応容器２０内の底面に衝突したときの緩衝手段も備えている。
【００２７】
静電容量検出手段５０と洗浄ノズル１０の間を同軸ケーブル４０（内部導体径φ０．２ｍｍ、保護被覆径φ２．０ｍｍ、長さ１５０ｍｍ）で接続し、接地架台３０も静電容量検出手段５０と接続する（不図示）。静電容量検出手段５０に設けた発振器５１の発振条件は、基板（不図示）に実装されるコイル・コンデンサ（不図示）と洗浄ノズル１０周囲の浮遊容量で決まり、例えば約５０ＭＨｚの高周波で発振する。
【００２８】
静電容量検出手段５０に設けた電流測定部５２により、静電容量の変化に基づき出力された電圧は、信号変換回路（不図示）およびアナログ・ディジタル変換回路（不図示）を介して判定手段６０に供される。通常、判定手段６０はコンピュータが受けもつ。判定手段６０に設ける記録部６２は閾値の記録、判定結果の記録等を行ない、演算部６１は信号波形の積分演算、信号波形同士の差分演算、記録部６２から読み出した閾値と測定データとの比較演算を行なう。
【００２９】
実施例２ 吐出動作における静電容量変化
図１に示すＢ／Ｆ洗浄装置を用いて、吐出動作による静電容量の変化を確認した。具体的には、吐出部１１先端を反応容器２０の底から２０ｍｍの高さに保った状態で、洗浄液（０．１Ｍ ＮａＣｌと０．０５％ ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレートを含むトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．０））を、吐出速度２４７μＬ／ｓ、４０６μＬ／ｓまたは６００μＬ／ｓでそれぞれ５００μＬ吐出し、静電容量の変化を測定した。なお、吐出速度６００μＬ／ｓが正常な吐出を想定したものであり、吐出速度２４７μＬ／ｓおよび４０６μＬ／ｓは吐出不良が生じた場合を想定したものである。吐出速度６００μＬ／ｓおよび４０６μＬ／ｓの場合は液柱を形成する態様で洗浄液が吐出され（図２）、吐出速度２４７μＬ／ｓの場合は液滴状に洗浄液が吐出された（図３）。
【００３０】
検出器から出力された静電容量の経時変化を図４（ａ）に示す。吐出速度２４７μＬ／ｓの場合は、吐出中も静電容量（検出器出力）の大きな変化は見られず、約０．１５秒の一定周期で、液滴に起因すると思われる下向きヒゲ状の小さな波形変化が確認された。一方、吐出速度４０６μＬ／ｓおよび６００μＬ／ｓの場合は、切り出し刀状の大きな波形が確認された。具体的には、吐出開始直後に静電容量（検出器出力）が急低下した後、１．７５Ｖ付近からは０．７５Ｖ付近まで鋭角状に一定の割合で静電容量（検出器出力）が低下し、０．７５Ｖ付近で液柱の消失により吐出開始前の静電容量（検出器出力）に復帰している。吐出した洗浄液量はいずれも５００μＬであることから、１．７５Ｖ付近から０．７５Ｖ付近までの領域における静電容量（検出器出力）低下の割合は、洗浄液の吐出により反応容器内の液面が上昇することに対応した静電容量変化を示すものと推定され、静電容量（検出器出力）低下の割合は吐出速度と相関する。したがって、静電容量検出器における出力低下の割合から吐出速度を見積もることで、吐出速度の低下を確認することができる。
【００３１】
図４（ａ）の結果を基に、吐出開始前の検出器に出力された静電容量（２．６５Ｖ）との差分を時間で積分した値を計算して得られたグラフを図４（ｂ）に示す。吐出速度が減少するに従い、吐出時間に対する積分値の絶対値は減少傾向にあることがわかる。すなわち、正常な吐出速度である６００μＬ／ｓでの、吐出時間に対する検出器に出力された静電容量の積分値のグラフをあらかじめ用意し、当該グラフに基づき、一定の閾値（例えば、吐出開始０．７秒後における出力積分値−０．９５Ｖｓ）を設定することで、出力積分値の絶対値が一定の閾値を下回る（例えば、吐出速度４０６μＬ／ｓ）場合に、吐出不良と判定することができる。なお、吐出速度４０６μＬ／ｓも正常吐出とみなし、液滴状に吐出した場合（例えば、吐出速度２４７μＬ／ｓ）のみ吐出不良と判定する場合は、閾値の設定は容易となる。
【００３２】
実施例３ 吐出動作の気泡混入の評価
図１に示すＢ／Ｆ洗浄装置を用いて、実施例２と同様、吐出部１１先端を反応容器２０の底から２０ｍｍの高さに保った状態で、洗浄液を吐出速度６００μＬ／ｓで５００μＬ吐出した。吐出部配管に気泡が混入した場合と混入しない（正常に吐出された）場合における静電容量の変化を測定し、正常に吐出された場合の静電容量（検出器出力）値との差分を逐次演算した。
