脈管透過性および病的血管形成を抑制するための化合物、組成物および方法をここに記載する。脈管透過性および病的血管形成を抑制することが可能な化合物および組成物を生産および選別するための方法もまた、本出願に記載する。製薬上の組成物は本出願に記載の組成物に含まれる。本出願に記載の組成物は、たとえば、脈管透過性および病的血管形成を抑制する方法であって、特定の血管形成、透過性および炎症性因子で、たとえば、ＶＥＧＦ、ｂＦＧＦおよびトロンビンのようなものによって誘発される脈管透過性および病的血管形成を抑制する方法が含まれるものにおいて有用である。特定の病気および条件群を処置するための方法もまた本出願において提供する。

【特許請求の範囲】
【請求項１】
組織における脈管透過性を抑制する方法であって、組織に対してアクソン、血管、またはその組合せのリパルシブガイダンスキューを施すことを具える、方法。
【請求項２】
リパルシブガイダンスキューは、ラウンドアバウト受容体またはUnc（アンク）5受容体のリガンドである、請求項1の方法。
【請求項３】
リパルシブガイダンスキューはラウンドアバウト-4（Robo（ロボ）4）受容体のリガンドである、請求項2の方法。
【請求項４】
リパルシブガイダンスキューは、slit（スリット）2またはRobo4と結合するその断片である、請求項3の方法。
【請求項５】
リパルシブガイダンスキューはUnc5b受容体のリガンドである、請求項2の方法。
【請求項６】
リパルシブガイダンスキューはnetrin（ネトリン）-1またはUnc5b受容体と結合するその断片である、請求項5の方法。
【請求項７】
脈管透過性を抑制する薬剤のための選別または評価の方法であって、Git（ギット）1のRobo4媒介活性化に影響をおよぼす前記薬剤の能力を定めることを具える、方法。
【請求項８】
Git 1のRobo 4媒介活性化は、次の工程、すなわち
(a) Robo 4を発現する第1細胞を、候補薬剤と接触させる工程、
(b)第1細胞と基本的に同じであるがRobo 4を実質欠く第2細胞を、候補薬剤と接触させる工程、
(c)第一および第二の細胞において、Git1活性化についてアッセイする工程
を具え、
(d)第1細胞において第2細胞に比べて検出可能な程度により一層高いGit1活性化は前記薬剤によるRobo4媒介Git1活性化を指し示す、方法。
【請求項９】
Git1活性化はARF（アルフ）6不活化を検出することによってアッセイされる、請求項8の方法。
【請求項１０】
ARF6不活化はRac（ラック）不活化を検出することによってアッセイされる、請求項9の方法。
【請求項１１】
脈管透過性を抑制する薬剤のための選別または評価の方法であって、前記薬剤の、ARF6、Rac、Pak（パック）、Mek（メック）、またはErk（エルク）を抑制する能力を定める工程を具える、方法。
【請求項１２】
ARF6、Rac、Pak、Mek、またはErkのRobo4媒介抑制は、次の工程、すなわち
(a)Robo4を発現する第1細胞を候補薬剤と接触させる工程、
(b)第1細胞と基本的に同じであるがRobo4を実質欠く第2細胞を、候補薬剤と接触させる工程、
(c)第1および第2の細胞において、ARF6、Rac、Pak、Mek、Erk、またはその組合せの抑制についてアッセイする工程
を具え、
(d)第1細胞において第2細胞に比べて検出可能な程度により一層低いARF6、Rac、Pak、Mek、またはErkの活性化は前記薬剤によるRobo4媒介のARF6、Rac、Pak、Mek、またはErkの抑制を指し示す、請求項１１の方法。
【請求項１３】
方法は、VEGF、TNF、トロンビン、またはヒスタミンの実質不存在下に実行される、請求項7または11の方法。
【請求項１４】
アッセイは、VEGF、TNF、トロンビン、またはヒスタミンの生物学的に活性な量の存在下に実行される、請求項7または11の方法。
【請求項１５】
呼吸促迫症候群（RDS）を対象体において処置または防止する方法であって、次の、すなわち
(a)前記RDSを持つか、またはそれを持つ危険性のある対象体を識別する工程、および
(b)対象体の肺に対し、ニューロン受容体および内皮細胞と結合するリパルシブガイダンスキューを施す工程
を具える、方法。
【請求項１６】
未熟児網膜症（ROP）を対象体において処置または防止する方法であって、
(a)前記ROPを持つか、またはそれを持つ危険のある対象体を識別する工程、および
(b)対象体の網膜に対し、ニューロン受容体および内皮細胞と結合するリパルシブガイダンスキューを施す工程
を具える、方法。
【請求項１７】
糖尿病性網膜症を対象体において処置または防止する方法であって、
(a)前記糖尿病性網膜症を持つか、またはそれを持つ危険のある対象体を識別する工程、および
(b)対象体の網膜に対し、ニューロン受容体および内皮細胞と結合するリパルシブガイダンスキューを施す工程
を具える、方法。
【請求項１８】
ウェット（湿性）黄斑変性症を対象体において処置または防止する方法であって、
(a)前記ウェット黄斑変性症を持つか、またはそれを持つ危険のある対象体を識別する工程、および
(b)対象体の網膜に対し、ニューロン受容体および内皮細胞と結合するリパルシブガイダンスキューを施す工程
を具える、方法。
【請求項１９】
対象体を、リパルシブキューまたは擬似物で対象体において処置するための方法であって、
(a)VEGFブロッカー、TNFブロッカー、ヒスタミンブロッカー、またはトロンビンブロッカーでの処置のための指示を持つ対象体を識別する工程、および
(b)対象体に対し、ニューロン受容体および内皮細胞と結合するリパルシブガイダンスキューを施す工程
を具える、方法。
【請求項２０】
リパルシブガイダンスキューは、ラウンドアバウト受容体、Unc5受容体、DCC（ネトリン受容体）受容体、ネオゲニン受容体、DSCAM受容体、またはICAM-2（アイカム2）受容体のリガンドである、請求項15、16、17、18、または19の方法。
【請求項２１】
リガンドがSlit2である、請求項20の方法。
【請求項２２】
分離されたポリペプチドであって、ラウンドアバウト４（Robo４）のパキシリン結合性配列を備え、ポリペプチドは全長Robo4を備えない、ポリペプチド。
【請求項２３】
パキシリン結合性配列は、配列番号27または長さで少なくとも10個の残基のその断片からなる、請求項22の分離されたポリペプチド。
【請求項２４】
10から400個までのアミノ酸の分離されたポリペプチドであって、配列番号27または長さで少なくとも10個の残基のその断片を備える、ポリペプチド。
【請求項２５】
10から400個までのアミノ酸の分離されたポリペプチドであって、配列番号27と少なくとも80%の配列相同性を持つアミノ酸配列または長さで少なくとも10個の残基のその断片を備える、ポリペプチド。
【請求項２６】
分離されたポリペプチドであって、ラウンドアバウト4（Robo4）のパキシリン結合性配列（PBS）を備え、ポリペプチドは次の式、すなわち
Ｒ^１−ＰＢＳ−Ｒ^２
式中、R¹およびR²は、無関係に、H、アシル、NH₂、アミノ酸またはペプチドであり、ポリペプチドは全長Robo4を備えない、ポリペプチド。
【請求項２７】
PBSは、配列番号27と少なくとも80%の配列相同性を持つアミノ酸配列または長さで少なくとも10個の残基のその断片からなる、請求項26の分離されたポリペプチド。
【請求項２８】
分離されたポリペプチドであって、配列番号27と少なくとも80%の配列相同性を持つアミノ配列または長さで少なくとも10個の残基のその断片から基本的に構成される、ポリペプチド。
【請求項２９】
分離された核酸であって、請求項22、24、26、または28のポリペプチドをコード化する、核酸。
【請求項３０】
ポリペプチドをコード化する分離された核酸であって、ポリペプチドはラウンドアバウト4（Robo4）のパキシリン結合性配列を備え、ポリペプチドは全長Robo4を備えない、核酸
【請求項３１】
分離された核酸であって、配列番号2または長さで少なくとも30個の残基のその断片からなり、核酸は全長ラウンドアバウト4（Robo4）をコード化しない、核酸。
【請求項３２】
ベクターであって、請求項29、30、または31の分離された核酸を備えるベクター。
【請求項３３】
血管形成を組織において促す方法であって、組織の内皮細胞中に、請求項22、24、26、または28のポリペプチドを備える組成物を配送する工程を具える、方法。
【請求項３４】
血管形成を組織において促す方法であって、組織の内皮細胞中に、請求項29、30、または31の核酸を備える組成物を配送する工程を具える、方法。
【請求項３５】
血管形成を組織において促す方法であって、組織に対し、請求項32のベクターを備える組成物を施す工程を具え、ベクターは内皮細胞を形質導入する、方法。