【００３３】
正常吐出時の静電容量（検出器出力）の経時変化を示すグラフと、気泡混入時の静電容量（検出器出力）の経時変化を示すグラフとを重ねたものを図５（ａ）に示し、気泡混入時と正常吐出時とで静電容量（検出器出力）の差分を逐次演算した結果を図５（ｂ）に示す。なお図５（ａ）のうち、正常吐出時の静電容量（検出器出力）の経時変化は、２回測定した結果の平均値とした。また図５（ｂ）のうち、吐出開始後の０．１秒間と吐出終了時前の０．１秒間は、静電容量値が大きく変動するため演算範囲から省いた。
【００３４】
図５（ａ）では吐出開始０．５秒後に気泡混入に由来する静電容量（検出器出力）の変化が確認できるが、正常吐出時における静電容量（検出器出力）との差分に一定の閾値（例えば、０．５Ｖ）を設定することで、気泡が混入しているかを判定することができる。
【００３５】
実施例４ 吸い残しの検知
図１に示すＢ／Ｆ洗浄装置のうち、反応容器２０に収容した液体を吸引部１２により吸引した後の残液量の検知について検討した。
【００３６】
反応容器２０として、内径が約５ｍｍ、高さ約２０ｍｍのポリプロピレン製円筒容器を用意し、当該容器の中に、実施例２で使用した洗浄液０μＬ、１μＬ、３μＬ、５μＬ、１０μＬ、２０μＬをそれぞれ加えた。吸引部１２を反応容器２０の底まで降下させ、静電容量出力を測定した。反応容器２０に加えた洗浄液量と静電容量出力との関係を図６に示す。図６から、例えば、静電容量出力の閾値を３．０Ｖに設定することで、反応容器２０に１μＬ以上の洗浄液が残存している（すなわち吸い残している）ことを検知することができる。
【００３７】
実施例５ Ｂ／Ｆ洗浄動作の出力波形
図１に示すＢ／Ｆ洗浄装置において、まず反応容器２０に洗浄液（実施例２と同じ組成）１００μＬを加えた後、吸引部１２による１００μＬ吸引（操作ａ）、吐出部１１による１００μＬ吐出（操作ｂ）、吸引部１２による１００μＬ吸引（操作ｃ）、吐出部１１による４００μＬ吐出（操作ｄ）、吸引部１２による４００μＬ吸引（操作ｅ）、吐出部１１による４００μＬ吐出（操作ｆ）、吸引部１２による４００μＬ吸引（操作ｇ）、吐出部１１による４００μＬ吐出（操作ｈ）後、洗浄ノズル１０を洗浄ポートに搬送した。前記一連の操作を行なったときの静電容量（検出器出力）変化の一例を図７に示す。なお図７のうち、記号は前述した操作の記号に対応する。
【００３８】
吐出部１１により洗浄液を４００μＬ吐出した（操作ｄ、ｆおよびｈ）時の波形は、図４および５と同様、吐出後に静電容量（検出器出力）が一定割合で低下する切り出し刀状の形状を示している。図７における操作ｄ、ｆおよびｈの波形から算出したピーク面積の平均は０．９２４Ｖｓであり、変動係数（ＣＶ）も１．１％と極めて良好な再現性を示した。
【００３９】
一方、吸引部１２により洗浄液を吸引した（操作ａ、ｃ、ｅおよびｇ）時の波形は、吐出時の波形とは反対側を向いた切り出し刀状の形状を示している。これは、吸引動作の進行に伴い、反応容器２０内の液面が低下することに応じた、静電容量の変化を示すものと推定される。図７において、１００μＬ吸引したとき（操作ａおよびｃ）の波形から算出したピーク面積はそれぞれ、０．４８６Ｖｓ，０．６９７Ｖｓであり、４００μＬ吸引したとき（操作ｅおよびｇ）の波形から算出したピーク面積はそれぞれ、１．２２Ｖｓ，０．９８７Ｖｓであった。吸引時の出力波形が、吐出時の出力波形と比較し再現性が良好でない理由として、吸引部１２による吸引操作では吐出部１１にはない洗浄液の浸漬動作があること、および吸引終了時に反応容器２０に残留した洗浄液と吸引部１２との接触状態のばらつきがあること、に由来するものと思われる。
【００４０】
図７と同じ条件で合計５回のＢ／Ｆ洗浄操作を行ない、それぞれ波形出力データを取得した。操作ａからｈでの波形から算出したピーク面積の平均と変動係数（ＣＶ）を表１に示す。吐出部１１による洗浄液の吐出操作（操作ｄ、ｆおよびｈ）時は、いずれもピーク面積のＣＶが５％以下と良好な再現性が得られた、一方、吸引部１２による洗浄液の吸引操作（操作ａ、ｃ、ｅおよびｇ）時は、ピーク面積のＣＶが１０％を超える操作も見られたものの、吸引による液面低下に対応する特徴的な静電容量変化は共通して観察された。よって、Ｂ／Ｆ洗浄装置に求められる性能、すなわち一定量の吸引／吐出を目詰まりなく速やかに実施できる性能を確認する際は、ピーク面積のＣＶが１０％を超える吸引波形のばらつきがあっても確認作業には影響を与えないことがわかる。