【図１】

【図２Ａ】

【図２Ｂ】

【図２Ｃ】

【図３Ａ】

【図３Ｂ】

【図３Ｃ】

【図３Ｄ】

【図４Ａ】

【図４Ｂ】

【図４Ｃ】

【図４Ｄ】

【図４Ｅ】

【図４Ｆ】

【図５Ａ】

【図５Ｂ】

【図５Ｃ】

【図５Ｄ】

【図５Ｅ】

【図５Ｆ】

【図５Ｇ】

【図５Ｈ】

【図５Ｉ】

【図６Ａ】

【図６Ｂ】

【図６Ｃ】

【図６Ｄ】

【図６Ｅ】

【図７Ａ】

【図７Ｂ】

【図８Ａ】

【図８Ｂ】

【図９Ａ】

【図９Ｂ】

【図１０】

【図１１Ａ】

【図１１Ｂ】

【図１２Ａ】

【図１２Ｂ】

【図１２Ｃ】

【図１３】

【図１４】

【図１５】

【図１６】

【図１７】

【図１８】

【図１９】

【図２０】

【図２１】

【図２２】

【図２３】

【図２４】

【図２５】

【公表番号】特表２０１０−５１２３２７（Ｐ２０１０−５１２３２７Ａ）
【公表日】平成２２年４月２２日（２０１０．４．２２）
【国際特許分類】
【出願番号】特願２００９−５４０３３４（Ｐ２００９−５４０３３４）
【出願日】平成１９年１２月１１日（２００７．１２．１１）
【国際出願番号】ＰＣＴ／ＵＳ２００７／０２５３５４
【国際公開番号】ＷＯ２００８／０７３４４１
【国際公開日】平成２０年６月１９日（２００８．６．１９）
【出願人】（５０８０８７１４７）ユニヴァーシティー　オブ　ユタ　リサーチ　ファウンデーション (6)
【Ｆターム（参考）】