【表１】
【００４１】
以上のように、図１に代表される本発明のＢ／Ｆ洗浄装置は、Ｂ／Ｆ洗浄中の吸引／吐出操作を再現性よくモニタすることができるため、閾値を用いた判定または波形比較による判定により、Ｂ／Ｆ洗浄動作の異常を早期に発見することができる。
【符号の説明】
【００４２】
１０：洗浄ノズル
１１：吐出部
１２：吸引部
１３：基体
２０：反応容器
３０：接地架台
４０：同軸ケーブル
５０：静電容量検出手段
５１：発振器
５２：電流測定部
５３：電源
６０：判定手段
６１：演算部
６２：記録部
【特許請求の範囲】
【請求項１】
反応容器と、前記反応容器を載置する架台と、前記反応容器に液体を吐出する吐出部および前記反応容器に収容された液体を吸引する吸引部を設けた洗浄ノズルと、を備えたＢ／Ｆ洗浄装置であって、
洗浄ノズルに設けた前記吐出部および前記吸引部、ならびに前記架台が導電性を有しており、
前記吐出部および前記吸引部が互いに電気的に接触しており、かつ、
洗浄ノズルと前記架台との間の静電容量を検出する手段と、前記手段からの出力信号に基づき前記吐出部による液体の吐出状態および前記吸引部による液体の吸引状態を判定する判定手段とをさらに備えた、前記洗浄装置。
【請求項２】
請求項１に記載の洗浄装置を用いて吐出状態における静電容量の経時変化を測定し、
前記経時変化を、あらかじめ判定手段に記録した正常な吐出状態における静電容量の経時変化と比較することで、
洗浄ノズルに設けた吐出部による液体の吐出状態を判定する方法。
【請求項３】
請求項１に記載の洗浄装置を用いて吸引状態における静電容量の経時変化を測定し、
前記経時変化を、あらかじめ判定手段に記録した正常な吸引状態における静電容量の経時変化と比較することで、
洗浄ノズルに設けた吸引部による液体の吸引状態を判定する方法。
【請求項１】
反応容器と、前記反応容器を載置する架台と、前記反応容器に液体を吐出する吐出部および前記反応容器に収容された液体を吸引する吸引部を設けた洗浄ノズルと、を備えたＢ／Ｆ洗浄装置であって、
洗浄ノズルに設けた前記吐出部および前記吸引部、ならびに前記架台が導電性を有しており、
前記吐出部および前記吸引部が互いに電気的に接触しており、かつ、
洗浄ノズルと前記架台との間の静電容量を検出する手段と、前記手段からの出力信号に基づき前記吐出部による液体の吐出状態および前記吸引部による液体の吸引状態を判定する判定手段とをさらに備えた、前記洗浄装置。
【請求項２】
請求項１に記載の洗浄装置を用いて吐出状態における静電容量の経時変化を測定し、
前記経時変化を、あらかじめ判定手段に記録した正常な吐出状態における静電容量の経時変化と比較することで、
洗浄ノズルに設けた吐出部による液体の吐出状態を判定する方法。
【請求項３】
請求項１に記載の洗浄装置を用いて吸引状態における静電容量の経時変化を測定し、
前記経時変化を、あらかじめ判定手段に記録した正常な吸引状態における静電容量の経時変化と比較することで、
洗浄ノズルに設けた吸引部による液体の吸引状態を判定する方法。
【図１】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【図２】
【図３】
【図４】
【図５】
【図６】
【図７】
【公開番号】特開２０１３−９６９１０（Ｐ２０１３−９６９１０Ａ）
【公開日】平成２５年５月２０日（２０１３．５．２０）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２０１１−２４１４９６（Ｐ２０１１−２４１４９６）
【出願日】平成２３年１１月２日（２０１１．１１．２）
【出願人】（０００００３３００）東ソー株式会社 (1,901)
【Ｆターム（参考）】
【公開日】平成２５年５月２０日（２０１３．５．２０）
【国際特許分類】
【出願日】平成２３年１１月２日（２０１１．１１．２）
【出願人】（０００００３３００）東ソー株式会社 (1,901)
【Ｆターム（参考）】
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